不同氮素形态对石菖蒲植株生理活性
目录
摘要1
关键词1
绪论1
1 材料与方法1
1.1 试验材料 1
1.2 试验设计 1
1.3 测定项目与方法1
1.3.1 生理生化指标的测定1
1.3.1.1 叶绿素含量的测定1
1.3.1.2 可溶性糖含量的测定1
1.3.1.3 硝酸盐含量的测定1
1.3.1.4 硝酸还原酶活性的测定1
1.3.1.5 可溶性蛋白含量的测定1
1.3.2 有机酸含量的测定2
2 结果与分析2
2.1氮素形态对石菖蒲生理生化活性的影响2
2.1.1 氮素形态对叶绿素含量的影响2
2.1.2 氮素形态对可溶性糖含量的影响2
2.1.3 氮素形态对硝酸盐含量的影响2
2.1.4 氮素形态对硝酸还原酶活性的影响3
2.1.5 氮素形态对可溶性蛋白含量的影响3
2.2 氮素形态对石菖蒲有机酸含量的影响4
3 讨论...........4
3.1 氮素形态对石菖蒲生理指标的影响4
3.2 氮素形态对石菖蒲有机酸含量的影响4
致谢5
参考文献5
Abstract5
Key words5 不同氮素形态对石菖蒲植株生理活性及有机酸含量的影响
学生 丁美姣
[摘要] 为了解不同形态氮素营养对石菖蒲生长及有机酸累积的影响，本试验采用水培方法，对石菖蒲进行不同氮素形态培养，测定叶片中叶绿素、可溶性糖、硝酸盐、硝酸还原酶活性和可溶性蛋白，以及根茎中有机酸的含量。试验结果表明，施用的硝态氮与铵态氮比值为3:1时，石菖蒲各项测量的数值基本高于其他试验组。硝铵比为3:1的营养方案为最是石菖蒲生长及有机酸积累的营养方案。
[关键词] 石菖蒲；不同氮素形态；生理活性；有机酸
石菖蒲为天南星科多年生草本植物石菖蒲（Acorus tatarinowii Schott）的干燥根茎。始载于《神农本草经》，味辛、苦，性温，归心、胃经。 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: &351916072&
具有开窍豁痰、醒神益智、化湿开胃等功效[1]。近年来有关石菖蒲的研究主要集中在石菖蒲系统学地位的确定[2]、生理特征的论证[37]、生理活性的研究[810]、挥发油的提取工艺优选[11]及挥发油成分的测定[12]方面，未见石菖蒲栽培生理方面研究报道。目前，石菖蒲药材主要来源于野生资源，野外调查发现，石菖蒲对环境条件要求比较特殊，多分布于生态条件保护良好，水质清澈的溪流或河流中。因此，关于石菖蒲的营养生理，尤其是氮素营养问题引起人们的关注。为此，本实验采用水培方法，研究不同氮素营养处理对石菖蒲生理指标及有机酸含量影响，以期为栽培技术的制定提供技术依据。
1 材料与方法
1.1 试验材料
材料为选自安徽池州市青阳县乐园溪边的生长旺盛的石菖蒲植株。经大学王康才教授鉴定为天南星科石菖蒲（Acorus tatarinowii Schott）。采集后，放置于大学实验室内进行充氧水培，定期换水，培养一个月。
1.2 试验设计
由CaCl2代替Ca(NO3)2，KCl代替KNO3，去除NH4NO3的去氮素改良Hoagland’s营养液为基础。设置不同形态和水平的氮素营养液方案，CK为不施用氮肥的空白设置，A（全硝态氮，100%NO3）、B（硝铵比3:1）、C（硝铵比1:1）、D（硝铵比1:3）、E（全铵态氮，100%NH4+）。由Ca(NO3)2、KNO3提供NO3，NH4Cl提供NH4+，两者均为分析纯。各处理总氮量浓度相同，为16mmolL1，硝态氮和铵态氮的比例不同，Ca、P、K、Mg、S等元素含量保持基本相同。
1.3 测定项目与方法
1.3.1 生理生化指标的测定
1.3.1.1 叶绿素含量的测定[13]
取新鲜的石菖蒲叶片剪碎，10mL95%乙醇黑暗条件下提取至叶片变白，提取液在波长665nm、649nm和470nm时测吸光度，计算叶绿素a、叶绿素b和类胡萝卜素的浓度（mg/L）。
1.3.1.2 可溶性糖含量的测定[13]
制作蒽酮比色法测定可溶性糖含量的标准曲线。取新鲜的石菖蒲叶片各0.3g，加水5mL，剪碎磨成匀浆，封口于沸水中提取30min，滤液定容至25mL，吸取提取液0.5mL加1.5mL蒸馏水，摇匀测定样品吸光度，根据标准曲线测可溶性糖的含量。
1.3.1.3 硝酸盐含量的测定[13]
制作硝酸盐含量的标准曲线。取0.3g石菖蒲叶片剪碎，加入10mL蒸馏水，封口，沸水中提取30min，趁热过滤，滤液冷却后定容至25mL制成样品液。吸取0.1mL样品液，加入5%水杨酸硫酸溶液0.4mL，混匀后置室温中20min，慢慢加入9.5mL8%氢氧化钠溶液，冷却至室温，以空白为对照，在410nm波长下测吸光度。对照标准曲线计算出样品硝酸盐含量。
1.3.1.4 硝酸还原酶活性的测定[13]
制作标准曲线。称取石菖蒲新鲜叶片各1.0g，剪成边长为0.5cm的小方块，放入带塞试管中，对照试管先加入1mL30%三氯乙酸溶液，然后再向各试管中加入0.1mol/L的KNO3溶液9mL，抽气1h，置于25℃暗反应30min，反应过程中每隔10min振荡一次，然后向其它各试管中加入1mL30%三氯乙酸溶液，吸上清液1mL于新试管中，加入2mL1%磺胺溶液和2mL0.02%萘胺溶液，显色20min后，在540nm波长下比色。
1.3.1.5 可溶性蛋白含量的测定[13]
制作考马斯亮蓝G250法测可溶性蛋白含量的标准曲线。取石菖蒲叶片各0.3g，加入2mL蒸馏水研磨成匀浆，4000r/min离心20min，上清液定容至10mL。分别吸取0.1mL，加入5mL考马斯亮蓝G250蛋白试剂，充分混合，放置2min后以空白为对照，在595nm波长下比色测定光密度OD595，并通过标准曲线查得待测样品提取液可溶性蛋白含量。
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