逆境处理下茶树叶片显微结构观察
摘要：以茶树（Camellia Sinensis）品种‘迎霜’为材料，研究4℃低温胁迫、10%PEG模拟干旱胁迫、盐胁迫处理下，0 h、4 h 、12 h、24 h、2 d、4 d、6 d、8 d、10 d时茶树叶片组织结构上的变化；研究茶树叶片在非生物胁迫下的生理响应，为茶树抗逆种质资源的开发利用和茶树的引种以及寻求提高茶树抗逆性栽培技术等提供理论依据。
目录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1
引言1
1 材料与方法2
1.1 试验材料、试剂与仪器2
1.1.1 试验材料2
1.1.2 试验设计2
1.1.3试验试剂与仪器2
1.2 试验方法 2
2 结果与分析3
2.1 低温胁迫对茶树叶片解剖结构的影响3
2.1 干旱胁迫对茶树叶片解剖结构的影响4
2.1 盐胁迫对茶树叶片解剖结构的影响4
3 讨论 5
致谢5
参考文献5
逆境处理下茶树叶片显微结构观察
引言
茶树[Camellia Sinensis (L.) O. Kuntze]属山茶科山茶属多年生常绿木本植物，原产于热带及亚热带，是一种喜暖喜湿的叶用植物，其嫩叶经过加工后的茶饮品是世界上三大无酒精饮料之一。随着世界环境的变化，非生物胁迫常常伴随着植物的生长发育。（Xiong et al., 2002）高盐、低温、干旱等非生物逆境能对植物，特别是农作物的生长、发育和结实造成严重的不良影响，是全球农业减产的重要因素。近年来，非生物胁迫已严重影响了茶树的生长和产量。
低温不仅影响植物的生长发育，而且影响其产量和品质，同时温度也严格限制了物种的分布区域（Thomashow et al.，1999）。在中国广大茶区，春季茶树遭受低温冷害与冻害已经成为制约茶叶产业发展的重要问题。预防低温特别是“倒春寒”对茶树生长和茶树生产造成的影响，变得越来越重要。另外对于次适宜高纬度茶区的山东省，由于冬季气温低持续时间长、茶树极易受到冻害影响，也给茶叶生产带来严重的损失。
随着世
*好棒文|www.hbsrm.com +Q: ^3^5`1^9`1^6^0`7^2#
界环境的急剧变化，茶树在生长过程中，时常遭遇高温、低温、干旱、病虫害等不利因素的影响，其中干旱已是一个长期存在的世界性难题，已严重影响到茶叶的产量和品质（张云华 等，2005；张士功 等，2001；孙世利 & 骆耀平，2006；刘红梅，2010；Chakraborty et al.，2001; Sharma & Kumar，2005）。
联合国粮农组织的调查结果显示，全球6％的陆地面积遭受着土壤盐渍化的侵蚀，20％的灌溉农业受到不同程度的盐害威胁。土壤盐渍化正肆元忌惮地吞噬着人类赖以生存的有限的土地资源，成为严重制约农业生产的一个全球性问题。盐胁迫并不是茶树生长和生产过程中的主要影响因子，但是随着我国耕地面积的减少以及土壤盐渍化程度的加深，在未来的几十年内，茶树生长也可能会受到盐胁迫的影响，制约其产业的发展。
叶片，是茶树进行光合作用、蒸腾作用和气体交换的主要器官，同时也是人类采摘的主要部位，其叶片的显微结构不尽是茶树一系列生理活动的基础，同时，与茶树品种的产量、品质、抗逆性等都有着密切的关系。因此，研究茶树叶片显微结构，对深入了解茶叶细胞的结构及其组成具有重要的意义；研究茶树非生物胁迫处理下叶片的显微结构，有助于了解茶树对非生物胁迫的响应。
1 材料与方法
1．1 试验材料、试剂与仪器
1．1．1 试验材料 取一年生‘迎霜’茶苗培养于容积为20 L并装有15 L pH 5.5营养液（配方由南京土壤所提供）的聚乙烯盆中，盆上用带孔硬质泡沫板和海绵固定植株，每盆20蔸，每蔸1株。每天充分供氧，每7 d更换1次营养液。
1．1．2 试验设计 试验设以下处理：（1）低温胁迫：将茶苗置于4℃人工气候箱中处理，对照放于15~16℃人工气候箱中处理。材料每天浇水以保持基质湿润；（2）干旱胁迫：用10%PEG6000模拟干旱胁迫处理。PEG6000按照试验设计浓度直接加入营养液中，并调节营养液pH至5.5；（3）盐胁迫：用NaCl配制600 mmol /L 浓度的营养液。
