叶面喷施硒肥对菊花脑产量和品质的影响
摘要：硒对植物的生长发育具有重要的影响，也是人体所必需的微量元素之一。为探究叶面喷施硒肥能否使菊花脑增产，提升菊花脑的品质，在控制其他因素一致的条件下进行小区种植，设置对照（CK）、10、20、30、40 mg/L硒肥浓度这5个处理，在人工喷施硒肥一定时间后采集菊花脑嫩茎叶，处理并分别用ICP-MS法测定总硒含量、考马斯亮蓝法测定蛋白质含量、蒽酮比色法测定可溶性糖含量、微波辅助提取法测定多酚含量。结果表明喷施硒肥可以显著提高菊花脑的产量和叶片中硒、糖、多酚的含量，对蛋白含量则有一定程度的降低作用，生产上运用浓度为20 mg/L的硒肥较为适宜。
目录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1
引言1
1材料与方法2
1.1材料 2
1.1.1菊花脑品种2
1.1.2试剂与用品2
1.2方法 2
1.2.1菊花脑繁殖方法2
1.2.2 菊花脑栽培与处理2
1.2.3 ICPMS法测定总硒含量2
1.2.4 考马斯亮蓝法测定蛋白质含量3
1.2.5 蒽酮比色法测定可溶性糖含量3
1.2.6 微波辅助提取菊花脑多酚4
2 结果与分析5
2.1施硒对菊花脑品质的影响5
2.1.1硒含量5
2.1.2 蛋白含量6
2.1.3可溶性糖含量7
2.1.4 多酚含量8
2.2施硒对菊花脑产量的影响9
3讨论与小结 9
致谢10
参考文献10
叶面喷施硒肥对菊花脑产量和品质的影响
引言
硒是维持人体生命和正常生理活动所必不可少的元素[]，同时还是体内各种活性酶的重要构成成分[]。中国有接近总人口2/3的人数存在不同程度的硒摄入量不足，2000年中国营养学会推荐的我国成人每日需摄入硒的量为50~200 μg，而目前我国人民平均每日硒的摄入量大约在26~32 μg的范围内[]。为了实现科学补硒，可以对作物适量施用硒肥，增加蔬菜中的总硒含量
*好棒文|www.hbsrm.com +Q: 3 5 1 9 1 6 0 7 2
，提高人体对硒的吸收率，增加人们摄入硒的途径。已有研究表明，人工喷施适量硒肥可以有效提高作物内的硒含量，且使多种水果、蔬菜的产量得到提升，粗蛋白含量增加[]。
作为江浙地区受欢迎的夏季蔬菜之一，菊花脑具有适应性广、耐寒、耐贫瘠和干旱、不择土壤、病虫害少、栽培容易的优点，是一种很有开发前景的保健型无公害蔬菜[]，是城市郊区夏季叶菜类蔬菜的理想品种。目前为止还没有关于硒肥对菊花脑效应的研究，本实验在前人对硒肥在其他作物效应研究的基础上进行，在不同小区内种植相同数量菊花脑幼苗，每隔一定时期喷施不同浓度的硒肥，保持外界条件和生产管理措施基本一致，待菊花脑可采收时观测各小区内植株长势和分枝状况，采集不同小区内菊花脑的嫩茎叶并测定叶片中硒、糖、蛋白质、多酚的含量，证实硒肥对菊花脑同样有提高产量、改善品质的作用，为科学种植菊花脑，提高其品质和经济价值提供新途径。
1 材料与方法
1．1 材料
1．1．1 菊花脑品种
常见的菊花脑种类有两种：大叶品种和小叶品种。大叶品种多数具有较圆且钝的叶片，叶缘的缺刻比较浅。小叶品种的叶片一般较小，呈尖卵圆形，叶缘的缺刻较深，靠近柄的部分通常为淡紫色，产量不高，但适应性强[]。本试验主要是为了探究施用硒肥对食用菊花脑品质和产量的影响，要求在采收期获得较多的叶片，且栽培地有较好的人工管理，故选用品质好且产量高的大叶品种菊花脑作为实验材料。
1．1．2 试剂与用品
实验所用的试剂均为分析纯试剂，由大学生理实验室所采购，其他试验用品均由大学生理实验室提供。
1．2 方法
1．2．1 菊花脑繁殖方法
实验所用的菊花脑全部由同一株母株经过分株繁殖法繁殖而得，以尽可能保证实验材料基因型的同质一致。提前一年选定分枝多、长势健壮的菊花脑成苗作为母株，在四月上旬将母株整株挖出，选择健壮无病虫的新枝剪下，每段枝条的长度在10 cm左右，植物学上端剪成平口，植物学下端剪成斜口，只保留1~2片叶子，插在在装有珍珠岩、蛭石等基质的穴盘中培养4周左右，及时浇水以利发芽或活棵。待成活长出新叶后，将菊花脑幼苗移栽至肥力均匀的田间试验地[]。
1．2．2 菊花脑栽培与处理
