不同成熟期的芍药种子芍药苷含量测定
目录
摘要3
关键词3
引言3
1材料与方法3
1.1仪器与试剂 3
1.1.1仪器3
1.1.2试剂3
1.1.3材料3
1.2方法 3
1.2.1色谱条件3
1.2.2对照品溶液制备4
1.2.3样品溶液制备4
1.2.4线性关系4
1.2.5稳定性试验4
1.2.6重复性试验4
1.2.7回收率试验4
2结果与分析5
2.1不同成熟期的芍药种子的大小与重量5
2.2不同成熟期的芍药种子的芍药苷含量5
3讨论 5
3.1种子大小与成熟度的关系5
3.2种子重量与成熟度的关系5
3.3种子芍药苷含量与成熟度的关系5
致谢5
参考文献6
Abstract6
引言
不同成熟期的芍药种子芍药苷含量测定
摘 要 目的：测定不同成熟期的芍药种子的种皮中芍药苷的含量，观察分析种子成熟度与芍药苷含量的关系。方法：采收不同成熟期的芍药种子，测定形态参数，以甲醇回流提取芍药苷，定容后作为样品。通过高效液相色谱法测定其芍药苷含量，从而比较不同成熟期内芍药种子的种皮中芍药苷的含量差异，观察种子成熟度与芍药苷含量的关系。结果：芍药种子大小与成熟度无明显相关性，芍药种子重量随成熟度增高而降低，芍药苷含量随成熟度增高而增高。结论：成熟度越高的芍药种子芍药苷含量越高。
关键词 芍药种子；芍药苷；成熟期；白芍
白芍为毛茛科植物芍药Paeonia lactiflora Pall.的干燥根，具有养血调经、敛阴止汗、柔肝止痛、平抑肝阳的功效[1]。芍药性耐寒，在我国北方都可以露地越冬，土质以深厚的壤土最适宜，以湿润土壤生长最好，但排水必须良好。积水尤其是冬季很容易使芍药肉质根腐烂，所以低洼地、盐碱地均不宜栽培。芍药性喜肥，圃地要深翻并施入充分的腐熟厩肥，在阳光充足处生长最好[2]。近年来，经现代药理研究发现白芍中芍药苷有降血糖、抗肿瘤、调节免疫、保护心脑血管 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: *351916072*
系统、抗炎、抗病原微生物、神经保护、调节自身免疫系统及抗抑郁等作用[36]。芍药苷是芍药的主要活性成分，药典规定其含量不得少于1.6%，且芍药苷属于单萜类在酸碱条件下不稳定[79]。芍药不仅结实率低，而且种子存在发芽缓慢，发芽率低现象[10]。本实验通过测定不同成熟期的芍药种子中芍药苷的含量，观察种子成熟度与芍药苷含量的关系。为生产中提高种子萌发率，探索芍药苷生理作用提供依据。
1 材料与方法
1．1 仪器与试剂
1．1．1 仪器 Agilent 1120G4288A 一体式液相色谱仪、SPD20A紫外可见光检测器
1．1．2 试剂 甲醇（分析醇）、甲醇（色谱醇）、纯净水（自制）、芍药苷标准品（中国药品生物制品检定所，批号：0736200934）
1．2 方法
1．2．1 色谱条件 流动相：甲醇水(30：70)；流速：1. 0 mLmin1；检测波长：230 nm；柱温：室温；进样量：20 μL
A
B
图1 对照品及样品的HPLC图
A.对照品；B.样品
Fig 1 control?products and?samples of HPLC?graph
A.?control;?B. samples
1．2．2 对照品溶液制备 精密称定芍药苷标准品40 mg，置100 mL容量瓶中，加甲醇定容为0.4 mgmL1溶液，摇匀备用。
1．2．3 样品溶液制备 将芍药果实洗净测量其长度、宽度、重量，剥开取出种子，测量种粒直径、湿重，放入烘箱80 ℃烘烤1 h，取出测量干重；将烘干后的芍药种子碾压至种皮破裂，浸泡于甲醇中12 h，倒入烧瓶中放入水浴锅中回流提取30 min，抽滤后用50 mL容量瓶定容。
1．2．4 线性关系 取标准品溶液，过微孔滤膜，分别进样6 μL、8 μL、10 μL、12 μL、14 μL注入液相色谱仪，记录色谱图，峰面积对进样量进行线性回归，经计算﹙表1﹚数据的回归方程为：y=8.1×106x－4.6×106，R2=0.9999。
表1 标准品芍药苷含量及峰面积
Table 1 The?standard?content of paeoniflorin and?peak area
进样量(μL)
芍药苷含量(μg)
峰面积
6
8
10
12
14
2.4
3.2
4.0
4.8
5.6
43739411
59981424
75841673
92368468
108225105
1．2．5 稳定性试验 取标准品溶液，在同一仪器上分别在2 h、4 h、6 h、8 h、12 h、24 h精密吸取标准品溶液15 μL 在1.2.1项色谱条件条件下测定，记录平均峰面积为115937286，RSD3.2%。
1．2．6 重复性试验 取同一批药材白芍15 g，共5分，分别进行测定，测定平均峰面积为28048905，RSD2.1%.
1．2．7 回收率试验 取芍药苷样品溶液，加入芍药苷标准品溶液﹙0.4 mgmL﹣1﹚1 mL，用甲醇﹙色谱纯﹚定容至10 mL，静置，按照1.2.1项下色谱条件，进样5 μL，测定含量，计算平均回收率为96.7%。
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