黄瓜生长素应答因子csarf10基因对黄瓜果实发育的影响
ARF10是ARF 家族成员之一,具有重要地位,现将拟南芥中AtARF10的CDS序列在黄瓜基因组数据库中进行比对,选择出一条同源性最高的序列并对其作序列分析设计引物,然后利用PCR技术从黄瓜中果实克隆得到CsARF10基因序列。将黄瓜CsARF10基因与多种物种的ARF10基因作进化树分析,发现黄瓜与番茄的基因进化距离较近。对该基因作表达分析发现,黄瓜的茎和雌花中表达量较高,在叶和雄花中表达量较低。通过构建重组质粒,并在野生番茄(Micro-Tom)中过表达黄瓜CsARF10基因进行功能验证,表型观察结果发现转基因植株果实成熟受到了抑制,并且果实发育的过程中出现了单性结实现象。
目录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1
引言1
1 材料与方法1
1.1 实验材料2
1.2 CsARF10基因克隆 2
1.2.1 CsARF10基因序列的获取2
1.2.2 构建亚克隆以及测序验证 3
1.2.3 CsARF10基因结构及进化分析4
1.3 CsARF10基因在黄瓜组织中的表达分析4
1.4 CsARF10表达载体的构建以及在番茄中过表达株系的获得4
1.4.1 目的基因的扩增4
1.4.2 构建CsARF10重组质粒5
1.4.3 番茄植株的遗传转化5
1.4.4 转基因番茄植株的的鉴定6
2 结果与分析6
2.1 CsARF10基因的克隆6
2.2 CsARF10基因序列分析以及进化树分析7
2.2.1 CsARF10基因序列分析7
2.2.2 CsARF10基因进化树分析8 2.3 CsARF10基因在黄瓜不同部位的表达 8
2.4 过表达CsARF10番茄植株表型观察 9
3 讨论 11
致谢13
参考文献14
表1.1 CDS序列PCR克隆引物序列2
表1.2 PCR反应体系2
表 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: ^351916072*
1.3 PCR反应参数 3
表1.4 定量RTPCR引物序列 4
表1.5 目的基因fuse引物序列 4
图1.1 ARF10重组质粒的构建流程图 5
表1.6 PCR反应参数 6
图2.1 CsARF10基因mRNA编码区预测 7
图2.2 CsARF10基因序列结构 7
图2.3 各物种ARF10基因进化分析 8
图2.4 CsARF10基因在植株不同部位的表达量 8
图2.5 CsARF10基因在植株不同部位的表达量 9
图2.6 CsARF10基因对植株果实的影响 10
图2.7 CsARF10转基因植株的单性结实 10
黄瓜生长素应答因子CsARF10基因对黄瓜果实发育的影响
目录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1
引言1
1 材料与方法1
1.1 实验材料2
1.2 CsARF10基因克隆 2
1.2.1 CsARF10基因序列的获取2
1.2.2 构建亚克隆以及测序验证 3
1.2.3 CsARF10基因结构及进化分析4
1.3 CsARF10基因在黄瓜组织中的表达分析4
1.4 CsARF10表达载体的构建以及在番茄中过表达株系的获得4
1.4.1 目的基因的扩增4
1.4.2 构建CsARF10重组质粒5
1.4.3 番茄植株的遗传转化5
1.4.4 转基因番茄植株的的鉴定6
2 结果与分析6
2.1 CsARF10基因的克隆6
2.2 CsARF10基因序列分析以及进化树分析7
2.2.1 CsARF10基因序列分析7
2.2.2 CsARF10基因进化树分析8 2.3 CsARF10基因在黄瓜不同部位的表达 8
2.4 过表达CsARF10番茄植株表型观察 9
3 讨论 11
致谢13
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表1.1 CDS序列PCR克隆引物序列2
表1.2 PCR反应体系2
表 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: ^351916072*
1.3 PCR反应参数 3
表1.4 定量RTPCR引物序列 4
表1.5 目的基因fuse引物序列 4
图1.1 ARF10重组质粒的构建流程图 5
表1.6 PCR反应参数 6
图2.1 CsARF10基因mRNA编码区预测 7
图2.2 CsARF10基因序列结构 7
图2.3 各物种ARF10基因进化分析 8
图2.4 CsARF10基因在植株不同部位的表达量 8
图2.5 CsARF10基因在植株不同部位的表达量 9
图2.6 CsARF10基因对植株果实的影响 10
图2.7 CsARF10转基因植株的单性结实 10
黄瓜生长素应答因子CsARF10基因对黄瓜果实发育的影响
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