试验田的安排采用随机区组设计，以施用硒肥的不同浓度作为单一变量，1~5小区内施用硒肥的浓度分别为0、10、20、30、40 mg/L。每组3次重复，每个重复内栽种2棵菊花脑。小区的面积设置为1 m2 ，正方形。扦插菊花脑枝条时及时浇水以保持土壤的湿润，每日早晚各浇水1次，夏季暴雨期间可搭建遮雨棚，要及时排水防涝，防止因为栽培地积水而造成菊花脑幼苗烂根。八至九月光照过强时采取适当的遮阳挡光措施[]，防止植株失水萎蔫。适时除草，为了防止菊花脑幼苗扎根不稳被风吹倒还要经常培土[]。九月份待菊花脑高度达到20 cm左右时进行采收，同一株上尽量选取不同分枝的上部叶片作为样本，各组分开收集，清洗擦干后分组装入编好号码的纸袋待用。
运用常规测定技术和田间统计方法进行处理，运用Excel和SAS数据处理系统完成数据统计和分析。
1．2．3 ICPMS法测定总硒含量
将采集好的菊花脑嫩梢清洗干净，在烘箱内以105 ℃处理15 min烘干，用研钵将干叶磨碎，过40目筛，置于消解仪中进行消解，取出后待其自然冷却，定容，转移至三角瓶中。将事先准备好的400 mg/L的硒标准储备液用蒸馏水逐级稀释，配制为浓度分别为0、10、50、200 μg/L的硒标准溶液,测定时待测菊花脑叶片与内标物同时进样,绘制标准曲线[]。以质谱调谐液对仪器的测定参数进行ICP/MS优化,依次导入标准曲线的空白、标准系列溶液、样品制备液和样品消化空白液进行测定，由设定好的仪器参数自动计算菊花脑叶片样本中硒的浓度[]。
1．2．4 考马斯亮蓝法测定蛋白质含量
在电子天平上准确称取10 mg的BSA粉末于烧杯中，加入少量0.9 %的NaCl搅拌溶解至烧杯中无固形物，全部转移到100 mL的容量瓶中再用NaCl溶液定容，配制为100 μg/mL的标准蛋白质溶液待用。用电子天平准确称取100 mg的G250粉末放入小烧杯中，并往烧杯内加50 mL 90 %的乙醇，用玻璃棒搅拌直至G250粉末充分溶解，再加入100 mL 85 %的磷酸，加蒸馏水定容到1 L，配制成G250试剂，贮于深色玻璃瓶中，避光保存。取6支具塞试管，从1~6分别标上编号，按表1加入试剂：
各试管充分震荡后，用移液枪向每管加3 mL配制好的考马斯亮蓝溶液摇匀，静置5 min后在595 nm下进行比色[]，测定各管中溶液的吸光度。以蛋白质含量（μg)为横坐标，以溶液的吸光度为纵坐标绘制标准曲线。
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摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1
引言1
1材料与方法2
1.1材料 2
1.1.1菊花脑品种2
1.1.2试剂与用品2
1.2方法 2
1.2.1菊花脑繁殖方法2
1.2.2 菊花脑栽培与处理2
1.2.3 ICPMS法测定总硒含量2
1.2.4 考马斯亮蓝法测定蛋白质含量3
1.2.5 蒽酮比色法测定可溶性糖含量3
1.2.6 微波辅助提取菊花脑多酚4
2 结果与分析5
2.1施硒对菊花脑品质的影响5
2.1.1硒含量5
2.1.2 蛋白含量6
2.1.3可溶性糖含量7
2.1.4 多酚含量8
2.2施硒对菊花脑产量的影响9
3讨论与小结 9
致谢10
参考文献10
叶面喷施硒肥对菊花脑产量和品质的影响
引言
硒是维持人体生命和正常生理活动所必不可少的元素[]，同时还是体内各种活性酶的重要构成成分[]。中国有接近总人口2/3的人数存在不同程度的硒摄入量不足，2000年中国营养学会推荐的我国成人每日需摄入硒的量为50~200 μg，而目前我国人民平均每日硒的摄入量大约在26~32 μg的范围内[]。为了实现科学补硒，可以对作物适量施用硒肥，增加蔬菜中的总硒含量
*好棒文|www.hbsrm.com +Q: 3 5 1 9 1 6 0 7 2
，提高人体对硒的吸收率，增加人们摄入硒的途径。已有研究表明，人工喷施适量硒肥可以有效提高作物内的硒含量，且使多种水果、蔬菜的产量得到提升，粗蛋白含量增加[]。
