花椒叶多酚提取工艺条件优化试验
植物多酚是我们日常饮食中含量最丰富的天然抗氧化剂[1]。平时饮食中多酚的主要来源是水果以及植物衍生的饮料，例如水果汁、茶、咖啡和红酒等，此外蔬菜、谷类、巧克力等也是重要的多酚来源。一些草药类植物及天然产品可以代替部分药物治疗，因此对身体健康起到显著的作用，因此目前这些植物的生物活性得以广泛研究。本文以提取花椒叶中多酚为例，探讨提取工艺的优化以及其中出现的问题，希望能够对于未来花椒叶多酚提取的工艺起到积极的借鉴作用。
目录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1
引言1
花椒叶的研究背景概况1
1.1花椒叶的主要成分2
1.2花椒叶的活性作用2
二、实验方法3
2.1花椒叶多酚的提取及测定3
2.2标准曲线的绘制3
2.3超声波辅助萃取花椒叶多酚最佳条件的确定3
三、试验结果与分析4
3.1单因素试验4
3.1.1乙醇体积分数对花椒叶多酚得率的影响4
3.1.2料液比对花椒叶多酚得率的影响4
3.1.3超声波功率对花椒叶多酚得率的影响4
3.1.4超声萃取时间对花椒叶多酚得率的影响5
3.2响应面法优化提取工艺条件5
四、结论9
结语9
致谢10
参考文献10
花椒叶多酚提取工艺条件优化试验
引言
花椒属于芸香科花椒属，一共可以分为200多个种类，并分布于世界各地。其中我国有39种，主要分布在重庆、河南、宁夏、江苏、河北、湖北等省份（除广东、海南等省份）以及东南亚各个国家。在我国古代，各类古书中都有提到花椒，花椒具有虽性热但散发寒气、生精活血、驱虫抑菌的作用，花椒一般用于在烹饪中的调味料、日常生活中的香料、强身健体的药材等。花椒叶对人体有许多保健作用，例如花椒叶随身携带的话可以除虫，除异味，亦可使用花椒叶泡脚，可以做到除湿气、御寒的作用。我国古代就有对花椒叶药用功能的记载，古人由于饮食条件比较简陋，所以常常有人患蛔虫病，古代中医就常用花椒叶磨成粉，然后让病人煎服，即可应对蛔虫。本 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: ^351916072#
文就以提取花椒叶中多酚为例，探讨提取对于工艺的优化以及在提取过程中出现的问题，希望能够对于未来人们在花椒叶多酚提取的工艺中起到积极的借鉴作用。但对于花椒叶的研究应用却较少[2]。
一、花椒叶的研究概况
1.1 花椒叶的主要成分
花椒叶是一种营养较为丰富的食品，在全国范围内都有分布，全世界的花椒叶种类大约有200多种，主要分布在东亚地区。花椒叶性热、无毒。花椒叶除了富含丰富的维生素以外，还含有多种氨基酸成分，还有大量的不饱和脂肪酸，这些营养物质都对人体有着积极的作用，因此长期食用花椒叶有很多益处。此外，由于花椒叶中富含有多种活性物质，所以花椒叶同样也拥有抑菌的作用。由此可见，花椒叶营养丰富，在保健功效以及药用功效这两方面都有极高利用的价值。
对于花椒叶成分的研究，众多国内外学者都有涉及，以下主要列举几位我国科学家的研究结果。我国科学家主要是对花椒叶中的一些挥发性活性物质进行提取以及研究，并且多数是使用气相色谱法进行研究。其中周向军通过采用气相色谱质谱联用法对通过蒸馏得到的花椒叶挥发成分进行分析和鉴定，一共获取到35种挥发性成分 [3]。得出结论，这35种挥发性成分的峰面积占总挥发油的71.6 %，此中含量比较高的挥发性成分分别为肉豆蔻醚（23.4%）、黄樟素（19.4%）、异丁香甲醚（16.5% ）和罗勒烯（5.4%）等。吴刚则对椿叶花椒叶中的挥发性成份一共判定出33种挥发性活性成分，经由气相色谱面积归一化法测定出椿叶花椒叶挥发性物质的峰面积，发现这33种挥发性物质占了总面积的99.99% [4]。对于簕欓花椒叶的挥发性成分，共鉴定出72种挥发性物质[5]，主要包括芳樟醇（24.36%）β榄香烯（12.03%）、( E) 2己烯1醇（11.73%）和石竹烯氧化物（10.84%）等。
1.2 花椒叶的活性作用
