食品中卡那霉素残留快速检测新方法的研究【字数：10010】
通过对卡那霉素的各方面性质的研究，并且在基于前期深厚的研发基础上，从而研制出卡那霉素胶体金快速检测试纸条，来实现食品的快速定量、定性检测，在紧张的、为时较短的实验期间里，通过自己的努力以及老师的帮助下，最终得出以下实验结果，胶体金溶液最佳pH值为8.3，最佳的硝酸纤维素膜为CN95硝酸纤维素膜，金标抗体稀释2倍为最佳的稀释度，金标抗体喷涂为50 μL/cm2为最佳喷涂量，通过对NC膜上包被抗原和二抗的不同浓度的实验与比较，得出抗原最佳浓度为1.5mg/mL，二抗最佳浓度为1.2mg/mL，最后通过实验得出的这些最佳条件来制作出检测卡那霉素残留的试纸条，最终该试纸条检测出卡那霉素在食品中的最低检测限为150ng/mL。该检测新方法与传统方法相比，涵盖了传统方法的优点，改善了传统方法的缺点，弥补了传统方法的空白，对于保障食品安全有重大的意义。
目 录
1.前言 1
1.1 卡那霉素的概述 1
1.1.1 卡那霉素的简介 1
1.1.2 卡那霉素的应用 1
1.1.3 卡那霉素的功用作用 1
1.1.4 卡那霉素毒的危害 2
1.2 卡那霉素检测的普遍方法 2
1.3 卡那霉素检测的新方法 3
1.4 新方法研究意义 3
2.实验材料与方法 4
2.1 实验仪器、试剂和材料 4
2.1.1 实验仪器 4
2.1.2 实验试剂 4
2.1.3 实验材料 5
2.2 实验设计 5
2.2.1 实验原理 5
2.2.2 实验所需溶液的配制 5
2.2.3 胶体金溶液的制备 6
2.2.4 金标抗体的制备与鉴定 7
2.2.5 试纸条的材料选择 7
2.2.6 试纸条的制备 7
2.2.7 试纸条的组装 8
2.2.8 试纸条的测定方法测试 9
2.2.9 试纸条灵敏度、特异性和稳定性测试 9
3.结果与分析 11
3.1 胶体金溶液鉴定 11
3.1.1 直接鉴定 11
3.1.2 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: ￥351916072$
间接鉴定 11
3.2 试纸条的材料选择 12
3.3 试纸条的制备 12
3.3.1金标抗体最佳稀释度和喷涂量的选择 13
3.3.2 硝酸纤维素膜上抗原与二抗的最佳浓度的选择 13
3.4 试纸条的组装 14
3.5 试纸条试纸条灵敏度、特异性和稳定性测试 15
3.5.1 试纸条灵敏度的测定 15
3.5.2 试纸条特异性的测定 15
3.5.3 试纸条稳定性实验测定 16
4.结论与展望 17
4.1 结论 17
4.2 展望 17
参考文献 18
致谢 19
1前言
1.1 卡那霉素的概述
1.1.1 卡那霉素的简介
卡那霉素分为盐酸卡那霉素和硫酸卡那霉素，因为它是一种蛋白质生物合成抑制剂，所以常被作为选择基因或者是标记基因用于分子克隆中。它可以用于口服和静脉注射，对多种病菌感染有效，从卡那霉素链霉菌中分离得到。分子式为C18H38N4O15S，结构式见下图：
图1卡那霉素的结构式
Figure.1 Structural formula of kanamycin
1.1.2卡那霉素的应用
卡那霉素作为一种氨基糖苷类抗生素，由于它物美价廉和有广泛的抗菌性，因而被人们广泛使用在动物饲养中，但是人们对卡那霉素的使用越来越不规范，并且越演越甚，使得越来越多的食品含有卡那霉素，并且这些食品中有的卡那霉素过量残留，由此可想而知，当人们吃到这些含有过量卡那霉素的食品时，那么将会面临怎样未知的危险。因此，严格控制卡那霉素的使用，合理应用卡那霉素对食品安全和消费者的健康意义重大[1]。
