外源水杨酸对盐胁迫下毛豆种子萌发和幼苗生理特性的影响
目 录
1 引言1
1.1 盐胁迫及其危害1
1.2 水杨酸及其耐盐性1
1.3 本试验的研究目的及意义2
2 材料与法2
2.1 供试材料2
2.2 仪器设备及药品2
2.3 试验方法2
2.4 指标测定3
2.5 数据处理4
3 结果与分析5
3.1 外源SA对盐胁迫下毛豆种子萌发的影响5
3.2 外源SA对盐胁迫下毛豆幼苗的影响7
3.3 外源SA对盐胁迫下毛豆幼苗生物量的影响10
3.4 外源SA对盐胁迫下毛豆幼苗子叶叶绿素含量的影响12
3.5 外源SA对盐胁迫下毛豆幼苗根系电导率的影响15
3.6 外源SA对盐胁迫下毛豆幼苗MDA含量的影响16
4讨论17
4.1 外源SA对盐胁迫下种子萌发的影响17
4.2 外源SA对盐胁迫下幼苗生长的影响17
4.3 外源SA对盐胁迫下毛豆幼苗子叶叶绿素含量的影响18
4.4 外源SA对盐胁迫下电导率和MDA含量的影响 18
结论20
致谢21
参考文献221 引言
1.1 盐胁迫及其危害
随着地球环境不断遭到破坏，土壤盐渍化逐渐加重，土壤盐渍化是土壤底层或者地下水的盐分随毛管水上升到地表，水分蒸发后，使盐分积累在表层土壤中的过程，是指易溶性盐分在土壤表层积累的现象或过程，也称盐碱化。土壤中含盐量的增加，对植物造成渗透胁迫、离子伤害和氧化胁迫，对植物造成盐胁迫，影响植物的正常生长 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: 3_5_1_9_1_6_0_7_2
[1]。
盐胁迫对种子萌发的影响：一是通过渗透势影响水分吸收，二是为有毒离子的进入提供条件[2]。谢德意等对盐胁迫下棉籽萌发情况，研究发现造成发芽率低主要是因为渗透胁迫却不是离子毒害；而闫留华等对盐胁迫下盐地碱蓬种子萌发情况，研究发现高浓度下主要受渗透效应抑制[3-4]。邵帅对盐胁迫下野生大豆种子萌发情况研究发现盐胁迫能够抑制种子的萌发[5]。徐小英研究发现，盐胁迫对白桦种子萌发的伤害，不仅降低种子发芽率，还造成种子萌发延迟[6]。
此外，王宝山研究发现盐胁迫抑制幼苗生长，植株矮小，降低幼苗的干鲜重及含水量[7]。刘国花的研究发现，盐胁迫降低幼苗子叶叶绿素的含量，影响色素蛋白复合体的功能，进而减少叶绿体对光能的吸收[8]。孟昭来对盐胁迫下宽叶毛豆幼苗研究发现，盐胁迫对细胞的质膜造成伤害，使膜的透性增大，导致电导率和丙二醛含量增大[9]。
1.2 水杨酸及其耐盐性
水杨酸(salicylic acid，SA)是植物体内普遍存在的一种简单的小分子酚类化合物，化学名称为“邻羟基苯甲酸”，是肉桂酸的衍生物。近些年来，陆续发现SA能够提高植物非生物抗逆性，如提高植物的耐盐性、耐旱性、耐寒性和耐热性[10-12]。
张士功等对盐胁迫下小麦种子研究发现外施SA能提高种子的发芽率、发芽势和发芽指数[10]。孟雪娇等研究发现盐胁迫下外施SA能促进幼苗在盐胁迫下生长SA 处理可缓和NaCl胁迫处理所带来的水分减少，增加植物的相对含水量[13]。Tari I等对盐胁迫番茄幼苗研究发现，外施SA 能提高幼苗叶绿素a和类胡萝卜素含量，提高植物的光合速率[14]。齐秀东研究发现，盐胁迫下外施SA能降低膜脂过氧化，维持细胞质膜的稳定性和完整性，减少膜脂过氧化作用产物丙二醛（MDA）的累积，缓解盐胁迫的伤害，提高其对盐胁迫的适应性[15]。
1.3 本试验的研究目的及意义
