芍药甘草汤组方规律的初步研究
目录
[摘要] 1
[关键词] 1
1 仪器与试药 1
1.1 仪器 1
1.2 试剂 1
1.3 材料 1
2 方法和结果 1
2.1 色谱条件 1
2.2 对照品溶液的制备 2
2.3 供试品溶液的制备 2
2.3.1 生白芍及其甘草配伍煎煮液的制备 2
2.3.2 炒白芍及其甘草配伍煎煮液的制备 2
2.4 线性关系 2
2.5 稳定性试验 3
2.6 重复性试验 3
2.7 回收率试验 3
2.8 结果 3
3 讨论 4
致谢 5
参考文献 5
Abstract: 6
引言
芍药甘草汤组方规律的初步研究
[摘要] 目的:对白芍生、炒品单味及其分别与甘草生、炙品配伍后煎煮液中芍药苷含量随煎煮时长变化情况进行比较。方法:将生、炒白芍,生、炙甘草饮片分别采用自身对照的方法,进行配伍,HPLC法测定芍药苷含量,考察煎煮不同时间下芍药苷的煎出率。结果:各配伍中的芍药苷含量在初次煎煮时,除炒白芍单煎外都呈增长趋势,生白芍与炙甘草配伍尤为明显。炒白芍在煎煮90 min后芍药苷含量出现降低趋势。结论:芍药甘草汤的不同配伍药液中芍药苷的含量都随煎煮时间延长而增加,其中生白芍与炙甘草配伍芍药苷煎出率最高,从芍药苷煎出率的角度认为生白芍与炙甘草是芍药甘草汤的最佳配伍。
[关键词]芍药甘草汤;芍药;芍药苷
白芍为毛茛科植物芍药Paeonia lactiflora Pall.的干燥根,多年生草本,以其干燥根入药,其主要有效成分为芍药苷[1][3]。白芍常在方剂中配伍使用,而芍药甘草汤是源于东汉张仲景《伤寒论?太阳篇》的著名方剂,是常用的缓急止痛之方,由芍药和甘草等成分组成,主营阴不足、肝脾不和,症见脘腹诸痛,四肢挛急等证候。也有很多研究表明白芍经不同加工处理[4][8]及不同配伍对芍药苷含量的影响很大[9][14]。故本项目研究芍药苷初次煎煮时,芍药苷煎出率随煎煮时间的变化规律,同 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: @351916072@
时采用自身对照的方法,尽可能地减少了可能存在的影响因素。同时探究临床多用的不同炮制品分别与生、炙甘草组方时芍药苷含量的变化情况,将对临床组方用药起到一定的指导作用。
1 仪器与试药
1.1 仪器
AgilentG4288A 1120一体式液相色谱仪。
1.2 试剂
甲醇﹙色谱纯﹚、自来水、芍药苷标准品﹙中国药品生物制品检定所,批号为0736200934﹚。
1.3 材料
2 方法和结果
2.1 色谱条件
色谱柱:汉邦C18﹙4.6×250 mm,5 μm﹚;流动相:甲醇水﹙30∶70﹚;流速:1mLmin﹣1;检测波长:230nm;进样量10 μL;柱温:室温。对照品及样品的HPLC图见图1。
A
B
图1 对照品及样品的HPLC图
A.对照品;B.样品
2.2 对照品溶液的制备
精确称取芍药苷标准品0.0400 g用甲醇溶解至100mL容量瓶中,定容,其浓度为0.4 mgmL﹣1。
2.3 供试品溶液的制备
生甘草、炙甘草饮片分别均匀纵切分为5.00 g两组。
2.3.1 生白芍及其甘草配伍煎煮液的制备 将润软后的芍药根段均匀地纵切为三份,烘干后称取15 g三份,一份单煎,另两份分别与已称取的生甘草、炙甘草饮片配伍为芍药甘草汤,分别置于烧杯中,加水至400mL,浸泡30 min,每15 min取煎煮液样品3mL,2 h后滤去提取液,重复煎煮取样2 h,期间不断补水保持提取液总量在400mL不变。
2.3.2 炒白芍及其甘草配伍煎煮液的制备 将炒白芍饮片均匀纵切分为15 g的为三份后按照2.3.1 中方法制备样品。具体配伍方法见表1。
表1 配伍方法
组别
配伍
1
2
3
4
5
6
生白芍15 g
生白芍15 g
生白芍15 g
炒白芍15 g
炒白芍15 g
炒白芍15 g
生甘草5 g
炙甘草5 g
生甘草5 g
炙甘草5 g
2.4 线性关系
取标准品溶液,过微孔滤膜,分别进样6 μL、8 μL、10 μL、12 μL、14 μL注入液相色谱仪,记录色谱图,峰面积对进样量进行线性回归,经计算﹙表1﹚数据的回归方程为:Y=8.1×106x-4.6×106,R2=0.9999。
表2 标准品芍药苷含量及峰面积
进样量﹙μl﹚
芍药苷含量﹙μg﹚
峰面积
6
8
10
12
14
24
32
40
48
56
43739411
59981424
75841673
92368468
108225105
2.5 稳定性试验
取标准品溶液,在同一仪器上分别在2 h、4 h、6 h、10 h、16 h、24 h精密吸取标准品溶液15 μL 在2.1 项色谱条件条件下测定,记录平均峰面积为115937286,RSD2.8%。
2.6 重复性试验
从同一份煎煮液中取样3mL,共6 份,分别进行测定,测定平均浓度为0.170 mgmL﹣1,RSD2.1%。
2.7 回收率试验
取芍药苷样品溶液,加入芍药苷标准品溶液﹙0.4 mgmL﹣1﹚1mL,用甲醇﹙色谱纯﹚定容至10mL,静置,按照2.1项下色谱条件,进样5 μL,测定含量,计算平均回收率为96.7%。
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