大丽花花粉活力与储藏性的分析
摘要：本实验以大丽花品种‘十字架’为材料，对不同养分含量的40多种培养基进行检测，筛选出了大丽花花粉萌发的最适培养基为0.005%H3BO3+0.09%CaCl·2H2O+0.095%KNO3+0.04%MgSO4·7H2O+0.02KCl+1.5%PEG4000。再以无水氯化钙为干燥剂检测不同干燥时长对‘十字架’花粉活力的影响，测定了不同干燥条件下的花粉萌发率，得出干燥2h花粉活性最好。比较了室温下干燥6h和-80℃低温预处理后室温下、4℃、-20℃储藏对大丽花的花粉活力的影响。结果表明，室温下干燥6h和-80℃低温预处理对储藏条件下的大丽花花粉活力都有促进作用，只是-80℃下的促进作用更为明显。不同低温储藏对花粉活力并无显著提高，反而与室温下储藏相比较有一定的减缓作用。
目录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1
引言1
1材料与方法2
1.1实验材料及花粉采集 2
1.2花粉离体萌发最适培养基的筛选 2
1.3干燥储藏对大丽花花粉活力的影响 3
1.4大丽花花粉活力与储藏性的探究 3
1.5数据处理及分析方法3
2结果与分析4
2.1花粉离体萌发最适培养基的筛选结果4
2.1.1各培养基平均萌发率及分析4
2.2干燥储藏对大丽花花粉活力的影响4
2.2.1各不同干燥处理下的萌发率及结果分析4
2.3干燥储藏对大丽花花粉活力的影响5
2.3.1各处理的日平均萌发率5
2.3.2花粉萌发与储藏性的方差分析结果5
3讨论 6
3.1大丽花离体萌发最适培养基的筛选6
3．2 干燥储藏对大丽花花粉活力的影响6
3．3.3大丽花花粉活性与储藏性的探究结果 6
致谢7
参考文献7
附图一9
附图二9
附图三 10
大丽花花粉活力与储藏性的分析
引言
引言：大丽花Dahlia pinnata C
*好棒文|www.hbsrm.com +Q: ^351916072*
av为菊科(Compositae)大丽花属多年生球根花卉，全属约27种[1]。大丽花是世界名花之一，在我国栽培已有400多年的历史。其茎杆粗壮，叶片肥大，花形与牡丹相似，以花期长、花量多、花朵大著称，具有花姿优美、花型多样、品种繁多等特点，被誉为花卉中的宠儿[24]。其环境适应性很强，许多品种适宜在北方栽培，以东北和华北地区栽培较盛［5］。
花粉生活力是指花粉具有存活、生长、萌发或发育的能力[6]。在杂交育种工作中，为解决亲本花期不一致和远距离杂交的问题，更需要保存生活的花粉[7]。不同类群植物花粉在自然条件下的寿命，花粉的储藏条件，以及花粉生活力的测定有所区别，这些差异对于研究花粉/柱头的相互作用，作物改良与育种操作，基因库的保持，不亲和性与受精关系，生理调节对花粉萌发的影响和基因流等，均有非常重要的实践意义[8]。近年来关于观赏植物的花粉活性与其储藏性有人做过一些研究, 但对大丽花的花粉活力与储藏性研究尚未见报道。控制温度和湿度是贮藏好花粉的关键。检测不同保存预处理后一定温度或湿度下不同大丽花品种的耐储藏性及其花粉活性，或某种特定的大丽花品种的花粉最适储藏条件，目前还未有人做相关研究。
大丽花花粉萌发的最适培养基，目前国内外还未见相关报道。唐岱等[9]用ME3+16%PEG4000+12%蔗糖，菊花花粉萌发率可达45%80%。除对PEG和蔗糖、CA2+、B+在此培养基中对菊花花粉萌发有研究外,鉴于盐分是否对菊花花粉萌发有促进作用或不可缺少缺乏相关研究, 代光明等[10]对ME3培养基的盐分对菊花花粉萌发进行试验，结果表明:在培养基加人H3BO4、CACL22H2O、KH2PO4、CUSO45H2O维生素B1+B6、COCL26H2O对菊花花粉萌发有明显促进效果。其中ME3培养基的盐类和维生素附加16％PEG4000和12%的蔗糖的培养基下野菊花的花粉萌发率为83.0%，而含16%PEG4000+12%蔗糖+CaC12.H20880+H3BO450的基本培养基培养对野菊花进行萌发检测，其萌发率为27.0%。