毛豆，又称作菜用大豆，豆科蝶形花亚科大豆属，是大豆作物中专门鲜食嫩荚的蔬菜用大豆。毛豆就是新鲜连荚的黄豆，一年生的农作物，茎粗硬而有细毛，它的荚作扁平形，荚上也有细毛，所以人称为毛豆，新鲜时，豆荚嫩绿色，青翠可爱。目前，关于外源SA缓解盐胁迫下毛豆种子萌发和幼苗生长方面的研究较少，到目前为止主要是针对蔬菜和花卉种子，如黄瓜[16]、花椰菜[17]、百日草[18]等，豆类只有张凤银等研究外源水杨酸对盐胁迫下菜豆种子萌发和幼苗生理特性的影响[19]。本试验的目的是通过模拟毛豆种子在盐胁迫下外加水杨酸时的萌发情况，以及对幼苗生理特性的影响的研究，从种子萌发及幼苗的生长变化特征，初步探究水杨酸对盐胁迫下毛豆种子萌发及幼苗生长的影响，并以此了解水杨酸对植物耐盐性的影响。
2 材料与方法
2.1 供试材料
供试毛豆为从淮安市农资站购买的“双福7号”毛豆种子，从中挑选豆粒饱满、圆润无褶皱的种子，用于萌发。
2.2 仪器设备及药品
2.2.1 仪器设备
恒温培养箱；分光光度计；真空抽气泵；烘箱；电导仪；水浴锅；离心机；振荡器；万分之天平；直尺；烧杯；镊子；量筒；1000 ml容量瓶；25ml棕色容量瓶；培养皿；移液管；滤纸；研钵；玻璃棒；具塞试管。
2.2.2 药品
水杨酸；氯化钠；无水乙醇；硫代巴比妥酸；三氯乙 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: 3_5_1_9_1_6_0_7_2
酸。
2.3 试验方法
2.3.1 试验设计
试验共设7个处理：
（1）处理1：0 mmolL-1NaCl+0 mmolL-1 SA（蒸馏水，记为CK1）；
（2）处理2：150 mmolL-1NaCl+0 mmolL-1 SA（记为CK2）；
（3）处理3：150 mmolL-1NaCl+0.5 mmolL-1 SA(记为T1)；
（4）处理4：150 mmolL-1NaCl+1.0 mmolL-1 SA(记为T2)；
（5）处理5：150 mmolL-1NaCl+1.5 mmolL-1 SA(记为T3)；
（6）处理6：150 mmolL-1NaCl+2.0 mmolL-1 SA(记为T4)；
（7）处理7：150 mmolL-1NaCl+2.5 mmolL-1 SA(记为T5)。
2.3.2 毛豆种子处理
选用饱满的毛豆种子，用蒸馏水漂洗3次，用60℃蒸馏水浸种4h；将浸种后的种子放入铺有滤纸的培养皿中，每皿30粒，每天定量加入10 ml上述处理液，每天保持滤纸湿润。处理后的种子放入恒温培养箱，控制温度为25℃湿度为75%进行培养。每天更换滤纸，并重新加入处理液。试验重复3次。从培养次日记录种子萌发数，发芽实验待种子生长7d进行，待生长15d时测定生长指标及生理指标。
2.4 指标测定
2.4.1 发芽指标测定
种子萌发第4d时测定各处理发芽势，种子萌发第7d时测定各处理发芽率以及发芽指数。
每个处理测定重复3次，数据为3次重复测定的平均值。用Excel2007处理数据和作图，用SATA版本1.0软件进行方差分析。
3 结果与分析
3.1 外源SA对盐胁迫下毛豆种子萌发的影响
3.1.1 对发芽势的影响
图5 外源SA对盐胁迫下毛豆幼苗主根长的影响
结果表明，盐胁迫下显著抑制主根的生长，添加一定浓度（0.5-1.5 mmolL-1）外源SA能显著促进幼苗主根的生长，其中1.0mmolL-1SA时主根最长为3.2 cm，表明此浓度外源SA对盐胁迫的缓解效果显著性最大,但显著低于正常生长幼苗的主根长；当SA浓度超过1.5 mmolL-1时主根的生长受到显著抑制并加重盐胁迫的伤害。
1 引言1
