不同nisin浓度对单增李斯特菌抑制作用探究
单核细胞增生李斯特氏菌（简称单增李斯特菌）是一种广泛存在于奶类、水产类、蔬菜类、肉品类食物中的食源性病原菌。在许多国家曾发生过单增李斯特菌中毒事件，因此在食品中抑制其增长迫在眉睫。乳酸菌链球菌素（Nisin）是乳酸乳球菌乳酸亚种产生的一种具有活性的线型多肽，也是一种天然的抑菌剂，对单增李斯特菌等众多革兰氏阳性菌有较强的抑制作用，并且天然食品添加剂越来越受人们的喜爱，因此本实验以Nisin为抑菌剂，通过测量牛津杯抑菌圈大小以及Nisin对4℃下BHI液体培养基中单增李斯特菌的抑制生长，探究Nisin对单增李斯特菌的抑制作用。研究结果得出从测量的抑菌圈角度来看，0.1g/L，0.2g/L，0.3g/L，0.4g/L，0.5g/L，0.6g/L，0.7g/L，0.8g/L，0.9g/L，1.0g/L的Nisin浓度对单增李斯特菌均有抑制作用，并且随着浓度的提升，抑菌圈直径变大，抑制效果逐渐增强。在贮藏实验中，作用于4℃下BHI液体培养基中单增李斯特菌的0.05g/L Nisin在36h迅速减少了2Log CFU/ml的菌数，0.2g/L的Nisin在84h可以使单增李斯特菌全部死亡，0.5g/L的Nisin作用更加强烈，单增李斯特菌在72h时全部致死。说明Nisin的抑菌能力与其剂量有关，剂量越大，抑菌效果更加显著。
目录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1
引言（或绪论）2
1 材料与方法3
1.1 实验材料3
1.2 实验设备 3
1.3 实验方法 5
1.3.1牛津杯抑菌圈实验5
1.3.2单增李斯特菌与Nisin贮藏实验5
2结果与分析6
2.1不同浓度的Nisin对单增李斯特菌的抑制作用初筛结果6
2.2 Nisin对单增李斯特菌贮藏实验的抑菌作用6
3 讨论7
致谢8
参考文献9
不同Nisin浓度对单增李斯特菌抑制作用探究
食品科技与工程 邓飘惠
引言
引言
冷却肉是指始终保藏在04℃范围内的鲜肉，在生产运输流通一系 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: @351916072@
列过程中，常常容易受到微生物的污染。这些微生物按毒害作用来分，分为病原性微生物和腐败性微生物。其中病原性微生物入侵人体内，常常引发各种疾病甚至死亡。例如单增李斯特菌，沙门氏菌以及金黄色葡萄球菌，在运输不当或者温度控制不佳时，容易造成细菌滋生，使食物受到严重污染，人体的生命健康也会受到威胁。
目前，国际公认李斯特菌属中的菌种有七个，分别是单核细胞增生李斯特氏菌(Listeria monocytogenes，LM)，绵羊李斯特菌（Listeria. iuanuii）,英诺克李斯特菌（Listeria. innocua），威尔斯李斯特菌（Listeria. welshimeri），西尔李斯特菌（Listeria. seeligeri），格氏李斯特菌（Listeria. grayi）和默氏李斯特菌（Listeria. Murrayi）[1]。其中单增李斯特菌是七种李斯特菌中唯一一种可引起人类疾病的李斯特菌，被李斯特菌感染所产生的病称为李斯特菌病[2]。它是一种革兰氏阳性兼性厌氧细胞内寄生菌，膜外可以生成荚膜，对环境的抗逆性十分强，可以生存在40%的NaCl溶液与强酸强碱的环境中，具有较大的生长温度范围[3]。单增李斯特菌的最适生长地区为37℃中性或略微碱性的环境。在大自然中，李斯特菌往往存在于各种环境中，例如动植物的腐殖质、水或土壤中，并污染多种食物，包括肉类，奶制品，蛋类，海产品等，比如冻猪肉，冰淇淋，未消毒的鲜奶，生鸡肉，奶酪馅饼都是单增李斯特菌容易侵染的食物。Holch A等人[4]研究发现单增李斯特菌可以利用内化作用，进入肠道上皮或者吞噬细胞，在宿主细胞复制后跨越人体的肠道屏障，借助淋巴系统和血液循环系统到达胎盘和大脑，穿越胎盘、血脑屏障造成孕妇流产，引起脑膜炎、败血症等严重疾病；甚至造成肝和脾的脓肿以及局部坏死[5]。