花椒叶虽然作为一种常见的食品，早已经深入我国人民的生活中。[6]但实际上对于花椒叶在实际生活中的保健功效以及药用功效的研究，一直到上世纪八十年代才有学者进行研究，其中对于花椒叶药用功效做研究的人，大多是来自国外的学者以及研究机构，我国学者则更倾向对花椒叶在保健功效方面的研究。我国学者通过研究得出，花椒叶对人体有许多保健作用，例如花椒叶随身携带的话可以除虫，除异味，亦可使用花椒叶泡脚，可以做到除湿气、御寒的作用。[7]我国古代就有对花椒叶药用功能的记载，古人由于饮食条件比较简陋，所以常常有人患蛔虫病，于是古代中医就常用花椒叶磨成粉，然后让病人煎服，即可应对蛔虫。[8]花椒叶对于缓解年迈者的手脚无力、腰酸背痛等症状也有一定的功效，常与其他中草药一同服用，辅以中医疗法，功效显著[9]。然而，虽然花椒叶在保健功效以及药用功效这两方面都有极高的价值，但是，在生活中仍然有大多数人对于这方面的知识并不了解，有关宣传还没有做到位，以及对于食用花椒叶还存在着种种误区，从而最终导致这一高价值作物无法得到大规模推广。因此，对于花椒叶，我们不光要进行研究，还不能忘记做相应的推广，这样才能使得科学研究与实际生产相结合，这样既能对人民的身体健康起到有益的作用，还能带动一些特定地区的经济发展。
二、试验方法
2.1 花椒叶多酚的提取及测定
多酚的提取采用超声波辅助乙醇提取法。
实验中对于多酚含量的测定主要是采用传统的FolinCiocalteu法，该实验的具体方法为：先吸取1 mL待测花椒叶多酚粗液置于5 mL离心管中，再加入1 mL FolinCiocalteu试剂，经过充分的摇匀后在室温中静止放置3 min；随后向混合液中加入1 mL新配制的新鲜10%碳酸钠溶液，充分摇匀后室温静止放置60 min；最后将待测液取样至96孔板中，测量其在790 nm的吸光度值，空白对照使用蒸馏水，并做三次重复试验以减少误差。
2.2 标准曲线的绘制
在进行完吸光度值的测定之后，就要进行标准曲线的绘制了，对于绘制标准曲线，就要利用到试剂没食子酸，利用该试剂作为标准品。具体操作为：准确量取5.0 mg没食子酸标准品，溶于蒸馏水后转入5 mL容量瓶定容，可获得1.0 mg/mL标准溶液，分别将其配制为0、80、160、240、320、400 μg/mL不同浓度标准液，按照1.1中方法测定多酚含量。使用y作为没食子酸标准液浓度，x作为相应的吸光度值，可以制作出相应的标准曲线方程为y=0.0134x+0.0411，相关系数为R2=0.9995。
目录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1
引言1
花椒叶的研究背景概况1
1.1花椒叶的主要成分2
1.2花椒叶的活性作用2
二、实验方法3
2.1花椒叶多酚的提取及测定3
2.2标准曲线的绘制3
2.3超声波辅助萃取花椒叶多酚最佳条件的确定3
三、试验结果与分析4
3.1单因素试验4
3.1.1乙醇体积分数对花椒叶多酚得率的影响4
3.1.2料液比对花椒叶多酚得率的影响4
3.1.3超声波功率对花椒叶多酚得率的影响4
3.1.4超声萃取时间对花椒叶多酚得率的影响5
3.2响应面法优化提取工艺条件5
四、结论9
结语9
致谢10
参考文献10
花椒叶多酚提取工艺条件优化试验
引言
花椒属于芸香科花椒属，一共可以分为200多个种类，并分布于世界各地。其中我国有39种，主要分布在重庆、河南、宁夏、江苏、河北、湖北等省份（除广东、海南等省份）以及东南亚各个国家。在我国古代，各类古书中都有提到花椒，花椒具有虽性热但散发寒气、生精活血、驱虫抑菌的作用，花椒一般用于在烹饪中的调味料、日常生活中的香料、强身健体的药材等。花椒叶对人体有许多保健作用，例如花椒叶随身携带的话可以除虫，除异味，亦可使用花椒叶泡脚，可以做到除湿气、御寒的作用。我国古代就有对花椒叶药用功能的记载，古人由于饮食条件比较简陋，所以常常有人患蛔虫病，古代中医就常用花椒叶磨成粉，然后让病人煎服，即可应对蛔虫。本 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: ^351916072#
文就以提取花椒叶中多酚为例，探讨提取对于工艺的优化以及在提取过程中出现的问题，希望能够对于未来人们在花椒叶多酚提取的工艺中起到积极的借鉴作用。但对于花椒叶的研究应用却较少[2]。
一、花椒叶的研究概况
1.1 花椒叶的主要成分