1.1 盐胁迫及其危害1
1.2 水杨酸及其耐盐性1
1.3 本试验的研究目的及意义2
2 材料与法2
2.1 供试材料2
2.2 仪器设备及药品2
2.3 试验方法2
2.4 指标测定3
2.5 数据处理4
3 结果与分析5
3.1 外源SA对盐胁迫下毛豆种子萌发的影响5
3.2 外源SA对盐胁迫下毛豆幼苗的影响7
3.3 外源SA对盐胁迫下毛豆幼苗生物量的影响10
3.4 外源SA对盐胁迫下毛豆幼苗子叶叶绿素含量的影响12
3.5 外源SA对盐胁迫下毛豆幼苗根系电导率的影响15
3.6 外源SA对盐胁迫下毛豆幼苗MDA含量的影响16
4讨论17
4.1 外源SA对盐胁迫下种子萌发的影响17
4.2 外源SA对盐胁迫下幼苗生长的影响17
4.3 外源SA对盐胁迫下毛豆幼苗子叶叶绿素含量的影响18
4.4 外源SA对盐胁迫下电导率和MDA含量的影响 18
结论20
致谢21
参考文献221 引言
1.1 盐胁迫及其危害
随着地球环境不断遭到破坏，土壤盐渍化逐渐加重，土壤盐渍化是土壤底层或者地下水的盐分随毛管水上升到地表，水分蒸发后，使盐分积累在表层土壤中的过程，是指易溶性盐分在土壤表层积累的现象或过程，也称盐碱化。土壤中含盐量的增加，对植物造成渗透胁迫、离子伤害和氧化胁迫，对植物造成盐胁迫，影响植物的正常生长 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: 3_5_1_9_1_6_0_7_2
[1]。
盐胁迫对种子萌发的影响：一是通过渗透势影响水分吸收，二是为有毒离子的进入提供条件[2]。谢德意等对盐胁迫下棉籽萌发情况，研究发现造成发芽率低主要是因为渗透胁迫却不是离子毒害；而闫留华等对盐胁迫下盐地碱蓬种子萌发情况，研究发现高浓度下主要受渗透效应抑制[3-4]。邵帅对盐胁迫下野生大豆种子萌发情况研究发现盐胁迫能够抑制种子的萌发[5]。徐小英研究发现，盐胁迫对白桦种子萌发的伤害，不仅降低种子发芽率，还造成种子萌发延迟[6]。
此外，王宝山研究发现盐胁迫抑制幼苗生长，植株矮小，降低幼苗的干鲜重及含水量[7]。刘国花的研究发现，盐胁迫降低幼苗子叶叶绿素的含量，影响色素蛋白复合体的功能，进而减少叶绿体对光能的吸收[8]。孟昭来对盐胁迫下宽叶毛豆幼苗研究发现，盐胁迫对细胞的质膜造成伤害，使膜的透性增大，导致电导率和丙二醛含量增大[9]。
1.2 水杨酸及其耐盐性
水杨酸(salicylic acid，SA)是植物体内普遍存在的一种简单的小分子酚类化合物，化学名称为“邻羟基苯甲酸”，是肉桂酸的衍生物。近些年来，陆续发现SA能够提高植物非生物抗逆性，如提高植物的耐盐性、耐旱性、耐寒性和耐热性[10-12]。
张士功等对盐胁迫下小麦种子研究发现外施SA能提高种子的发芽率、发芽势和发芽指数[10]。孟雪娇等研究发现盐胁迫下外施SA能促进幼苗在盐胁迫下生长SA 处理可缓和NaCl胁迫处理所带来的水分减少，增加植物的相对含水量[13]。Tari I等对盐胁迫番茄幼苗研究发现，外施SA 能提高幼苗叶绿素a和类胡萝卜素含量，提高植物的光合速率[14]。齐秀东研究发现，盐胁迫下外施SA能降低膜脂过氧化，维持细胞质膜的稳定性和完整性，减少膜脂过氧化作用产物丙二醛（MDA）的累积，缓解盐胁迫的伤害，提高其对盐胁迫的适应性[15]。
1.3 本试验的研究目的及意义
