no和mj互作对草莓果实采后抗病性影响
摘要：本实验研究了外源一氧化氮（NO）和茉莉酸甲酯（MeJA）复合处理对草莓果实采后抗病性的作用，以“红艳”草莓为试材，经20 μL/L NO和10 μmol/L MeJA处理，接种灰霉菌孢子液后，在20℃恒温环境中贮藏，研究贮藏过程中病斑直径、可溶性固形物（TSS）、维生素C和相关代谢生成物的含量的改变，研究和草莓抵抗疾病感染功能相关的蛋白质与酶的活性的变化规律。结果表明NO和MeJA复合处理可以显著（P<0.05）抑制病菌的生长和发育，可以有效缓解TSS和VC含量的减少。NO和MeJA复合处理有效促进了草莓中总酚、总黄酮和总花色苷含量的增加，使得草莓在贮藏期间能保持相对高的抗氧化能力。可以明显减少丙二醛（MDA）含量的积累，同时也降低了脂质过氧合酶（LOX）的活性。NO和MeJA复合处理提高了GLU、CHT、POD和PPO等一系列与抗病相关的蛋白质和酶的活性，提高了草莓果实抵抗灰霉病原菌侵染的能力，增强了草莓果实的采后抗病性。
目录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1
引言（或绪论）1
1 材料与方法2
1.1 实验材料 2
1.2 仪器与设备 2
1.3 材料处理2
1.4 测定方法3
1.4.1 病斑直径3
1.4.2 可溶性固形物（TSS）和维生素C含量测定3
1.4.3 总酚、总黄酮和总花色苷含量的测定3
1.4.4 丙二醛（MDA）含量和脂氧合酶（LOX）活性测定3
1.4.5 病程相关蛋白（GLU、CHT、POD、PPO）活性的测定3
2 实验结果与分析3
2.1 NO和MeJA处理对草莓果实病斑直径的影响3
2.2 NO和MeJA处理对草莓果实可溶性固形物和维生素C含量的影响3
2.3 NO和MeJA处理对草莓果实总酚、总黄酮和总花色苷含量的影响4
2.4 NO和MeJA处理对草莓果实膜脂质过氧化程度的影响5
2.5 NO和MeJA处理对草莓果实病程相关蛋白活性的影响6
3 讨论7
4 结论7
/> 致谢8
参考文献8 NO和MJ互作对草莓果实采后抗病性影响
食品质量与安全 周自行
引言
引言：草莓果实娇嫩多汁、口感良好、富有营养，但由于其含水量相对高、果皮较薄、组织柔软而难以贮藏，在采后易受微生物病原菌感染而腐败，失去食用价值。灰霉病是草莓果实主要的真菌性病害，可大面积感染草莓园，严重时病害率可达到种植生产面积的75%~83%[1]，因此严重影响草莓的产量和品质，造成巨大的经济损失，如何有效控制草莓花、果实的腐烂成为保证品质和产量的关键因素[2]。一氧化氮（NO）是植物中的一种小分子化合物，具有生物活性和细胞内的信号传递、转导效用，內源NO可以有效抑制果蔬的成熟和衰老，增长产品的贮藏时间，并且改善果蔬采后销售的品质[3]。外源NO处理果实可以提高其花青素含量，增强相关蛋白质和酶的活性，提高植物抵抗逆境的能力[4]。茉莉酸甲酯（Methyl Jasmonate MeJA）普遍存在于高等植物中，是一种天然的化学成分，它具有调控植物生理功能的作用，对植物的生长发育和采后生理功能变化有重要的调节效果[5]，还能作为内源信号分子调节植物对病害的抵抗反应，从而诱导植物代谢过程中许多关键酶基因的协调表达，能有效抑制果蔬贮藏期间病害的发生[6]。本课题以“红艳”草莓为试验原料，探究了MeJA单独作用对草莓果实采后灰霉病的抑制效果及其内在机理，并在此基础上探索了NO和MeJA复合作用对减轻草莓采后病害的功效，以便为草莓抗病防腐技术的开发提供可靠的理论依据。目前国内外MeJA和其他方法复合作用对草莓果实采后保鲜、生理变化和采后病害控制的研究比较多，理论和方法比较成熟，应用前景较好[7][12]，但尚无用NO和MeJA复合处理对草莓果实采后抗病性研究的实验，因此具有较高的研究价值。
1 材料与方法
1．1 实验材料
