黄精无菌快繁技术的研究
目录
摘要1
关键词1
引言1
1 材料与方法1
1.1 材料 1
1.2 方法 1
1.2.1 外植体的处理1
1.2.2 愈伤组织诱导1
1.2.3 愈伤组织增殖分化2
1.2.4 生根培养2
2 结果与分析2
2.1 不同植物激素对愈伤组织诱导的影响2
2.1.1 不同植物激素浓度对苞片愈伤组织诱导的影响2
2.1.2不同植物激素浓度对苞片愈伤组织诱导的影响3
2.1.3 不同外植体的选择对诱导效果的影响3
2.2 激素对愈伤组织分化的影响4
2.3 不同培养基对生根的影响4
3 讨论5
致谢5
参考文献6
Abstract6
引言
黄精无菌快繁技术的研究
学生 刘丹
[摘要]: [目的]利用植物组织培养技术,建立黄精的无菌培养体系,达到快速繁殖的目的。[方法]以多花黄精的嫩芽剥离出的苞片和嫩茎作为外植体进行组织培养,利用各种激素的组合,选择出适宜诱导愈伤及其分化、生根的最适培养基。[结果]诱导愈伤组织的最佳培养基为MS+6BA2.0 mgL1+NAA1.0 mgL1;诱导丛生芽的最佳培养基为MS+6BA2.0 mgL1+IAA0.5 mgL1;最佳生根培养基为MS+ IAA0.5 mgL1。[结论]茎段比苞片更适宜作为外植体进行组织培养,NAA既可以促进愈伤组织的形成,又可以在很大程度上促进愈伤组织的分化,IAA比NAA更有利于愈伤组织的再分化。该繁殖体系可在短时间内得到大量的黄精种苗。
[关键词]:黄精;组织培养;愈伤组织;快速繁殖
黄精 ( Polygonaturm sibiricum Redoute)是我国常用的中药材,为百合科黄精属多年生草本植物根茎的总称,具有补脾润肺、益气养阴、强壮筋骨等功效。《中国药典》2010 版一部收藏了滇黄精(Polygonatum kingianum Coll.et Hemsl.)、黄精(Polygonatum sibiricum R *好棒文|www.hbsrm.com +Q: #351916072#
ed.) 或多花黄精(Polygonatum cyrtonema Hua )等3种原生药,按形状不同,习称“大黄精”、“鸡头黄精”、“姜形黄精”。黄精属植物分布于全国各地[1],但适应性较差、生境选择性强,主产于河北、内蒙古、陕西等省区[2]。
黄精的活性成分主要为黄精多糖及皂甙等[1] ,化学成分主要有:黄精多糖、甾体皂苷、蒽醌类化合物、生物碱、木脂素、维生素和多种对人体有用的氨基酸等化合物[35],具有补脾润肺、益气养阴、强壮筋骨等功效。以黄精为主的复方制剂在临床上可用于多种疾病的治疗,如升高白细胞的作用,治疗糖尿病、原发性低血压、冠心病、近视眼、中毒性耳聋、结核及脑功能减退等病症。2000年之后,又有学者对其他方面进行了研究,发现还具有治疗骨结核病[6]、缺血性脑血管病[7]、病毒性角膜炎[8]等。随着市场需求量不断增加和野生资源不断减少,黄精人工栽培已成为市场供求的主体。
黄精的人工栽培中,主要的繁殖方式是根茎的无性繁殖,该方法繁殖系数低,种根茎用量大,不便于人工大面积种植,如何快速得到黄精种苗,是黄精栽培的关键。植物组织培养技术可以迅速提高黄精的繁殖率,同时也可以提高黄精种质的品质,从而促进黄精种苗的工厂化生产。
1 材料与方法
1.1 材料
1.2 方法
1.2.1 外植体的处理 将所获得的材料装入瓶中,用肥皂水浸泡10min后置于流动水下冲洗1h,待晾干后在超净工作台上用75%的酒精浸泡20s,取出用无菌水冲洗3~4次后,置于0.1%升汞溶液中浸泡15min,取出用无菌水冲洗6~8次,置于灭过菌的滤纸上吸干水分。将芽剥开,取嫩茎及苞片备用,嫩茎切成5mm长段,苞片切成1cm2大小。
1.2.2 愈伤组织诱导 将处理好的苞片及嫩茎分别接种于有不同激素配比的培养基中(见表1)。每瓶接种5~7个外植体,重复7次。培养基pH值为5.8,含蔗糖3%、琼脂0.65%,培养温度25℃,光照1500Lx,时间10h,定时观察不同外植体在不同处理的培养基上的生长变化并做好记录。
表1 培养基类型
Table1 Different culture media for Polygonaturm sibiricum
培养基编号
不同激素配比(单位mgL1)
6BA
2,4D
NAA
1
2
3
4
5
6
7
8
2.0
2.0
1.0
1.0
2.0
2.0
4.0
4.0
1.0
0.5
1.0
0.5
0
0
0
0
0
0
0
0
0.5
1.0
0.5
1.0
1.2.3 愈伤组织的增殖及分化 将产生的愈伤组织切分并接种到不同激素配比的培养基中进行芽的分化及增殖(见表2)。培养条件不变,每瓶接种4~5块愈伤组织,重复7次。观察芽的分化情况,记录不同激素配比对芽分化的影响。
表2 愈伤组织再分化培养基
Table2 Different culture media for redifferentiation callus
培养基编号
激素组合(单位mgL1)
6BA
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