毛豆，又称作菜用大豆，豆科蝶形花亚科大豆属，是大豆作物中专门鲜食嫩荚的蔬菜用大豆。毛豆就是新鲜连荚的黄豆，一年生的农作物，茎粗硬而有细毛，它的荚作扁平形，荚上也有细毛，所以人称为毛豆，新鲜时，豆荚嫩绿色，青翠可爱。目前，关于外源SA缓解盐胁迫下毛豆种子萌发和幼苗生长方面的研究较少，到目前为止主要是针对蔬菜和花卉种子，如黄瓜[16]、花椰菜[17]、百日草[18]等，豆类只有张凤银等研究外源水杨酸对盐胁迫下菜豆种子萌发和幼苗生理特性的影响[19]。本试验的目的是通过模拟毛豆种子在盐胁迫下外加水杨酸时的萌发情况，以及对幼苗生理特性的影响的研究，从种子萌发及幼苗的生长变化特征，初步探究水杨酸对盐胁迫下毛豆种子萌发及幼苗生长的影响，并以此了解水杨酸对植物耐盐性的影响。
2 材料与方法
2.1 供试材料
供试毛豆为从淮安市农资站购买的“双福7号”毛豆种子，从中挑选豆粒饱满、圆润无褶皱的种子，用于萌发。
2.2 仪器设备及药品
2.2.1 仪器设备
恒温培养箱；分光光度计；真空抽气泵；烘箱；电导仪；水浴锅；离心机；振荡器；万分之天平；直尺；烧杯；镊子；量筒；1000 ml容量瓶；25ml棕色容量瓶；培养皿；移液管；滤纸；研钵；玻璃棒；具塞试管。
2.2.2 药品
水杨酸；氯化钠；无水乙醇；硫代巴比妥酸；三氯乙 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: 3_5_1_9_1_6_0_7_2
酸。
2.3 试验方法
2.3.1 试验设计
试验共设7个处理：
（1）处理1：0 mmolL-1NaCl+0 mmolL-1 SA（蒸馏水，记为CK1）；
（2）处理2：150 mmolL-1NaCl+0 mmolL-1 SA（记为CK2）；
（3）处理3：150 mmolL-1NaCl+0.5 mmolL-1 SA(记为T1)；
（4）处理4：150 mmolL-1NaCl+1.0 mmolL-1 SA(记为T2)；
（5）处理5：150 mmolL-1NaCl+1.5 mmolL-1 SA(记为T3)；
（6）处理6：150 mmolL-1NaCl+2.0 mmolL-1 SA(记为T4)；
（7）处理7：150 mmolL-1NaCl+2.5 mmolL-1 SA(记为T5)。
2.3.2 毛豆种子处理
选用饱满的毛豆种子，用蒸馏水漂洗3次，用60℃蒸馏水浸种4h；将浸种后的种子放入铺有滤纸的培养皿中，每皿30粒，每天定量加入10 ml上述处理液，每天保持滤纸湿润。处理后的种子放入恒温培养箱，控制温度为25℃湿度为75%进行培养。每天更换滤纸，并重新加入处理液。试验重复3次。从培养次日记录种子萌发数，发芽实验待种子生长7d进行，待生长15d时测定生长指标及生理指标。
2.4 指标测定
2.4.1 发芽指标测定
种子萌发第4d时测定各处理发芽势，种子萌发第7d时测定各处理发芽率以及发芽指数。
每个处理测定重复3次，数据为3次重复测定的平均值。用Excel2007处理数据和作图，用SATA版本1.0软件进行方差分析。
3 结果与分析
3.1 外源SA对盐胁迫下毛豆种子萌发的影响
3.1.1 对发芽势的影响
图5 外源SA对盐胁迫下毛豆幼苗主根长的影响
结果表明，盐胁迫下显著抑制主根的生长，添加一定浓度（0.5-1.5 mmolL-1）外源SA能显著促进幼苗主根的生长，其中1.0mmolL-1SA时主根最长为3.2 cm，表明此浓度外源SA对盐胁迫的缓解效果显著性最大,但显著低于正常生长幼苗的主根长；当SA浓度超过1.5 mmolL-1时主根的生长受到显著抑制并加重盐胁迫的伤害。
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