1.1.3 卡那霉素的功用作用
大肠杆菌、克雷白杆菌、肠杆菌属等的一些菌株对卡那霉素较为敏感。立克次体、真菌、病毒等对卡那霉素具有耐药性。因为卡那霉素有减少肠道细菌产生氨的作用，所以对于敏感菌所致的肠道感染患者以及肠道手术前准备的患者都可以口服卡那霉素。还有卡那霉素可以用于敏感菌所致的肺炎、尿路、败血症等系统感染。所以可以将卡那霉素肌注于系统感染患者。将卡那霉素稀释到一定浓度的卡那霉素喷施于棉花叶子上，可用于鉴定是否为转Bt基因抗虫棉，叶子发黄不抗棉铃虫，不变色则为抗虫棉。
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图2 卡那霉素的功用作用
Figure.2 The role of kanamycin
1.1.4 卡那霉素的危害
卡那霉素利用不当会产生许多不良反应，其中有过敏反应，由于注射卡那霉素造成过敏性休克，还有会对神经系统、泌尿系统、消化系统造成危害，对于神经系统，卡那霉素利用不当会对耳蜗神经产生严重的不良反应，患者较轻的是高 听力受损害或听力减退，较重的甚至会耳聋。对于泌尿系统，卡那霉素可引起肾脏损害，患者较轻的是排尿次数减少或者是尿量减少，较重的甚至会排血尿。对于消化系统，患者较轻的是有恶心、呕吐、腹泻等现象，患者较重的有可能会休克死亡[2]。
1.2 卡那霉素检测的普遍方法
食品安全对于人类的健康至关重要，因此食品的安全检测是一项重大的工程，所以要想维护消费者的健康，就要严格控制卡那霉素在食品中的残留。从而检测卡那霉素在食品中的残留就显得非常重要。因此对卡那霉素的残留量进行检测，是确保产品的质量安全，保障人们的生命健康的关键点。迄今为止,检测方法常用的高效液相色谱法、气相色谱法、液相色谱质谱联用技术是卡那霉素药物残留检测的方法。这种仪器检测方法虽然灵敏度高，但是受场地，仪器数量限制，因此需要去创新一种新的检测食品中卡那霉素残留的方法，并且这种检测新方法能够涵盖了传统方法的优点，改善传统方法的缺点，并且能够弥补传统方法的空白，这样的检测方法对于保障食品安全有很大的必要性。
1.3 卡那霉素检测的新方法
目 录
1.前言 1
1.1 卡那霉素的概述 1
1.1.1 卡那霉素的简介 1
1.1.2 卡那霉素的应用 1
1.1.3 卡那霉素的功用作用 1
1.1.4 卡那霉素毒的危害 2
1.2 卡那霉素检测的普遍方法 2
1.3 卡那霉素检测的新方法 3
1.4 新方法研究意义 3
2.实验材料与方法 4
2.1 实验仪器、试剂和材料 4
2.1.1 实验仪器 4
2.1.2 实验试剂 4
2.1.3 实验材料 5
2.2 实验设计 5
2.2.1 实验原理 5
2.2.2 实验所需溶液的配制 5
2.2.3 胶体金溶液的制备 6
2.2.4 金标抗体的制备与鉴定 7
2.2.5 试纸条的材料选择 7
2.2.6 试纸条的制备 7
2.2.7 试纸条的组装 8
2.2.8 试纸条的测定方法测试 9
2.2.9 试纸条灵敏度、特异性和稳定性测试 9
3.结果与分析 11
3.1 胶体金溶液鉴定 11
3.1.1 直接鉴定 11
3.1.2 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: ￥351916072$
间接鉴定 11
3.2 试纸条的材料选择 12
3.3 试纸条的制备 12
3.3.1金标抗体最佳稀释度和喷涂量的选择 13
3.3.2 硝酸纤维素膜上抗原与二抗的最佳浓度的选择 13
