不同施氮水平下菘蓝的主要次生代谢产物
目录
摘要 1
关键词 1
引言 1
1 材料与方法 1
1.1材料 1
1.2 试验设计 1
1.3测定项目与方法 1
1.3.1靛蓝靛玉红含量测定 1
1.3.2（R,S）告依春含量测定 2
1.3.3多糖含量的测定 2
1.3.4蛋白质含量的测定 2
1.4 数据统计分析 2
2结果与分析 2
2.1不同施氮水平对菘蓝叶中靛蓝的含量影响 2
2.2不同施氮水平对菘蓝叶中靛玉红的含量影响 2
2.3不同施氮水平对菘蓝根中（R,S）告依春的含量影响 3
2.4不同施氮水平对多糖的影响 3
2.5不同施氮水平对蛋白质的影响 4
2.6 菘蓝主要次生代谢产物与多糖、蛋白质的相关性 4
3讨论 5
3.1不同施氮水平对菘蓝主要次生代谢产物的影响 5
3.2不同施氮水平对菘蓝根中多糖、蛋白质含量的影响 5
3.3 不同施氮水平菘蓝主要次生代谢产物与多糖、蛋白质的关系 5
致谢 6
参考文献 6
Abstract 7
引言
不同施氮水平下菘蓝主要次生代谢产物与多糖的关系研究
[摘要] 目的：通过分析比较菘蓝主要次生代谢产物与多糖、蛋白质含量之间的关系，确立适宜菘蓝生长的最佳氮素形态及配比。方法：在田间条件下研究了不同施氮水平对菘蓝主要次生代谢产物靛蓝、靛玉红、（R,S）告依春的影响及其与多糖、蛋白质的关系。结果：不同施氮水平下，菘蓝主要次生代谢产物靛蓝、靛玉红及（R,S）告依春的含量存在显著性差异；NH4+N/NO3N=75/25和NH4+N/NO3N=25/75对菘蓝次生代谢物质的形成和积累有利，且NH4+N/NO3N=25/75＞NH4+N/NO3N=75/25。相关性分析结果表明，多糖与靛蓝、靛玉红、（R,S）告依春、蛋白质均呈正相关，且蛋白质与靛蓝、靛玉红、（R,S）告依春也均呈正相关，但靛玉红与靛蓝、（R,S）告依春之间均呈负相关，因此应获得次生代 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: @351916072@
谢产物和多糖、蛋白质均较高时的平衡点。结论：综合考虑，NH4+N/NO3N 为25：75是最适宜的施氮水平。
[关键词] 氮素形态；菘蓝；多糖；蛋白质；次生代谢产物
菘蓝（Isatis indigotica Fort.）系十字花科菘蓝属一年生或二年生草本植物，其根入药称为板蓝根，叶入药称为大青叶，均有清热解毒 、凉血消斑之功效[1]。在河北、安徽、江苏、河南、甘肃等多个省区均有栽培[2]。作为临床配方及制剂的大宗药材，菘蓝有效成分能较好的抑制甲型流感病毒的增殖[3]。大青叶主要含吲哚类、喹唑酮类、芥子苷类等成分[4]，其中吲哚类靛蓝、靛玉红具有保肝、抗菌等多种活性[5]，并作为其药材和制剂的质量控制指标[4]。板蓝根临床上常与荆芥、薄荷、金银花等组成复方，广泛用于治疗病毒感染性疾病。此外，还用于治疗急慢性咽喉炎 、流行性乙脑炎、水痘、单纯疱疹性角膜炎、带状疱疹、肾病、尿毒症等[6] 。2003年国家科技部一系列筛选抗SARS中药的实验结果还证实板蓝根具有良好的抗肺部炎症活性[7]。板蓝根多糖作为其主要活性成分之一，已有报道能促进T细胞、B细胞、NK细胞等免疫细胞的功能，有调血脂作用[8]。板蓝根多糖可以作为其质量控制指标之一[9]。板蓝根中的（R,S）告依春是抗病毒的主要活性成分之一[10，11] 。《中国药典》2010版（一部）以（R,S）告依春作为板蓝根药材及其制剂的质量控制指标。精氨酸被认为是板蓝根中起药理作用的重要成分之一，精氨酸在提取液中的含量与板蓝根中总蛋白质含量有关，有些板蓝根中精氨酸的含量高达1.5%~5%左右，精氨酸在游离氨基酸中所占的相对百分率为35.34%62%，占水解氨基酸的相对百分率为24.53%~41.6%[12，13]。
菘蓝作为一项重要中药资源，在国内中医药界颇受青睐。菘蓝用药量的继续增加，提高菘蓝产量和品质直接关系到生产的经济效益，从而影响到生产的发展。目前菘蓝的研究主要集中在化学成分、药理活性、制剂工艺、临床应用及组织培养等方面，关于不同氮素形态及比例下菘蓝的次生代谢产物与多糖、蛋白质的关系的研究未见报道，为此通过田间试验，研究安徽居群菘蓝植株的靛蓝、靛玉红含量、（R,S）告依春含量及多糖、蛋白质含量对不同氮素形态及比例下氮水平的响应，探究适合安徽居群菘蓝主要次生代谢物质积累的最佳氮素形态，以期提高氮肥利用率，为菘蓝的优质栽培提供一定的科学依据。
1 材料与方法
1.1材料
供试材料为安徽亳州的菘蓝果实，经大学王康才教授鉴定其母株为十字花科菘蓝（Isatis indigotica Fort.），实验地设在大学江浦农场园艺站实验基地。
1.2试验设计
试验采用大田试验，每个小区面积为3.75m2（1.5m*2.5m），于2013年5月21日进行条播，行株距25cm*7cm。小区间距40cm，沟深30cm，四周设1m宽保护行。共设计7个氮素水平，每个处理磷、钾肥用量相同，按KH2PO4150kg/hm2水平施用，3个重复小区，除对照组（不施氮，根灌等量清水代替，只施磷、钾肥，以NCK表示）外，分别为铵硝比(NH4+N/NO3N) 100：0、75：25、50：50、25：75、0：100及全有机N（酰胺态氮）组，以N100：0、N75：25、N50：50、N25：75、N0：100和NY表示，单因素随机区组排列，常规田间管理。共两次处理，分别为7月19日和9月17日，于10月18日进行采样。其中NH4+N由硫酸铵提供，NO3N由硝酸钙提供，全有机N由尿素（含N46%）提供，磷钾肥由磷酸二氢钾提供。
1.3测定项目及方法
1.3.1靛蓝靛玉红含量测定 准确称取粉末0.50g，分别置于索氏提取器中，加氯仿适量浸泡15h，于80℃水浴加热回流提取至无色。将提取液减压浓缩蒸干，残渣用甲醇分次溶解并定容至100mL容量瓶中，摇匀。经0.45μm微孔滤膜滤过后，用超高效液相色谱仪对样品中靛蓝、靛玉红含量进行测定，并以色谱峰面积和标准曲线计算其含量。
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