浪荡子’杨梅初代培养技术研究
以茎段为材料，对‘浪荡子’杨梅的初代培养技术进行了研究。结果表明最佳采样时间为3~5月；茎段先用75%乙醇处理50~60 s后，再用0.1%升汞处理7 min效果最好；在WPM+0.15 mg/L 6-BA+0.03 mg/L NAA +1.0 g/L PVP培养基上芽萌动效果最好；WPM+0.15 mg/L 6-BA+0.03 mg/L NAA +1.0 g/L PVP培养基为最合适的新芽茎伸长培养基。
目录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1
引言1
1材料与方法2
1.1材料 2
1.2方法 2
1.2.1初始诱导培养2
1.2.2茎伸长培养2
1.3数据处理 2
2结果与分析2
2.1外植体的最佳采样时间2
2.2不同消毒处理组合对外植体的影响3
2.2.1不同消毒处理时间对夏季茎段的影响3
2.2.2夏季茎段最适合的消毒组合对秋季茎段的影响3
2.2.3夏季茎段最适合的消毒组合对冬季茎段的影响4
2.2.4不同消毒处理组合对春季茎段萌动的影响4
2.3不同培养基对外植体各阶段生长的影响4
2.3.1初始诱导培养4
2.3.2茎伸长培养5
3讨论5
致谢6
参考文献6
图1 杨梅芽萌动，开始展叶7
图2 杨梅叶片展开7
图3 接种90 d后的茎伸长苗7
表1 不同时期外植体的接种效果3
表2 不同消毒处理组合对夏季茎段的影响3
表3 不同消毒处理组合对春季茎段萌动的影响4
表4 不同培养基对春季茎段诱导的影响4
表5 不同培养基对春季茎段上新芽茎伸长的影响5
‘浪荡子’杨梅初代培养技术研究
引言
引言
杨梅(Myrica rubra Sieb.& Zucc.)，杨梅科常绿果树，原产中国东南各省和云贵高原，栽培历史悠久，是中国著名 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: ^351916072#
的特色果树[1]。国外虽然有不少杨梅种，但很少栽培，绝大部分杨梅果都产于中国。近些年来，我国杨梅栽培更加迅速地发展，现在长江流域以南均有栽培，主产浙江、江苏、福建、江西、湖南及广东省，其中栽培面积、产量及品质等均以浙江为最[2]。
杨梅果实风味独特，甜酸适口，而且具有很高的营养保健价值。除了含有丰富的碳水化合物、蛋白质、氨基酸、有机酸、矿物质、维生素外，还含有丰富的花色素和类黄酮成分，具有较强的抗氧化和抗衰老的作用[3]。杨梅还具有医疗保健和药用作用，北魏的《齐民要术》即有记载[4]。近代生物学和医学进一步证明，杨梅具有消食、消暑、御寒、止泻、利尿、治痢疾及生津止渴、清肠胃、除烦愤恶气等多种药用价值，在医学上常用作收敛剂、强心剂、驱风剂、健胃剂、胸肺药、皮肤药和创伤药等[5]。杨梅还可以加工成多种蜜饯和饮料，十分畅销。杨梅生长在远离大城市的山区，极少或没有被大气污染，栽培管理粗放，病虫危害较少，具有“绿色无公害水果”之美誉。
杨梅种质资源丰富，营养价值高，很受消费者欢迎，近年来杨梅种植面积迅速扩大，单靠种子繁殖实生苗已不能满足扩大种植的要求，加上杨梅嫁接育苗系数低，很有必要发展快捷的育苗方法和科学的苗木鉴定技术。
组培快繁是近年来在园艺苗木繁殖中应用广泛的生物技术，也取得了良好的经济效益，但在杨梅上还少见报道。组培快繁是在无菌和人工控制的环境条件下，利用适当的培养基，对离体的植物器官、组织、细胞及原生质体进行培养，使其再生细胞或完整植株的技术[6]。组培快繁一般要经过外植体建立、增殖培养、生根培养三个阶段。采用组培快繁法对具有优良品种特性的植株进行快速繁殖，在短期内生产出大量整齐均匀的健壮种苗，建立一个高效率的植株再生体系，将有利于优良品种的推广[7]。组培苗具有质量好、体积小，便于携带、运输和交流等特点，近年来已由实验室中试验阶段，逐步向商品化生产过渡，这使得组培快繁所建立的商业化生产体系开发前景非常广阔[8]。
‘浪荡子’杨梅是苏州市金庭镇杨梅众多品种中最优秀的一种，和普通杨梅相比明显要大一圈，颜色紫黑、口感较硬、水分多、甜度大，且不易腐烂，储存时间比普通杨梅长。成熟后颜色乌黑发亮，口感更甚乌梅，曾被泰国皇室以八元一颗的价格采购，乃是杨梅中的极品。