本实验材料为“红艳”（Fragaria×ananassa Duch.cv. Hongyan）草莓，于2016年3月10日于南京市江宁区锁石村生态园进行采摘，选择形状、大小均匀的，色泽、成熟度（八分熟为佳）等基本一致的、无病虫害无机械损伤的草莓果实，在实验室二次选取符合实验需求的样品后，用自然风进行预冷。
1．2 试剂与仪器设备
碳酸钠、氢氧化钠、磷酸、邻菲罗啉：国药集团化学试剂有限公司；过氧化氢、三氯乙酸、无水乙醇、福林酚试剂：南京寿德试剂器材有限公司。
GL20GH型冷冻离心机：上海安亨科学仪器厂；UV1600型紫外可见分光光度计：上海美普达仪器有限公司；手持阿贝折光仪：日本ATAGO公司；FA1104N电子天平：上海精密科学仪器有限公司；MIR233生化培养箱：日本三洋公司；
1．3 材料处理
通过前期准备实验，筛选出能有效抑制草莓腐烂的NO和MeJA单独处理的最佳浓度，分别为：20 μL/L和10 μmol/L。
将挑选出来的草莓样品随机分成四组操作处理：
（A）对照组，样品不作任何处理，空气熏蒸15 h后，接种10 μL浓度为1×106个/mL的孢子悬浮液，作为对照组（Control）；
（B）MeJA熏蒸12 h后，空气熏蒸3 h后，接种10 μL浓度为1×106个/mL的孢子悬浮液（MJ）；
（C）MeJA熏蒸12 h后，NO熏蒸3 h后，接种10 μL浓度为1×106个/mL的孢子悬浮液（NO +MJ）；
（D）LNNA浸泡20 min后沥干，MeJA熏蒸3 h后，接种10 μL浓度为1×106个/mL的孢子悬浮液（LNNA +MJ）。
接种实验所使用的致病菌为本实验室保存完好的灰霉菌，实验室的菌种于PDA斜面上4℃进行培养。接种前，将实验菌种接种于平板PDA上，26℃下活化14天，然后用无菌水将菌种配成1×106个/ml的孢子悬浮液（血球计数板），随配随用。在接种灰霉菌之前，用浓度为75%的酒精轻轻擦拭草莓表面接种处。刺伤接种孔的深度大约为4 mm、直径为3 mm，孔不易太深太大，用微量移液枪向每个接种孔中定量注入菌液，接种方法参照金鹏[13]的实验方法。
接种完毕后，将草莓样品用塑料保鲜盒（20 cm×12 cm×8 cm）包装好，使果实不相互挤压，避免出现机械损伤，封闭保鲜盒并套以0.01 mm厚的聚乙烯保鲜袋，于恒温（20±1℃）恒湿（9095%）条件下避光贮藏4天。每天观察草莓样品腐烂情况，测量病斑直径大小和TSS，统计记录，并取样测定其他各项指标。每组均选用400个果实，各重复3次。
目录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1
引言（或绪论）1
1 材料与方法2
1.1 实验材料 2
1.2 仪器与设备 2
1.3 材料处理2
1.4 测定方法3
1.4.1 病斑直径3
1.4.2 可溶性固形物（TSS）和维生素C含量测定3
1.4.3 总酚、总黄酮和总花色苷含量的测定3
1.4.4 丙二醛（MDA）含量和脂氧合酶（LOX）活性测定3
1.4.5 病程相关蛋白（GLU、CHT、POD、PPO）活性的测定3
2 实验结果与分析3
2.1 NO和MeJA处理对草莓果实病斑直径的影响3
2.2 NO和MeJA处理对草莓果实可溶性固形物和维生素C含量的影响3
2.3 NO和MeJA处理对草莓果实总酚、总黄酮和总花色苷含量的影响4
2.4 NO和MeJA处理对草莓果实膜脂质过氧化程度的影响5
2.5 NO和MeJA处理对草莓果实病程相关蛋白活性的影响6
3 讨论7
4 结论7
/> 致谢8
参考文献8 NO和MJ互作对草莓果实采后抗病性影响
食品质量与安全 周自行
引言
