油菜素内酯对葡萄果实腐烂和品质的影响
以“巨峰”葡萄果实作为研究对象，研究了2,4-表油菜素内酯（EBR）对葡萄果实贮藏品质和腐烂的影响。结果表明， 5μmol/L EBR处理显著降低了葡萄果实的发病率和病斑直径，延缓了果实硬度、TSS、TA和VC含量的下降，保持了较好的果实品质。EBR还可提高葡萄果实总酚含量及SOD和CAT酶活性，降低了超氧阴离子的产生速率，维持较高的DPPH自由基清除率。这些结果为EBR应用于葡萄采后保鲜提供了理论依据。
目录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1
引言 1
1材料与方法2
1.1 材料处理2
1.2试剂与仪器2
1.3测定指标和方法2
1.3.1发病率和病斑直径的测定3
1.3.2 果实硬度的测定3
1.3.3 TSS、TA含量的测定3
1.3.4维生素C含量的测定3
1.3.5总酚含量的测定3
1.3.6 DPPH自由基清除率的测定3
1.3.7 SOD活性和超氧阴离子产生的测定3
1.3.8 SOD活性和超氧阴离子产生速率的测定3
1.3.9 POD活性的测定4
1.4过氧化氢酶(CAT)活性的测定4
1.5数据分析4
2结果与分析4
2.1 油菜素内酯处理对葡萄果实发病率和病斑直径的影响4
2.2 油菜素内酯处理对葡萄果实硬度、TA、TSS的影响5
2.3油菜素内酯处理对葡萄果实Vc的影响7
2.4 油菜素内酯处理对葡萄果实总酚含量的影响8
2.5 油菜素内酯对葡萄果实DPPH自由基清除率的影响8
2.6 油菜素内酯处理对葡萄果实SOD活性、超氧阴离子产生速率的影响10
2.7油菜素内酯对葡萄果实CAT活性的影响11
3 讨论 14
4 结论 14
致谢15
参考文献15
油菜素内酯对葡萄果实腐烂和品质的影响
引言
葡萄属于浆果类果实，在植物学 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: ^351916072*
分类上属于葡萄科（Vitaceae）葡萄属（Vitis L），是非呼吸跃变型果实。葡萄果实含水量高，酸甜可口，营养丰富，与苹果、柑橘、香蕉并称“中国四大水果”。葡萄不仅口感独特，果实中还含有丰富的营养物质，其中包含维生素C、类黄酮和白藜芦醇等天然抗氧化剂，具有清除自由基、软化血管、延缓衰老、预防癌症的发生[1]等功效。我国的葡萄种植资源丰富，也是葡萄的原产国之一，主要品种有巨峰、夏黑、玫瑰香等种类，产量位于世界第二位[2]。我国生产的葡萄85%用于鲜食，而全世界大部分地区生产的葡萄都是酿葡萄酒，所以我国是鲜食葡萄第一大国。葡萄由于其高营养价值和方便食用而深受消费者们的青睐。因此，葡萄的开发利用具有极其重要的意义。迄今，葡萄果实采后保鲜技术有热处理[34]、气调保鲜[56]、涂膜保鲜[7]和一甲基环丙烯（1MCP）[8]等方法。
油菜素内酯（Brassinosteroids，BRs）是一种由植物天然产生的作物生长所必需的激素，油菜素内酯在植物生长过程中对细胞的生长以及细胞分裂起着非常重要的调节作用，且对植物光合作用有极强的增益效果，同时还可以有效增强植物活性[9]。近年来，在果蔬类作物采摘后，如何对其保鲜贮藏是业界研究的重心，油菜素内酯便是现阶段作物保鲜贮藏技术中的关键性要素。在保鲜贮藏的问题上，我们需要攻克的主要问题是作物的抗病性以及抗冷性。在青椒对低温的抗性问题上，众多研究表明，通过外来性的油菜素内酯来对青椒加以处理，有效地提高了作物内含抗氧化酶的生物活性，使其对低温环境的耐受性大大提高[10]。高慧等[11]发现在经过2,4表油菜素内酯处理后的茄子相较于未处理的茄子，在同等贮藏条件下，腐败速度有明显降低，处理后作物的贮藏品质也显著提升，不难发现这是由于油菜素内酯有效提高了作物内的抗氧化酶的生物活性。油菜素内酯可以在一定程度上保证作物细胞膜的完整，缓解膜脂的过氧化程度，以此来减少作物冷冻贮藏过程中冻伤的作物的数量。因此，本实验采用2,4表油菜素内酯 (2,4epibrassionolide, EBR)处理葡萄果实，研究葡萄贮藏期间的腐烂、品质和抗氧化活性的变化，为油菜素内酯处理在葡萄果实保鲜中的应用提供依据与技术支持。