但是，‘浪荡子’杨梅繁殖速度慢，短时间内难以获得大量良种苗木，不利于推广及利用。本课题就是针对‘浪荡子’杨梅这点不足，采用组织培养技术，在现有的研究基础上，建立组培快繁体系。本课题的完成不仅可以保护和开发地方杨梅优良品种，还可以提升我国杨梅的研究水平，解决杨梅嫁接困难的难题。‘浪荡子’杨梅组培快繁体系的建立不仅对科学研究具有重要意义，而且对社会经济具有重要价值。
1 材料与方法
1．1 材料
外植体材料来自江苏省苏州市金庭镇的‘浪荡子’杨梅成年结果树，采样时间分别为2012年的7~8月份（夏季）、9~10月份（秋季）、12~1月份（冬季）、2013年的3~5月份（春季）。
1．2 方法
1．2．1 初始诱导培养 方法参照谢小波[9]等并略作修改。具体是，采取当年新生直径3~4 mm的杨梅枝条为外植体，剪去叶片，插入清水瓶中在室内养护1~2 d。先用饱和的洗衣粉水泡洗20~40 min，再以流动的自来水冲洗外植体10~20 min后带入无菌室。在超净工作台上，用无菌滤纸吸干水分，然后用75%乙醇消毒0~60 s，无菌水冲洗2次，再用0.1%升汞表面消毒6~10min，无菌水冲洗5~6次，用灭菌剪刀或刀将外植体剪成2~3 cm。置于事先备好的初始诱导培养基中培养。以WPM为基本培养基，附加琼脂6 g/L，蔗糖30 g/L，pH值调至5.8。接种后置于光照下培养，光照强度1500 lx，光照时间每日10~12 h，培养温度在25（±1）℃，相对湿度为80%。了解不同处理方式对外植体的除菌效果，以及不同质量分数的6BA、NAA和PVP组合对芽体萌动、展叶的影响。
1．2．2 茎伸长培养 将长出的新芽转接入茎伸长培养基中培养。以WPM为基本培养基，附加琼脂6 g/L，蔗糖30 g/L，pH值调至5.8。接种后置于光照下培养，光照强度1500 lx，光照时间每日10~12 h，培养温度在25（±1）℃，相对湿度为80%。了解不同质量分数的6BA、NAA、GA3和PVP组合对新芽伸长的影响。
1．3 数据处理
数据采用Excel进行整理，采用SAS进行统计分析。
2 结果与分析
目录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1
引言1
1材料与方法2
1.1材料 2
1.2方法 2
1.2.1初始诱导培养2
1.2.2茎伸长培养2
1.3数据处理 2
2结果与分析2
2.1外植体的最佳采样时间2
2.2不同消毒处理组合对外植体的影响3
2.2.1不同消毒处理时间对夏季茎段的影响3
2.2.2夏季茎段最适合的消毒组合对秋季茎段的影响3
2.2.3夏季茎段最适合的消毒组合对冬季茎段的影响4
2.2.4不同消毒处理组合对春季茎段萌动的影响4
2.3不同培养基对外植体各阶段生长的影响4
2.3.1初始诱导培养4
2.3.2茎伸长培养5
3讨论5
致谢6
参考文献6
图1 杨梅芽萌动，开始展叶7
图2 杨梅叶片展开7
图3 接种90 d后的茎伸长苗7
表1 不同时期外植体的接种效果3
表2 不同消毒处理组合对夏季茎段的影响3
表3 不同消毒处理组合对春季茎段萌动的影响4
表4 不同培养基对春季茎段诱导的影响4
表5 不同培养基对春季茎段上新芽茎伸长的影响5
‘浪荡子’杨梅初代培养技术研究
引言
引言
杨梅(Myrica rubra Sieb.& Zucc.)，杨梅科常绿果树，原产中国东南各省和云贵高原，栽培历史悠久，是中国著名 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: ^351916072#
的特色果树[1]。国外虽然有不少杨梅种，但很少栽培，绝大部分杨梅果都产于中国。近些年来，我国杨梅栽培更加迅速地发展，现在长江流域以南均有栽培，主产浙江、江苏、福建、江西、湖南及广东省，其中栽培面积、产量及品质等均以浙江为最[2]。