引言：草莓果实娇嫩多汁、口感良好、富有营养，但由于其含水量相对高、果皮较薄、组织柔软而难以贮藏，在采后易受微生物病原菌感染而腐败，失去食用价值。灰霉病是草莓果实主要的真菌性病害，可大面积感染草莓园，严重时病害率可达到种植生产面积的75%~83%[1]，因此严重影响草莓的产量和品质，造成巨大的经济损失，如何有效控制草莓花、果实的腐烂成为保证品质和产量的关键因素[2]。一氧化氮（NO）是植物中的一种小分子化合物，具有生物活性和细胞内的信号传递、转导效用，內源NO可以有效抑制果蔬的成熟和衰老，增长产品的贮藏时间，并且改善果蔬采后销售的品质[3]。外源NO处理果实可以提高其花青素含量，增强相关蛋白质和酶的活性，提高植物抵抗逆境的能力[4]。茉莉酸甲酯（Methyl Jasmonate MeJA）普遍存在于高等植物中，是一种天然的化学成分，它具有调控植物生理功能的作用，对植物的生长发育和采后生理功能变化有重要的调节效果[5]，还能作为内源信号分子调节植物对病害的抵抗反应，从而诱导植物代谢过程中许多关键酶基因的协调表达，能有效抑制果蔬贮藏期间病害的发生[6]。本课题以“红艳”草莓为试验原料，探究了MeJA单独作用对草莓果实采后灰霉病的抑制效果及其内在机理，并在此基础上探索了NO和MeJA复合作用对减轻草莓采后病害的功效，以便为草莓抗病防腐技术的开发提供可靠的理论依据。目前国内外MeJA和其他方法复合作用对草莓果实采后保鲜、生理变化和采后病害控制的研究比较多，理论和方法比较成熟，应用前景较好[7][12]，但尚无用NO和MeJA复合处理对草莓果实采后抗病性研究的实验，因此具有较高的研究价值。
1 材料与方法
1．1 实验材料
本实验材料为“红艳”（Fragaria×ananassa Duch.cv. Hongyan）草莓，于2016年3月10日于南京市江宁区锁石村生态园进行采摘，选择形状、大小均匀的，色泽、成熟度（八分熟为佳）等基本一致的、无病虫害无机械损伤的草莓果实，在实验室二次选取符合实验需求的样品后，用自然风进行预冷。
1．2 试剂与仪器设备
碳酸钠、氢氧化钠、磷酸、邻菲罗啉：国药集团化学试剂有限公司；过氧化氢、三氯乙酸、无水乙醇、福林酚试剂：南京寿德试剂器材有限公司。
GL20GH型冷冻离心机：上海安亨科学仪器厂；UV1600型紫外可见分光光度计：上海美普达仪器有限公司；手持阿贝折光仪：日本ATAGO公司；FA1104N电子天平：上海精密科学仪器有限公司；MIR233生化培养箱：日本三洋公司；
1．3 材料处理
通过前期准备实验，筛选出能有效抑制草莓腐烂的NO和MeJA单独处理的最佳浓度，分别为：20 μL/L和10 μmol/L。
将挑选出来的草莓样品随机分成四组操作处理：
（A）对照组，样品不作任何处理，空气熏蒸15 h后，接种10 μL浓度为1×106个/mL的孢子悬浮液，作为对照组（Control）；
（B）MeJA熏蒸12 h后，空气熏蒸3 h后，接种10 μL浓度为1×106个/mL的孢子悬浮液（MJ）；
（C）MeJA熏蒸12 h后，NO熏蒸3 h后，接种10 μL浓度为1×106个/mL的孢子悬浮液（NO +MJ）；
（D）LNNA浸泡20 min后沥干，MeJA熏蒸3 h后，接种10 μL浓度为1×106个/mL的孢子悬浮液（LNNA +MJ）。
接种实验所使用的致病菌为本实验室保存完好的灰霉菌，实验室的菌种于PDA斜面上4℃进行培养。接种前，将实验菌种接种于平板PDA上，26℃下活化14天，然后用无菌水将菌种配成1×106个/ml的孢子悬浮液（血球计数板），随配随用。在接种灰霉菌之前，用浓度为75%的酒精轻轻擦拭草莓表面接种处。刺伤接种孔的深度大约为4 mm、直径为3 mm，孔不易太深太大，用微量移液枪向每个接种孔中定量注入菌液，接种方法参照金鹏[13]的实验方法。
接种完毕后，将草莓样品用塑料保鲜盒（20 cm×12 cm×8 cm）包装好，使果实不相互挤压，避免出现机械损伤，封闭保鲜盒并套以0.01 mm厚的聚乙烯保鲜袋，于恒温（20±1℃）恒湿（9095%）条件下避光贮藏4天。每天观察草莓样品腐烂情况，测量病斑直径大小和TSS，统计记录，并取样测定其他各项指标。每组均选用400个果实，各重复3次。
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