花椒叶是一种营养较为丰富的食品，在全国范围内都有分布，全世界的花椒叶种类大约有200多种，主要分布在东亚地区。花椒叶性热、无毒。花椒叶除了富含丰富的维生素以外，还含有多种氨基酸成分，还有大量的不饱和脂肪酸，这些营养物质都对人体有着积极的作用，因此长期食用花椒叶有很多益处。此外，由于花椒叶中富含有多种活性物质，所以花椒叶同样也拥有抑菌的作用。由此可见，花椒叶营养丰富，在保健功效以及药用功效这两方面都有极高利用的价值。
对于花椒叶成分的研究，众多国内外学者都有涉及，以下主要列举几位我国科学家的研究结果。我国科学家主要是对花椒叶中的一些挥发性活性物质进行提取以及研究，并且多数是使用气相色谱法进行研究。其中周向军通过采用气相色谱质谱联用法对通过蒸馏得到的花椒叶挥发成分进行分析和鉴定，一共获取到35种挥发性成分 [3]。得出结论，这35种挥发性成分的峰面积占总挥发油的71.6 %，此中含量比较高的挥发性成分分别为肉豆蔻醚（23.4%）、黄樟素（19.4%）、异丁香甲醚（16.5% ）和罗勒烯（5.4%）等。吴刚则对椿叶花椒叶中的挥发性成份一共判定出33种挥发性活性成分，经由气相色谱面积归一化法测定出椿叶花椒叶挥发性物质的峰面积，发现这33种挥发性物质占了总面积的99.99% [4]。对于簕欓花椒叶的挥发性成分，共鉴定出72种挥发性物质[5]，主要包括芳樟醇（24.36%）β榄香烯（12.03%）、( E) 2己烯1醇（11.73%）和石竹烯氧化物（10.84%）等。
1.2 花椒叶的活性作用
花椒叶虽然作为一种常见的食品，早已经深入我国人民的生活中。[6]但实际上对于花椒叶在实际生活中的保健功效以及药用功效的研究，一直到上世纪八十年代才有学者进行研究，其中对于花椒叶药用功效做研究的人，大多是来自国外的学者以及研究机构，我国学者则更倾向对花椒叶在保健功效方面的研究。我国学者通过研究得出，花椒叶对人体有许多保健作用，例如花椒叶随身携带的话可以除虫，除异味，亦可使用花椒叶泡脚，可以做到除湿气、御寒的作用。[7]我国古代就有对花椒叶药用功能的记载，古人由于饮食条件比较简陋，所以常常有人患蛔虫病，于是古代中医就常用花椒叶磨成粉，然后让病人煎服，即可应对蛔虫。[8]花椒叶对于缓解年迈者的手脚无力、腰酸背痛等症状也有一定的功效，常与其他中草药一同服用，辅以中医疗法，功效显著[9]。然而，虽然花椒叶在保健功效以及药用功效这两方面都有极高的价值，但是，在生活中仍然有大多数人对于这方面的知识并不了解，有关宣传还没有做到位，以及对于食用花椒叶还存在着种种误区，从而最终导致这一高价值作物无法得到大规模推广。因此，对于花椒叶，我们不光要进行研究，还不能忘记做相应的推广，这样才能使得科学研究与实际生产相结合，这样既能对人民的身体健康起到有益的作用，还能带动一些特定地区的经济发展。
二、试验方法
2.1 花椒叶多酚的提取及测定
多酚的提取采用超声波辅助乙醇提取法。
实验中对于多酚含量的测定主要是采用传统的FolinCiocalteu法，该实验的具体方法为：先吸取1 mL待测花椒叶多酚粗液置于5 mL离心管中，再加入1 mL FolinCiocalteu试剂，经过充分的摇匀后在室温中静止放置3 min；随后向混合液中加入1 mL新配制的新鲜10%碳酸钠溶液，充分摇匀后室温静止放置60 min；最后将待测液取样至96孔板中，测量其在790 nm的吸光度值，空白对照使用蒸馏水，并做三次重复试验以减少误差。
2.2 标准曲线的绘制
在进行完吸光度值的测定之后，就要进行标准曲线的绘制了，对于绘制标准曲线，就要利用到试剂没食子酸，利用该试剂作为标准品。具体操作为：准确量取5.0 mg没食子酸标准品，溶于蒸馏水后转入5 mL容量瓶定容，可获得1.0 mg/mL标准溶液，分别将其配制为0、80、160、240、320、400 μg/mL不同浓度标准液，按照1.1中方法测定多酚含量。使用y作为没食子酸标准液浓度，x作为相应的吸光度值，可以制作出相应的标准曲线方程为y=0.0134x+0.0411，相关系数为R2=0.9995。
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