近年来常用的植物花粉活力的测定方法主要有离体萌发法、活体萌发法、无机酸法和染色法４类。相关研究表明TTC染色法检测花粉活力是应用较多的；无机酸法则能较准确快速测定臭椿的花粉活力；MTT染色法是简单快速测定杜鹃花花粉活力的最适染色法［11，1218］．菊科花粉活力的检测以花粉在离体萌发培养基上的萌发率来表示花粉生活力结果准确可靠[19]。赵宏波等[20] 研究表明菊花脑、南京野菊、毛华菊和栽培小菊rm432、rm461、rm482 花粉在离体萌发最适的培养基ME3 +200 gL1PEG4000上，花粉萌发率分别为57.7 %、52.5 %、 44.8 %和30.9 %、22.3 %、20.9 %，且花粉管生长良好，便于观察统计。离体萌发法操作简便、快速且结果直观，只需要一般的显微镜即可进行花粉萌发观察。
本实验以花粉萌发率较高的大丽花十字架品种为检测材料，对不同养分含量的40多种液体离体萌发培养基进行检测选出大丽花花粉萌发的已知内最适培养基。后以萌发率较高的十字架品种的花粉为材料，分别对其做低温﹣80℃下冷冻预处理3h，室内自然通风晾干6h的预处理，以不做任何干燥处理为空白对照，分别置于常温、4℃、﹣20℃下储藏，后每隔24h取一定量的花粉用离体萌发法进行萌发率检测，通过一系列正交实验进对大丽花的花粉活力和储藏性的关系及相关影响进行探究。
1 材料与方法
1．1 实验材料及花粉采集
1．1．1本实验于2016年3—5月于大学锁石村菊花基地和大学园艺学院菊花实验室进行。提供花粉储藏与活力分析材料的大力花为大学锁石村的十字架大力花品种。
1．1．2于2016年5月2日到5月5日进行大力花花粉萌发离体培养基的配置。
1．1．3于2016年5月3日到5月10日的不同时期白天上午11:00到锁石村菊花基地进行花粉采集，并置于离心管中以冰盒保管带回实验室，备用。
1．1．4以ME3+15%PEG4000为离体萌发培养基以离体萌发进行大力花花粉储藏与活力分析。
1．2花粉离体萌发最适培养基的筛选
利用不同量的硼酸、PEG、六水合氯化钙、硫酸镁、硝酸钾、蔗糖等为原料配置液体培养基。将配置好的培养基置于离心管中，以高压灭菌锅灭菌后备用。培养基不同处理配方如下，ME3培养基为0.005%H3BO3+0.09%CaCl2H2O+0.095%KNO3+
0.04%MgSO47H2O+0.02KCl：
表1花粉离体萌发培养基配方
Table 1 Pollen germination medium formula
培养基编号 培养基配方
1 ME3+2%PEG4000
2
ME3+2%PEG6000
目录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1
引言1
1材料与方法2
1.1实验材料及花粉采集 2
1.2花粉离体萌发最适培养基的筛选 2
1.3干燥储藏对大丽花花粉活力的影响 3
1.4大丽花花粉活力与储藏性的探究 3
1.5数据处理及分析方法3
2结果与分析4
2.1花粉离体萌发最适培养基的筛选结果4
2.1.1各培养基平均萌发率及分析4
2.2干燥储藏对大丽花花粉活力的影响4
2.2.1各不同干燥处理下的萌发率及结果分析4
2.3干燥储藏对大丽花花粉活力的影响5
2.3.1各处理的日平均萌发率5
2.3.2花粉萌发与储藏性的方差分析结果5
3讨论 6
3.1大丽花离体萌发最适培养基的筛选6
3．2 干燥储藏对大丽花花粉活力的影响6
3．3.3大丽花花粉活性与储藏性的探究结果 6
致谢7
参考文献7
附图一9
附图二9
附图三 10
大丽花花粉活力与储藏性的分析
引言
引言：大丽花Dahlia pinnata C
*好棒文|www.hbsrm.com +Q: ^351916072*
av为菊科(Compositae)大丽花属多年生球根花卉，全属约27种[1]。大丽花是世界名花之一，在我国栽培已有400多年的历史。其茎杆粗壮，叶片肥大，花形与牡丹相似，以花期长、花量多、花朵大著称，具有花姿优美、花型多样、品种繁多等特点，被誉为花卉中的宠儿[24]。其环境适应性很强，许多品种适宜在北方栽培，以东北和华北地区栽培较盛［5］。