作为江浙地区受欢迎的夏季蔬菜之一，菊花脑具有适应性广、耐寒、耐贫瘠和干旱、不择土壤、病虫害少、栽培容易的优点，是一种很有开发前景的保健型无公害蔬菜[]，是城市郊区夏季叶菜类蔬菜的理想品种。目前为止还没有关于硒肥对菊花脑效应的研究，本实验在前人对硒肥在其他作物效应研究的基础上进行，在不同小区内种植相同数量菊花脑幼苗，每隔一定时期喷施不同浓度的硒肥，保持外界条件和生产管理措施基本一致，待菊花脑可采收时观测各小区内植株长势和分枝状况，采集不同小区内菊花脑的嫩茎叶并测定叶片中硒、糖、蛋白质、多酚的含量，证实硒肥对菊花脑同样有提高产量、改善品质的作用，为科学种植菊花脑，提高其品质和经济价值提供新途径。
1 材料与方法
1．1 材料
1．1．1 菊花脑品种
常见的菊花脑种类有两种：大叶品种和小叶品种。大叶品种多数具有较圆且钝的叶片，叶缘的缺刻比较浅。小叶品种的叶片一般较小，呈尖卵圆形，叶缘的缺刻较深，靠近柄的部分通常为淡紫色，产量不高，但适应性强[]。本试验主要是为了探究施用硒肥对食用菊花脑品质和产量的影响，要求在采收期获得较多的叶片，且栽培地有较好的人工管理，故选用品质好且产量高的大叶品种菊花脑作为实验材料。
1．1．2 试剂与用品
实验所用的试剂均为分析纯试剂，由大学生理实验室所采购，其他试验用品均由大学生理实验室提供。
1．2 方法
1．2．1 菊花脑繁殖方法
实验所用的菊花脑全部由同一株母株经过分株繁殖法繁殖而得，以尽可能保证实验材料基因型的同质一致。提前一年选定分枝多、长势健壮的菊花脑成苗作为母株，在四月上旬将母株整株挖出，选择健壮无病虫的新枝剪下，每段枝条的长度在10 cm左右，植物学上端剪成平口，植物学下端剪成斜口，只保留1~2片叶子，插在在装有珍珠岩、蛭石等基质的穴盘中培养4周左右，及时浇水以利发芽或活棵。待成活长出新叶后，将菊花脑幼苗移栽至肥力均匀的田间试验地[]。
1．2．2 菊花脑栽培与处理
试验田的安排采用随机区组设计，以施用硒肥的不同浓度作为单一变量，1~5小区内施用硒肥的浓度分别为0、10、20、30、40 mg/L。每组3次重复，每个重复内栽种2棵菊花脑。小区的面积设置为1 m2 ，正方形。扦插菊花脑枝条时及时浇水以保持土壤的湿润，每日早晚各浇水1次，夏季暴雨期间可搭建遮雨棚，要及时排水防涝，防止因为栽培地积水而造成菊花脑幼苗烂根。八至九月光照过强时采取适当的遮阳挡光措施[]，防止植株失水萎蔫。适时除草，为了防止菊花脑幼苗扎根不稳被风吹倒还要经常培土[]。九月份待菊花脑高度达到20 cm左右时进行采收，同一株上尽量选取不同分枝的上部叶片作为样本，各组分开收集，清洗擦干后分组装入编好号码的纸袋待用。
运用常规测定技术和田间统计方法进行处理，运用Excel和SAS数据处理系统完成数据统计和分析。
1．2．3 ICPMS法测定总硒含量
将采集好的菊花脑嫩梢清洗干净，在烘箱内以105 ℃处理15 min烘干，用研钵将干叶磨碎，过40目筛，置于消解仪中进行消解，取出后待其自然冷却，定容，转移至三角瓶中。将事先准备好的400 mg/L的硒标准储备液用蒸馏水逐级稀释，配制为浓度分别为0、10、50、200 μg/L的硒标准溶液,测定时待测菊花脑叶片与内标物同时进样,绘制标准曲线[]。以质谱调谐液对仪器的测定参数进行ICP/MS优化,依次导入标准曲线的空白、标准系列溶液、样品制备液和样品消化空白液进行测定，由设定好的仪器参数自动计算菊花脑叶片样本中硒的浓度[]。
1．2．4 考马斯亮蓝法测定蛋白质含量
在电子天平上准确称取10 mg的BSA粉末于烧杯中，加入少量0.9 %的NaCl搅拌溶解至烧杯中无固形物，全部转移到100 mL的容量瓶中再用NaCl溶液定容，配制为100 μg/mL的标准蛋白质溶液待用。用电子天平准确称取100 mg的G250粉末放入小烧杯中，并往烧杯内加50 mL 90 %的乙醇，用玻璃棒搅拌直至G250粉末充分溶解，再加入100 mL 85 %的磷酸，加蒸馏水定容到1 L，配制成G250试剂，贮于深色玻璃瓶中，避光保存。取6支具塞试管，从1~6分别标上编号，按表1加入试剂：
各试管充分震荡后，用移液枪向每管加3 mL配制好的考马斯亮蓝溶液摇匀，静置5 min后在595 nm下进行比色[]，测定各管中溶液的吸光度。以蛋白质含量（μg)为横坐标，以溶液的吸光度为纵坐标绘制标准曲线。
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