建兰离体培养及快速繁殖研究

摘要:以建兰根状茎及由根状茎茎端分化的无根苗为材料, 研究了植物生长调节剂、光照条件对根状茎分化及生长素、有机添加物对无根苗生根的影响。结果表明:建兰根状茎分化的最适培养基为1/ 2 MS+0.2 mg(L-1 NAA+4.0 mg(L-1 6-BA+0.3 mg(L-1 KT+30.0 g(L-1蔗糖+AC1.0g(L-1 + 5.0 g(L-1琼脂。光照有利于建兰根状茎茎端分化。在建兰无根苗生根试验中NAA浓度对生根起主要作用,有机添加物对生根的作用不明显,建兰最佳的生根培养基为1/ 2 MS+1.0 mg(L-1 NAA+30.0 g(L-1蔗糖+1.0 g(L-1AC+5.0 g(L-1琼脂,pH 5.5。
目录
摘要 1
Abstract: 1
1 材料和方法 2
1.1实验材料 2
1.2试验方法 2
1.2.1 建兰根状茎分化条件研究 2
1.2.1.1不同浓度NAA与6BA配比对建兰根状茎茎端分化的影响 2
1.2.1.2不同细胞分裂素对建兰根状茎茎端分化的影响 2
1.2.1.3不同光照条件对建兰根状茎茎端分化的影响 2
1.2.2 建兰无根苗生根条件研究 2
1.2.2.1不同浓度NAA对建兰试管苗生根的影响 2
1.2.2.2不同有机添加物对建兰试管苗生根的影响 2
1.3指标统计及数据处理 3
2结果分析 3
2.1 建兰根状茎分化条件 3
2.1.1不同浓度6BA与NAA配比对建兰根状茎茎端分化的影响 3
2.1.2不同细胞分裂素组合对建兰根状茎茎端分化的影响 4
2.2建兰无根苗生根条件 5
2.2.1不同浓度NAA对建兰试管苗生根的影响 5
2.2.2不同有机添加物对建兰试管苗生根的影响 5
3讨论 6
4结论 7
致谢 8
建兰离体培养及快速繁殖研究
引言
建兰(Cymbidium ensifolium (L. ) Sw.)为兰科兰属多年生草本植物温带地生兰,原产中国
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。植物学界以其主产地福建而命名。属于国兰的一大种群。其花浅黄绿色,芳香。与其它种类国兰不同的是,其花期较长且可多次开花,故又名四季兰。在其生长过程中,建兰种子萌发首先形成根状茎,再通过分化、生根实现植株完整形态建成。其中,建兰根状茎的分化影响着后期植株生长的状态,因此本试验将围绕植物生长调节剂、光照等条件对建兰根状茎分化的影响进行试验,以建成稳定、高效的建兰根状茎分化体系。
当根状茎分化成苗时,会伴随组培苗生根,这有利于后期的移栽工作。因此能否产生良好的根系,对建兰组培苗移栽成活率的高低有较大的影响。为了进一步提高建兰无根苗的生根率,本试验将从生长素和有机添加物入手,以探讨对建兰无根苗生根具有显著影响的因素。
1 材料和方法
1.1实验材料
选取本实验以素心建兰种子无菌播种萌发形成的长势一致根状茎作为分化试验材料;选择生长健壮、长势一致的无根苗作为生根试验材料。
1.2试验方法
1.2.1 建兰根状茎分化条件研究
1.2.1.1不同浓度NAA与6BA配比对建兰根状茎茎端分化的影响
将供试材料转接至不同浓度NAA与6BA配比的分化培养基中。分化培养基以1/2 MS为基本培养基,添加NAA(0、0.2、0.3)mg(L1和6BA(2.0、3.0、4.0)mg(L1,共9个处理,筛选出最佳浓度组合。培养基中其他成分为:椰汁100.0 ml(L1,蔗糖30.0 g(L1,琼脂5.0 g(L1,AC 1.0 g(L1,pH 5.5。
1.2.1.2不同细胞分裂素对建兰根状茎茎端分化的影响
将供试材料转接至含有不同种类与浓度细胞分裂素的分化培养基中。以添加4.0 mg(L1 6BA和0.2 mg(L1 NAA的1/2 MS为基本培养基,添加不同浓度的KT(0.1、0.3、0.5 mg(L1),2iP(0.1、0.3、0.5 mg(L1),以不添加KT和2iP为对照(CK),共7个处理,筛选出最佳浓度处理的细胞分裂素。培养基中其他成分为:椰汁100.0 ml(L1,蔗糖30.0 g(L1,琼脂5.0 g(L1,AC 1.0 g(L1,pH 5.5。
1.2.1.3不同光照条件对建兰根状茎茎端分化的影响
将供试材料转接至分化培养基中。 培养成分为:1/ 2 MS +0.2 mg(L1 NAA+4.0 mg(L1 6BA+椰汁100 ml(L1+活性炭1 g(L1+蔗糖30 g(L1+琼脂5 g(L1,pH 5.45.5。设置两种光照情况:(1)黑暗培养;(2)光照:光周期12h/12h,光照强度2000 lx。
1.2.2 建兰无根苗生根条件研究
1.2.2.1不同浓度NAA对建兰试管苗生根的影响
将供试材料转接至含有不同浓度生长素的生根培养中。以1/2 MS为基本培养基,添加NAA(0.05、0.1、0.2、0.3、0.5、1.0、2.0、3.0)mg(L1 8个处理,培养基其他成分为:蔗糖30.0 g(L1,琼脂5.0 g(L1,AC 1.0 g(L1,pH 5.5。
1.2.2.2不同有机添加物对建兰试管苗生根的影响
将供试材料转接至含有不同种类与浓度有机添加物的生根培养基中。以含有NAA 0.1 mg(L1的1/2 MS为基本培养基,添加椰汁(10.0、20.0、30.0)ml(L1,香蕉泥(10.0、20.0、30.0)g(L1,酵母提取物(0.1、0.2、0.3)g(L1,蛋白胨(0.1、0.2、0.3)g(L1 ,共12个处理。培养基中其他成分:蔗糖30.0 g(L1,琼脂5.0 g(L1,AC 1.0 g(L1,pH 5.5。
1.3指标统计及数据处理
试验时间设置为30 d,30 d后统计芽数、根数、根长等。
分化率(%)=(分化出芽的根状茎数/ 接种的根状茎总数)×100%
平均芽数 = 总芽数/ 接种的根状茎总数
生根率(%)=(生根数/ 接种的根状茎数)×100%
平均根长(mm)=根长总和/ 根数
数据处理采用EXCEL、SPASS 19.0软件,Duncan进行多重比较(P﹤0.05)。
2结果分析
2.1 建兰根状茎分化条件
2.1.1不同浓度6BA与NAA配比对建兰根状茎茎端分化的影响

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