花粉生活力是指花粉具有存活、生长、萌发或发育的能力[6]。在杂交育种工作中，为解决亲本花期不一致和远距离杂交的问题，更需要保存生活的花粉[7]。不同类群植物花粉在自然条件下的寿命，花粉的储藏条件，以及花粉生活力的测定有所区别，这些差异对于研究花粉/柱头的相互作用，作物改良与育种操作，基因库的保持，不亲和性与受精关系，生理调节对花粉萌发的影响和基因流等，均有非常重要的实践意义[8]。近年来关于观赏植物的花粉活性与其储藏性有人做过一些研究, 但对大丽花的花粉活力与储藏性研究尚未见报道。控制温度和湿度是贮藏好花粉的关键。检测不同保存预处理后一定温度或湿度下不同大丽花品种的耐储藏性及其花粉活性，或某种特定的大丽花品种的花粉最适储藏条件，目前还未有人做相关研究。
大丽花花粉萌发的最适培养基，目前国内外还未见相关报道。唐岱等[9]用ME3+16%PEG4000+12%蔗糖，菊花花粉萌发率可达45%80%。除对PEG和蔗糖、CA2+、B+在此培养基中对菊花花粉萌发有研究外,鉴于盐分是否对菊花花粉萌发有促进作用或不可缺少缺乏相关研究, 代光明等[10]对ME3培养基的盐分对菊花花粉萌发进行试验，结果表明:在培养基加人H3BO4、CACL22H2O、KH2PO4、CUSO45H2O维生素B1+B6、COCL26H2O对菊花花粉萌发有明显促进效果。其中ME3培养基的盐类和维生素附加16％PEG4000和12%的蔗糖的培养基下野菊花的花粉萌发率为83.0%，而含16%PEG4000+12%蔗糖+CaC12.H20880+H3BO450的基本培养基培养对野菊花进行萌发检测，其萌发率为27.0%。
近年来常用的植物花粉活力的测定方法主要有离体萌发法、活体萌发法、无机酸法和染色法４类。相关研究表明TTC染色法检测花粉活力是应用较多的；无机酸法则能较准确快速测定臭椿的花粉活力；MTT染色法是简单快速测定杜鹃花花粉活力的最适染色法［11，1218］．菊科花粉活力的检测以花粉在离体萌发培养基上的萌发率来表示花粉生活力结果准确可靠[19]。赵宏波等[20] 研究表明菊花脑、南京野菊、毛华菊和栽培小菊rm432、rm461、rm482 花粉在离体萌发最适的培养基ME3 +200 gL1PEG4000上，花粉萌发率分别为57.7 %、52.5 %、 44.8 %和30.9 %、22.3 %、20.9 %，且花粉管生长良好，便于观察统计。离体萌发法操作简便、快速且结果直观，只需要一般的显微镜即可进行花粉萌发观察。
本实验以花粉萌发率较高的大丽花十字架品种为检测材料，对不同养分含量的40多种液体离体萌发培养基进行检测选出大丽花花粉萌发的已知内最适培养基。后以萌发率较高的十字架品种的花粉为材料，分别对其做低温﹣80℃下冷冻预处理3h，室内自然通风晾干6h的预处理，以不做任何干燥处理为空白对照，分别置于常温、4℃、﹣20℃下储藏，后每隔24h取一定量的花粉用离体萌发法进行萌发率检测，通过一系列正交实验进对大丽花的花粉活力和储藏性的关系及相关影响进行探究。
1 材料与方法
1．1 实验材料及花粉采集
1．1．1本实验于2016年3—5月于大学锁石村菊花基地和大学园艺学院菊花实验室进行。提供花粉储藏与活力分析材料的大力花为大学锁石村的十字架大力花品种。
1．1．2于2016年5月2日到5月5日进行大力花花粉萌发离体培养基的配置。
1．1．3于2016年5月3日到5月10日的不同时期白天上午11:00到锁石村菊花基地进行花粉采集，并置于离心管中以冰盒保管带回实验室，备用。
1．1．4以ME3+15%PEG4000为离体萌发培养基以离体萌发进行大力花花粉储藏与活力分析。
1．2花粉离体萌发最适培养基的筛选
利用不同量的硼酸、PEG、六水合氯化钙、硫酸镁、硝酸钾、蔗糖等为原料配置液体培养基。将配置好的培养基置于离心管中，以高压灭菌锅灭菌后备用。培养基不同处理配方如下，ME3培养基为0.005%H3BO3+0.09%CaCl2H2O+0.095%KNO3+
0.04%MgSO47H2O+0.02KCl：
表1花粉离体萌发培养基配方
Table 1 Pollen germination medium formula
培养基编号 培养基配方
1 ME3+2%PEG4000
2
ME3+2%PEG6000
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