以上三组处理，分别在0h、4h、12h、24h、2d、4d、6d、8d、10 d时取样，采样部位为2~3位叶。采用完全随机试验设计，重复3~5次。
1．1．3 试验试剂与器材 仪器：石蜡切片机、烘箱、显微镜、染色缸、小培养皿、镊子、毛笔、吸水纸、纱布、载玻片、盖玻片等。
试剂：FAA固定液(70%酒精90 mL、冰醋酸5 mL、福尔马林5 mL)、10%番红水溶液、0.5%固绿（用95%的酒精配制）、酒精（100%、95%、80%、70%、50%）、二甲苯、蒸馏水、甘油、中性树胶等。
1．2 试验方法
（1）固定：FAA固定液固定48小时以上。
（2）脱水：50%酒精→70%酒精→83%酒精→95%酒精→100%酒精→100%酒精。每级2 h。100%酒精中1.5 h。其中70%酒精处可长期保存。
（3）透明：1/2二甲苯+1/2无水乙醇 (2 h) →纯二甲苯(1.5 h) →纯二甲苯(1.5 h)
（4）浸蜡：将处理的材料置于1/2石蜡（固体粉末状）+1/2二甲苯中，40℃烘箱敞口过夜。
（5）包埋：先提升恒温箱的温度至60℃，换纯蜡3次，每次1~2 h，用硬的电光纸、牛皮纸叠纸盒，置于45~60℃的烫板上，倒入材料，摆放好材料，把标签（正面向外置于底部），补足石蜡，倒好后轻轻的置于冷水盆中，注意底面要接触盆中凉水，待石蜡全部凝固后可取出晾干，也可在凉水盆中放置过夜。
（6）切片：对包埋的材料进行修块、粘块、整修后，保证材料四周都有石蜡包围。但不可太多。切面的上、下边平行。用加热的解剖刀蘸取少许石蜡碎屑，并迅速将石蜡块四周的碎屑烫平，使石蜡块牢固地粘在台木上。检查切片机，安装切片刀、调整好刀的角度，调整石蜡块与刀口之间的角度与位置后开始切片。
（7）粘片：将粘贴剂置簿玻片上，再取切片浮置粘片剂上，然后置烘片台上，使切片展开烫平，材料不现皱纹为度。最后将切片依次排好，用滤纸吸去多余水分，同时以记号笔在玻片上编号，放入温箱中烘干，温度30～40℃中过夜。
目录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1
引言1
1 材料与方法2
1.1 试验材料、试剂与仪器2
1.1.1 试验材料2
1.1.2 试验设计2
1.1.3试验试剂与仪器2
1.2 试验方法 2
2 结果与分析3
2.1 低温胁迫对茶树叶片解剖结构的影响3
2.1 干旱胁迫对茶树叶片解剖结构的影响4
2.1 盐胁迫对茶树叶片解剖结构的影响4
3 讨论 5
致谢5
参考文献5
逆境处理下茶树叶片显微结构观察
引言
茶树[Camellia Sinensis (L.) O. Kuntze]属山茶科山茶属多年生常绿木本植物，原产于热带及亚热带，是一种喜暖喜湿的叶用植物，其嫩叶经过加工后的茶饮品是世界上三大无酒精饮料之一。随着世界环境的变化，非生物胁迫常常伴随着植物的生长发育。（Xiong et al., 2002）高盐、低温、干旱等非生物逆境能对植物，特别是农作物的生长、发育和结实造成严重的不良影响，是全球农业减产的重要因素。近年来，非生物胁迫已严重影响了茶树的生长和产量。
低温不仅影响植物的生长发育，而且影响其产量和品质，同时温度也严格限制了物种的分布区域（Thomashow et al.，1999）。在中国广大茶区，春季茶树遭受低温冷害与冻害已经成为制约茶叶产业发展的重要问题。预防低温特别是“倒春寒”对茶树生长和茶树生产造成的影响，变得越来越重要。另外对于次适宜高纬度茶区的山东省，由于冬季气温低持续时间长、茶树极易受到冻害影响，也给茶叶生产带来严重的损失。
随着世
*好棒文|www.hbsrm.com +Q: ^3^5`1^9`1^6^0`7^2#