1 材料与方法
1．1 材料处理
供试材料为“巨峰”葡萄，采摘于江苏省镇江市句容丁庄葡萄园，采后立即运会实验室。将果穗在室温下摊晾后散去田间热，然后将果粒一一剪下，保留35mm左右的果梗，挑选成熟度一致、果粒大小均匀、色泽统一、无机械损伤和病虫害的果粒以备试验。将果粒分为四组，首先用70% 酒精轻轻擦拭葡萄果实赤道表面，然后用灭菌枪头在赤道部位打孔（直径2mm，深2mm），进行一下处理：
接种20μL无菌蒸馏水，于25℃贮藏12小时，作为对照（concrol）；
接种20μL5μmol/LEBR溶液，贮藏12小时；
接种20μL无菌蒸馏水，于25℃贮藏12小时后再注入15μL预先配置好的浓度为1?105个/ml的B.cinerea孢子悬浮液；
接种20μL5μmol/LEBR溶液，于25℃贮藏12小时后再注入15μL预先配置好的浓度为1?105个/ml的B.cinerea孢子悬浮液。
接种后将葡萄果粒分装到白色塑料盒中，每盒90颗果实，用两层保鲜膜包裹保湿，在相对湿度9095%、25℃的恒温箱中贮藏60h，每12h记录发病率和病斑直径并拍照，同时测定鲜样指标，并取冻样液氮速冻置于20℃保存用于测定各项指标。每组900个果实，每组处理做3次重复，整个实验重复2次。
1．2 试剂与仪器
磷酸、邻菲啰啉、碳酸钙、石英砂、碳酸钠、硼酸、硼砂、核黄素
无水乙醇、三氯乙酸、三氯化铁、丙酮、邻菲洛琳、甲酸、甲醇、醋酸、醋酸钠、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、磷酸氢二钾、磷酸二氢钾；
Flion试剂、DPPH（1,1diphney12picrylhydrazyl）、NBT、EDTANa2：美国Sigma公司；
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摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1
引言 1
1材料与方法2
1.1 材料处理2
1.2试剂与仪器2
1.3测定指标和方法2
1.3.1发病率和病斑直径的测定3
1.3.2 果实硬度的测定3
1.3.3 TSS、TA含量的测定3
1.3.4维生素C含量的测定3
1.3.5总酚含量的测定3
1.3.6 DPPH自由基清除率的测定3
1.3.7 SOD活性和超氧阴离子产生的测定3
1.3.8 SOD活性和超氧阴离子产生速率的测定3
1.3.9 POD活性的测定4
1.4过氧化氢酶(CAT)活性的测定4
1.5数据分析4
2结果与分析4
2.1 油菜素内酯处理对葡萄果实发病率和病斑直径的影响4
2.2 油菜素内酯处理对葡萄果实硬度、TA、TSS的影响5
2.3油菜素内酯处理对葡萄果实Vc的影响7
2.4 油菜素内酯处理对葡萄果实总酚含量的影响8
2.5 油菜素内酯对葡萄果实DPPH自由基清除率的影响8
2.6 油菜素内酯处理对葡萄果实SOD活性、超氧阴离子产生速率的影响10
2.7油菜素内酯对葡萄果实CAT活性的影响11
3 讨论 14
4 结论 14
致谢15
参考文献15
油菜素内酯对葡萄果实腐烂和品质的影响
引言
葡萄属于浆果类果实，在植物学 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: ^351916072*