3.4 试纸条的组装 14
3.5 试纸条试纸条灵敏度、特异性和稳定性测试 15
3.5.1 试纸条灵敏度的测定 15
3.5.2 试纸条特异性的测定 15
3.5.3 试纸条稳定性实验测定 16
4.结论与展望 17
4.1 结论 17
4.2 展望 17
参考文献 18
致谢 19
1前言
1.1 卡那霉素的概述
1.1.1 卡那霉素的简介
卡那霉素分为盐酸卡那霉素和硫酸卡那霉素，因为它是一种蛋白质生物合成抑制剂，所以常被作为选择基因或者是标记基因用于分子克隆中。它可以用于口服和静脉注射，对多种病菌感染有效，从卡那霉素链霉菌中分离得到。分子式为C18H38N4O15S，结构式见下图：
图1卡那霉素的结构式
Figure.1 Structural formula of kanamycin
1.1.2卡那霉素的应用
卡那霉素作为一种氨基糖苷类抗生素，由于它物美价廉和有广泛的抗菌性，因而被人们广泛使用在动物饲养中，但是人们对卡那霉素的使用越来越不规范，并且越演越甚，使得越来越多的食品含有卡那霉素，并且这些食品中有的卡那霉素过量残留，由此可想而知，当人们吃到这些含有过量卡那霉素的食品时，那么将会面临怎样未知的危险。因此，严格控制卡那霉素的使用，合理应用卡那霉素对食品安全和消费者的健康意义重大[1]。
1.1.3 卡那霉素的功用作用
大肠杆菌、克雷白杆菌、肠杆菌属等的一些菌株对卡那霉素较为敏感。立克次体、真菌、病毒等对卡那霉素具有耐药性。因为卡那霉素有减少肠道细菌产生氨的作用，所以对于敏感菌所致的肠道感染患者以及肠道手术前准备的患者都可以口服卡那霉素。还有卡那霉素可以用于敏感菌所致的肺炎、尿路、败血症等系统感染。所以可以将卡那霉素肌注于系统感染患者。将卡那霉素稀释到一定浓度的卡那霉素喷施于棉花叶子上，可用于鉴定是否为转Bt基因抗虫棉，叶子发黄不抗棉铃虫，不变色则为抗虫棉。
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图2 卡那霉素的功用作用
Figure.2 The role of kanamycin
1.1.4 卡那霉素的危害
卡那霉素利用不当会产生许多不良反应，其中有过敏反应，由于注射卡那霉素造成过敏性休克，还有会对神经系统、泌尿系统、消化系统造成危害，对于神经系统，卡那霉素利用不当会对耳蜗神经产生严重的不良反应，患者较轻的是高 听力受损害或听力减退，较重的甚至会耳聋。对于泌尿系统，卡那霉素可引起肾脏损害，患者较轻的是排尿次数减少或者是尿量减少，较重的甚至会排血尿。对于消化系统，患者较轻的是有恶心、呕吐、腹泻等现象，患者较重的有可能会休克死亡[2]。
1.2 卡那霉素检测的普遍方法
食品安全对于人类的健康至关重要，因此食品的安全检测是一项重大的工程，所以要想维护消费者的健康，就要严格控制卡那霉素在食品中的残留。从而检测卡那霉素在食品中的残留就显得非常重要。因此对卡那霉素的残留量进行检测，是确保产品的质量安全，保障人们的生命健康的关键点。迄今为止,检测方法常用的高效液相色谱法、气相色谱法、液相色谱质谱联用技术是卡那霉素药物残留检测的方法。这种仪器检测方法虽然灵敏度高，但是受场地，仪器数量限制，因此需要去创新一种新的检测食品中卡那霉素残留的方法，并且这种检测新方法能够涵盖了传统方法的优点，改善传统方法的缺点，并且能够弥补传统方法的空白，这样的检测方法对于保障食品安全有很大的必要性。
1.3 卡那霉素检测的新方法
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