界环境的急剧变化，茶树在生长过程中，时常遭遇高温、低温、干旱、病虫害等不利因素的影响，其中干旱已是一个长期存在的世界性难题，已严重影响到茶叶的产量和品质（张云华 等，2005；张士功 等，2001；孙世利 & 骆耀平，2006；刘红梅，2010；Chakraborty et al.，2001; Sharma & Kumar，2005）。
联合国粮农组织的调查结果显示，全球6％的陆地面积遭受着土壤盐渍化的侵蚀，20％的灌溉农业受到不同程度的盐害威胁。土壤盐渍化正肆元忌惮地吞噬着人类赖以生存的有限的土地资源，成为严重制约农业生产的一个全球性问题。盐胁迫并不是茶树生长和生产过程中的主要影响因子，但是随着我国耕地面积的减少以及土壤盐渍化程度的加深，在未来的几十年内，茶树生长也可能会受到盐胁迫的影响，制约其产业的发展。
叶片，是茶树进行光合作用、蒸腾作用和气体交换的主要器官，同时也是人类采摘的主要部位，其叶片的显微结构不尽是茶树一系列生理活动的基础，同时，与茶树品种的产量、品质、抗逆性等都有着密切的关系。因此，研究茶树叶片显微结构，对深入了解茶叶细胞的结构及其组成具有重要的意义；研究茶树非生物胁迫处理下叶片的显微结构，有助于了解茶树对非生物胁迫的响应。
1 材料与方法
1．1 试验材料、试剂与仪器
1．1．1 试验材料 取一年生‘迎霜’茶苗培养于容积为20 L并装有15 L pH 5.5营养液（配方由南京土壤所提供）的聚乙烯盆中，盆上用带孔硬质泡沫板和海绵固定植株，每盆20蔸，每蔸1株。每天充分供氧，每7 d更换1次营养液。
1．1．2 试验设计 试验设以下处理：（1）低温胁迫：将茶苗置于4℃人工气候箱中处理，对照放于15~16℃人工气候箱中处理。材料每天浇水以保持基质湿润；（2）干旱胁迫：用10%PEG6000模拟干旱胁迫处理。PEG6000按照试验设计浓度直接加入营养液中，并调节营养液pH至5.5；（3）盐胁迫：用NaCl配制600 mmol /L 浓度的营养液。
以上三组处理，分别在0h、4h、12h、24h、2d、4d、6d、8d、10 d时取样，采样部位为2~3位叶。采用完全随机试验设计，重复3~5次。
1．1．3 试验试剂与器材 仪器：石蜡切片机、烘箱、显微镜、染色缸、小培养皿、镊子、毛笔、吸水纸、纱布、载玻片、盖玻片等。
试剂：FAA固定液(70%酒精90 mL、冰醋酸5 mL、福尔马林5 mL)、10%番红水溶液、0.5%固绿（用95%的酒精配制）、酒精（100%、95%、80%、70%、50%）、二甲苯、蒸馏水、甘油、中性树胶等。
1．2 试验方法
（1）固定：FAA固定液固定48小时以上。
（2）脱水：50%酒精→70%酒精→83%酒精→95%酒精→100%酒精→100%酒精。每级2 h。100%酒精中1.5 h。其中70%酒精处可长期保存。
（3）透明：1/2二甲苯+1/2无水乙醇 (2 h) →纯二甲苯(1.5 h) →纯二甲苯(1.5 h)
（4）浸蜡：将处理的材料置于1/2石蜡（固体粉末状）+1/2二甲苯中，40℃烘箱敞口过夜。
（5）包埋：先提升恒温箱的温度至60℃，换纯蜡3次，每次1~2 h，用硬的电光纸、牛皮纸叠纸盒，置于45~60℃的烫板上，倒入材料，摆放好材料，把标签（正面向外置于底部），补足石蜡，倒好后轻轻的置于冷水盆中，注意底面要接触盆中凉水，待石蜡全部凝固后可取出晾干，也可在凉水盆中放置过夜。
（6）切片：对包埋的材料进行修块、粘块、整修后，保证材料四周都有石蜡包围。但不可太多。切面的上、下边平行。用加热的解剖刀蘸取少许石蜡碎屑，并迅速将石蜡块四周的碎屑烫平，使石蜡块牢固地粘在台木上。检查切片机，安装切片刀、调整好刀的角度，调整石蜡块与刀口之间的角度与位置后开始切片。
（7）粘片：将粘贴剂置簿玻片上，再取切片浮置粘片剂上，然后置烘片台上，使切片展开烫平，材料不现皱纹为度。最后将切片依次排好，用滤纸吸去多余水分，同时以记号笔在玻片上编号，放入温箱中烘干，温度30～40℃中过夜。
版权保护: 本文由 hbsrm.com编辑，转载请保留链接: www.hbsrm.com/nongxue/yy/622.html