随着即时食物的发展，人们过上了无需加热便食用食物的便捷生活，因此近年出现多起单增李斯特菌污染食物中毒事件。 1999年底，美国发生了历史上因食用带有李斯特菌的食品而引发的最严重的食物中毒事件，据美国疾病控制和防治中心资料显示，在美国密歇根州有14人因食用被该菌污染的“热狗”和熟肉而死亡，在另外22个州97人患此病，6名妇女流产。2001年11月以来，我国质检部门多次从美国、加拿大、法国、爱尔兰、比利时、丹麦等二十多家肉类加工厂进口的猪腰、猪肚、猪耳、小排等三十多批近千吨猪副产品中检出单增李斯特菌、沙门氏菌等致病菌。2009年，有报道统计单增李斯特菌的致死率高达20%，远高于其他同类食品致病菌，例如沙门氏菌（0.08%）[6]和霍乱弧菌（0.0050.01%）[7]。目前，根据单增李斯特菌的鞭毛抗原H与抗体抗原O的不同，已经鉴定出了16个血清型，大约90%临床感染的疾病是由血清型Ia、Ib 和IVb引起的[8]。2011年10月26日，美国的科罗拉多州的延森农场的甜瓜受到李斯特菌污染并且大量传播，导致美国26个州的133个人遭到感染，并且死亡人数达到30多人，这是美国自1998年以来致死人数最多的一次食源性疫病疫情。2015年4月9日，美国疾病控制预防中心宣布，美国至少8人因食用美国蓝风铃(Blue Bell)公司冰淇淋产品后，感染单增李斯特菌并且导致3人死亡。
众多中毒事件表明单增李斯特菌对人体胁迫十分危险，致死率非常高，因此控制以及遏制单增李斯特菌在食品中的生长对于保障食品安全和人们的生命安全至关重要。国内外已有研究发现细菌素对革兰氏阳性菌具有抑制作用，能抑制或杀死与之相同或相似的其他微生物，而对产生菌本身无影响[9]。由于其具有作为天然食品防腐剂和抗生素的潜能，在各种应用中倍受欢迎[10]。而且，美国食品和药品管理局已认可乳酸菌及其副产品用作食品成分是普遍安全的[11]。
乳酸菌素是一种良好的抑菌素，尤其抑制一些致病菌，因此可以在食品加工和储藏行业进行大规模应用。如Nisin作为一种安全无毒的天然防腐剂，已经被众多国家广泛利用。也有报道称乳酸菌是动物肠道的优势菌种，利用这些优势菌种制作益生菌，可以动态调节动物肠道环境[12]。
在食品中主要应用在乳制品，肉制品，啤酒果汁饮料等。①在干酪、巴氏灭菌干酪、巴氏灭菌奶、馆藏浓缩奶、高温处理奶、酸奶等，适量的Nisin可以有效抑制肉毒梭状芽孢杆菌的生长和繁殖，延长乳制品的贮藏周期；②在肉类产品中，经常应用于熏猪肉咸猪肉、香肠、真空包装的牛肉、罐装火腿等；降低肉的pH值，减少残留的亚硝酸盐，避免对人体的伤害；③Nisin对乳酸菌和啤酒中的片球菌引起的腐败可以有效防治，提高啤酒的稳定性，保持啤酒的新鲜度；阻止果汁中酸土芽孢杆菌的生长，防治腐败变质。
目录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1
引言（或绪论）2
1 材料与方法3
1.1 实验材料3
1.2 实验设备 3
1.3 实验方法 5
1.3.1牛津杯抑菌圈实验5
1.3.2单增李斯特菌与Nisin贮藏实验5
2结果与分析6
2.1不同浓度的Nisin对单增李斯特菌的抑制作用初筛结果6
2.2 Nisin对单增李斯特菌贮藏实验的抑菌作用6
3 讨论7
致谢8
参考文献9
不同Nisin浓度对单增李斯特菌抑制作用探究
食品科技与工程 邓飘惠
引言
引言
冷却肉是指始终保藏在04℃范围内的鲜肉，在生产运输流通一系 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: @351916072@
列过程中，常常容易受到微生物的污染。这些微生物按毒害作用来分，分为病原性微生物和腐败性微生物。其中病原性微生物入侵人体内，常常引发各种疾病甚至死亡。例如单增李斯特菌，沙门氏菌以及金黄色葡萄球菌，在运输不当或者温度控制不佳时，容易造成细菌滋生，使食物受到严重污染，人体的生命健康也会受到威胁。