分类上属于葡萄科（Vitaceae）葡萄属（Vitis L），是非呼吸跃变型果实。葡萄果实含水量高，酸甜可口，营养丰富，与苹果、柑橘、香蕉并称“中国四大水果”。葡萄不仅口感独特，果实中还含有丰富的营养物质，其中包含维生素C、类黄酮和白藜芦醇等天然抗氧化剂，具有清除自由基、软化血管、延缓衰老、预防癌症的发生[1]等功效。我国的葡萄种植资源丰富，也是葡萄的原产国之一，主要品种有巨峰、夏黑、玫瑰香等种类，产量位于世界第二位[2]。我国生产的葡萄85%用于鲜食，而全世界大部分地区生产的葡萄都是酿葡萄酒，所以我国是鲜食葡萄第一大国。葡萄由于其高营养价值和方便食用而深受消费者们的青睐。因此，葡萄的开发利用具有极其重要的意义。迄今，葡萄果实采后保鲜技术有热处理[34]、气调保鲜[56]、涂膜保鲜[7]和一甲基环丙烯（1MCP）[8]等方法。
油菜素内酯（Brassinosteroids，BRs）是一种由植物天然产生的作物生长所必需的激素，油菜素内酯在植物生长过程中对细胞的生长以及细胞分裂起着非常重要的调节作用，且对植物光合作用有极强的增益效果，同时还可以有效增强植物活性[9]。近年来，在果蔬类作物采摘后，如何对其保鲜贮藏是业界研究的重心，油菜素内酯便是现阶段作物保鲜贮藏技术中的关键性要素。在保鲜贮藏的问题上，我们需要攻克的主要问题是作物的抗病性以及抗冷性。在青椒对低温的抗性问题上，众多研究表明，通过外来性的油菜素内酯来对青椒加以处理，有效地提高了作物内含抗氧化酶的生物活性，使其对低温环境的耐受性大大提高[10]。高慧等[11]发现在经过2,4表油菜素内酯处理后的茄子相较于未处理的茄子，在同等贮藏条件下，腐败速度有明显降低，处理后作物的贮藏品质也显著提升，不难发现这是由于油菜素内酯有效提高了作物内的抗氧化酶的生物活性。油菜素内酯可以在一定程度上保证作物细胞膜的完整，缓解膜脂的过氧化程度，以此来减少作物冷冻贮藏过程中冻伤的作物的数量。因此，本实验采用2,4表油菜素内酯 (2,4epibrassionolide, EBR)处理葡萄果实，研究葡萄贮藏期间的腐烂、品质和抗氧化活性的变化，为油菜素内酯处理在葡萄果实保鲜中的应用提供依据与技术支持。
1 材料与方法
1．1 材料处理
供试材料为“巨峰”葡萄，采摘于江苏省镇江市句容丁庄葡萄园，采后立即运会实验室。将果穗在室温下摊晾后散去田间热，然后将果粒一一剪下，保留35mm左右的果梗，挑选成熟度一致、果粒大小均匀、色泽统一、无机械损伤和病虫害的果粒以备试验。将果粒分为四组，首先用70% 酒精轻轻擦拭葡萄果实赤道表面，然后用灭菌枪头在赤道部位打孔（直径2mm，深2mm），进行一下处理：
接种20μL无菌蒸馏水，于25℃贮藏12小时，作为对照（concrol）；
接种20μL5μmol/LEBR溶液，贮藏12小时；
接种20μL无菌蒸馏水，于25℃贮藏12小时后再注入15μL预先配置好的浓度为1?105个/ml的B.cinerea孢子悬浮液；
接种20μL5μmol/LEBR溶液，于25℃贮藏12小时后再注入15μL预先配置好的浓度为1?105个/ml的B.cinerea孢子悬浮液。
接种后将葡萄果粒分装到白色塑料盒中，每盒90颗果实，用两层保鲜膜包裹保湿，在相对湿度9095%、25℃的恒温箱中贮藏60h，每12h记录发病率和病斑直径并拍照，同时测定鲜样指标，并取冻样液氮速冻置于20℃保存用于测定各项指标。每组900个果实，每组处理做3次重复，整个实验重复2次。
1．2 试剂与仪器
磷酸、邻菲啰啉、碳酸钙、石英砂、碳酸钠、硼酸、硼砂、核黄素
无水乙醇、三氯乙酸、三氯化铁、丙酮、邻菲洛琳、甲酸、甲醇、醋酸、醋酸钠、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、磷酸氢二钾、磷酸二氢钾；
Flion试剂、DPPH（1,1diphney12picrylhydrazyl）、NBT、EDTANa2：美国Sigma公司；
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