杨梅果实风味独特，甜酸适口，而且具有很高的营养保健价值。除了含有丰富的碳水化合物、蛋白质、氨基酸、有机酸、矿物质、维生素外，还含有丰富的花色素和类黄酮成分，具有较强的抗氧化和抗衰老的作用[3]。杨梅还具有医疗保健和药用作用，北魏的《齐民要术》即有记载[4]。近代生物学和医学进一步证明，杨梅具有消食、消暑、御寒、止泻、利尿、治痢疾及生津止渴、清肠胃、除烦愤恶气等多种药用价值，在医学上常用作收敛剂、强心剂、驱风剂、健胃剂、胸肺药、皮肤药和创伤药等[5]。杨梅还可以加工成多种蜜饯和饮料，十分畅销。杨梅生长在远离大城市的山区，极少或没有被大气污染，栽培管理粗放，病虫危害较少，具有“绿色无公害水果”之美誉。
杨梅种质资源丰富，营养价值高，很受消费者欢迎，近年来杨梅种植面积迅速扩大，单靠种子繁殖实生苗已不能满足扩大种植的要求，加上杨梅嫁接育苗系数低，很有必要发展快捷的育苗方法和科学的苗木鉴定技术。
组培快繁是近年来在园艺苗木繁殖中应用广泛的生物技术，也取得了良好的经济效益，但在杨梅上还少见报道。组培快繁是在无菌和人工控制的环境条件下，利用适当的培养基，对离体的植物器官、组织、细胞及原生质体进行培养，使其再生细胞或完整植株的技术[6]。组培快繁一般要经过外植体建立、增殖培养、生根培养三个阶段。采用组培快繁法对具有优良品种特性的植株进行快速繁殖，在短期内生产出大量整齐均匀的健壮种苗，建立一个高效率的植株再生体系，将有利于优良品种的推广[7]。组培苗具有质量好、体积小，便于携带、运输和交流等特点，近年来已由实验室中试验阶段，逐步向商品化生产过渡，这使得组培快繁所建立的商业化生产体系开发前景非常广阔[8]。
‘浪荡子’杨梅是苏州市金庭镇杨梅众多品种中最优秀的一种，和普通杨梅相比明显要大一圈，颜色紫黑、口感较硬、水分多、甜度大，且不易腐烂，储存时间比普通杨梅长。成熟后颜色乌黑发亮，口感更甚乌梅，曾被泰国皇室以八元一颗的价格采购，乃是杨梅中的极品。
但是，‘浪荡子’杨梅繁殖速度慢，短时间内难以获得大量良种苗木，不利于推广及利用。本课题就是针对‘浪荡子’杨梅这点不足，采用组织培养技术，在现有的研究基础上，建立组培快繁体系。本课题的完成不仅可以保护和开发地方杨梅优良品种，还可以提升我国杨梅的研究水平，解决杨梅嫁接困难的难题。‘浪荡子’杨梅组培快繁体系的建立不仅对科学研究具有重要意义，而且对社会经济具有重要价值。
1 材料与方法
1．1 材料
外植体材料来自江苏省苏州市金庭镇的‘浪荡子’杨梅成年结果树，采样时间分别为2012年的7~8月份（夏季）、9~10月份（秋季）、12~1月份（冬季）、2013年的3~5月份（春季）。
1．2 方法
1．2．1 初始诱导培养 方法参照谢小波[9]等并略作修改。具体是，采取当年新生直径3~4 mm的杨梅枝条为外植体，剪去叶片，插入清水瓶中在室内养护1~2 d。先用饱和的洗衣粉水泡洗20~40 min，再以流动的自来水冲洗外植体10~20 min后带入无菌室。在超净工作台上，用无菌滤纸吸干水分，然后用75%乙醇消毒0~60 s，无菌水冲洗2次，再用0.1%升汞表面消毒6~10min，无菌水冲洗5~6次，用灭菌剪刀或刀将外植体剪成2~3 cm。置于事先备好的初始诱导培养基中培养。以WPM为基本培养基，附加琼脂6 g/L，蔗糖30 g/L，pH值调至5.8。接种后置于光照下培养，光照强度1500 lx，光照时间每日10~12 h，培养温度在25（±1）℃，相对湿度为80%。了解不同处理方式对外植体的除菌效果，以及不同质量分数的6BA、NAA和PVP组合对芽体萌动、展叶的影响。
1．2．2 茎伸长培养 将长出的新芽转接入茎伸长培养基中培养。以WPM为基本培养基，附加琼脂6 g/L，蔗糖30 g/L，pH值调至5.8。接种后置于光照下培养，光照强度1500 lx，光照时间每日10~12 h，培养温度在25（±1）℃，相对湿度为80%。了解不同质量分数的6BA、NAA、GA3和PVP组合对新芽伸长的影响。
1．3 数据处理
数据采用Excel进行整理，采用SAS进行统计分析。
2 结果与分析
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