目前，国际公认李斯特菌属中的菌种有七个，分别是单核细胞增生李斯特氏菌(Listeria monocytogenes，LM)，绵羊李斯特菌（Listeria. iuanuii）,英诺克李斯特菌（Listeria. innocua），威尔斯李斯特菌（Listeria. welshimeri），西尔李斯特菌（Listeria. seeligeri），格氏李斯特菌（Listeria. grayi）和默氏李斯特菌（Listeria. Murrayi）[1]。其中单增李斯特菌是七种李斯特菌中唯一一种可引起人类疾病的李斯特菌，被李斯特菌感染所产生的病称为李斯特菌病[2]。它是一种革兰氏阳性兼性厌氧细胞内寄生菌，膜外可以生成荚膜，对环境的抗逆性十分强，可以生存在40%的NaCl溶液与强酸强碱的环境中，具有较大的生长温度范围[3]。单增李斯特菌的最适生长地区为37℃中性或略微碱性的环境。在大自然中，李斯特菌往往存在于各种环境中，例如动植物的腐殖质、水或土壤中，并污染多种食物，包括肉类，奶制品，蛋类，海产品等，比如冻猪肉，冰淇淋，未消毒的鲜奶，生鸡肉，奶酪馅饼都是单增李斯特菌容易侵染的食物。Holch A等人[4]研究发现单增李斯特菌可以利用内化作用，进入肠道上皮或者吞噬细胞，在宿主细胞复制后跨越人体的肠道屏障，借助淋巴系统和血液循环系统到达胎盘和大脑，穿越胎盘、血脑屏障造成孕妇流产，引起脑膜炎、败血症等严重疾病；甚至造成肝和脾的脓肿以及局部坏死[5]。
随着即时食物的发展，人们过上了无需加热便食用食物的便捷生活，因此近年出现多起单增李斯特菌污染食物中毒事件。 1999年底，美国发生了历史上因食用带有李斯特菌的食品而引发的最严重的食物中毒事件，据美国疾病控制和防治中心资料显示，在美国密歇根州有14人因食用被该菌污染的“热狗”和熟肉而死亡，在另外22个州97人患此病，6名妇女流产。2001年11月以来，我国质检部门多次从美国、加拿大、法国、爱尔兰、比利时、丹麦等二十多家肉类加工厂进口的猪腰、猪肚、猪耳、小排等三十多批近千吨猪副产品中检出单增李斯特菌、沙门氏菌等致病菌。2009年，有报道统计单增李斯特菌的致死率高达20%，远高于其他同类食品致病菌，例如沙门氏菌（0.08%）[6]和霍乱弧菌（0.0050.01%）[7]。目前，根据单增李斯特菌的鞭毛抗原H与抗体抗原O的不同，已经鉴定出了16个血清型，大约90%临床感染的疾病是由血清型Ia、Ib 和IVb引起的[8]。2011年10月26日，美国的科罗拉多州的延森农场的甜瓜受到李斯特菌污染并且大量传播，导致美国26个州的133个人遭到感染，并且死亡人数达到30多人，这是美国自1998年以来致死人数最多的一次食源性疫病疫情。2015年4月9日，美国疾病控制预防中心宣布，美国至少8人因食用美国蓝风铃(Blue Bell)公司冰淇淋产品后，感染单增李斯特菌并且导致3人死亡。
众多中毒事件表明单增李斯特菌对人体胁迫十分危险，致死率非常高，因此控制以及遏制单增李斯特菌在食品中的生长对于保障食品安全和人们的生命安全至关重要。国内外已有研究发现细菌素对革兰氏阳性菌具有抑制作用，能抑制或杀死与之相同或相似的其他微生物，而对产生菌本身无影响[9]。由于其具有作为天然食品防腐剂和抗生素的潜能，在各种应用中倍受欢迎[10]。而且，美国食品和药品管理局已认可乳酸菌及其副产品用作食品成分是普遍安全的[11]。
乳酸菌素是一种良好的抑菌素，尤其抑制一些致病菌，因此可以在食品加工和储藏行业进行大规模应用。如Nisin作为一种安全无毒的天然防腐剂，已经被众多国家广泛利用。也有报道称乳酸菌是动物肠道的优势菌种，利用这些优势菌种制作益生菌，可以动态调节动物肠道环境[12]。
在食品中主要应用在乳制品，肉制品，啤酒果汁饮料等。①在干酪、巴氏灭菌干酪、巴氏灭菌奶、馆藏浓缩奶、高温处理奶、酸奶等，适量的Nisin可以有效抑制肉毒梭状芽孢杆菌的生长和繁殖，延长乳制品的贮藏周期；②在肉类产品中，经常应用于熏猪肉咸猪肉、香肠、真空包装的牛肉、罐装火腿等；降低肉的pH值，减少残留的亚硝酸盐，避免对人体的伤害；③Nisin对乳酸菌和啤酒中的片球菌引起的腐败可以有效防治，提高啤酒的稳定性，保持啤酒的新鲜度；阻止果汁中酸土芽孢杆菌的生长，防治腐败变质。
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