不同光强绿光对蚂蟥生长及内在成分的研究
目录
摘要3
关键词3
引言3
1 材料与方法3
材料 3
试剂3
仪器3
方法4
测定项目4
1.3.1日增重率、特定生长率、存活率的测定4
1.3.2消化酶活力的测定4
蛋白酶活性测定4
脂肪酶活性测定4
淀粉酶活性测定4
酶比活力定义4
1.3.3抗逆酶的测定4
碱性磷酸酶4
过氧化氢酶4
超氧化物歧化酶4
精氨酸激酶4
1.3.4药材品质的测定4
水分4
总灰分4
酸不溶性灰分4
酸碱度5
浸出物5
抗凝血酶活性的测定5
2 结果与分析6
2.1 不同光照强度对蚂蟥生长、存活率的影响6
2.2 不同光照强度对蚂蟥消化酶的影响6
2.3 不同光照强度对蚂蟥抗逆酶的影响6
2.4 不同光照强度对蚂蟥内在成分的影响7
3 讨论7
致谢7
参考文献7
Abstract8
引言
不同光强绿光对蚂蟥生长及内在成分的研究
学生 钱伟伦
[摘要] 目的：探讨不同光强绿光对蚂蟥生长和内在成分的影响。方法：设置五组不同光强的绿光14.89±2.85、32.00±2.60、46.11±4.91、55.11±4.40和66.22±5.38μmolm2s1，喂养蚂蟥60天，测定蚂蟥的体重、存活率、消化酶活力、抗逆酶活力和内在成分。结果：在14.89±2.85μmolm2s1条件下，蚂蟥的蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶和精氨酸激酶显著高于其他4个光照强度组，蚂蟥特定生长率和存活率最高；在66.22±5.38μmolm2s1条件下，超氧化物歧化酶最高，蚂蟥日增重率、特定生长率和存活率都最低。结论：14.89±2.85μmolm2s1最适合蚂蟥生长，66.22±5.38μmolm2s1最不适合蚂蟥生长，绿光对内在成分的影响不 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: &351916072&
明显。
[关键词] 蚂蟥；生长；绿光；光强；内在成分
水蛭作为中药首载于《神农本草经》，被列为下品药，《名医别录》和《本草纲目》中亦有记载。水蛭性平、味咸苦、有小毒，具有通经、破瘀、消肿之功效，主治血瘀经闭，症瘕积聚。医蛭科动物水蛭（Hirudo nipponia Whitman）、黄蛭科动物蚂蟥（Whitmania pigra Whitman）和柳叶蚂蟥（Whitmania acranulate Whitman）被2010年版《中国药典》收录作为水蛭药材的动物基原[1]。本项目的研究对象为蚂蟥，又称宽体金线蛭，该种亦为我国水蛭药材市场的主流品种。
随着对水蛭研究工作的深入，以水蛭为原料的中成药及保健产品日渐增多，因为过度捕捞和生存环境的恶化导致蚂蟥野生资源日益枯竭，价格不断攀升，因此近几年蚂蟥的人工养殖受到重视并取得初步成功。目前对水蛭的研究则多侧重在药理和生理方面[23]，有关蚂蟥人工养殖的基础性研究少有报道，研究主要集中在对蚂蟥呼吸生理、繁殖条件以及摄食规律等方面[46]，光质作为一种重要的环境因子，对水生动物的生长，摄食，代谢，生殖等问题产生间接而又非常广泛的影响。而光照对蚂蟥生长方面的研究还未见报道。本实验通过研究不同光强绿光对蚂蟥生长及其消化酶、抗逆性酶的影响，从而为蚂蟥的人工养殖提供科学依据。
1 材料与方法
1．1 材料
蚂蟥（由大学中药材研究所提供），经郭巧生教授鉴定为蚂蟥（Whitmania pigra Whitman）。
1．1．1 试剂
0.5%淀粉溶液、DNS试剂、 FolinPhenol 试剂（Sigma公司）、0.5%干酪素、考马斯亮蓝G250（南京建成生物技术公司）、0.4molL1的三氯乙酸溶液、磷酸氢二钠柠檬酸缓冲液、碳酸钠碳酸氢钠缓冲溶液、0.4molL1的碳酸钠溶液、对棕榈酸硝基苯酯pNPP溶液、30%三氯乙酸、10%碳酸钠溶液、0.9%氯化钠溶液、对硝基酚溶液等。
1．1．2 仪器
756CRT紫外分光光度计（上海精密科学仪器有限公司）、TGL16G离心机（飞鸽）、FA1104分析天平（上海精科天平）、KQ250B超声仪（昆山市超声仪器公司）、DELTA320 型PH计（梅特勒托利多仪器有限公司）、匀浆机(宁波新芝生物科技股份有限公司)。
1．2 方法
采用塑料罐（2L）进行试验，设5个绿光光照梯度（见表1），每组20个平行。每个罐子投入蚂蟥20条，试验进行60d。每日下午5:00投喂配合螺蛳，每星期换水2次，试验期间水温25±3℃。
表1.光照强度情况
光照组
光照强度
G1
14.89±2.85μmolm2s1
G2
32.00±2.60μmolm2s1
G3
46.11±4.91μmolm2s1
G4
55.11±4.40μmolm2s1
G5
66.22±5.38μmolm2s1
1．3 测定项目
1．3．1 日增重率、特定生长率、存活率的测定
日增重率=（试验末平均重量－试验初平均重量）/试验初平均重量*100%；
特定生长率=（㏑(试验末平均重量)－㏑(试验初平均重量)）/试验时间*100%；
存活率=试验末条数/试验初条数*100%。
1．3．2 消化酶活力的测定[7]
蛋白酶活性测定 采用福林酚法，在37℃，pH3.2和pH9.2条件下，每分钟水解干酪素产生1μg酪氨酸定义为1个蛋白酶活力单位。
脂肪酶活性测定 采用对棕榈酸硝基苯酯比色法，在37℃，pH8.2条件下，1min催化释放1μmol对硝基酚的酶量定义为 1个活力单位。
淀粉酶活性测定 采用 3,5二硝基水杨酸比色法，在37℃，pH5.2条件下，单位体积的酶量，每分钟水解淀粉生成1mg还原糖的产量为1个淀粉酶活力单位。
酶比活力定义 每毫克可溶性酶蛋白所具有的酶活力单位数（U?mg1? (protein)）。
1．3．3 抗逆酶的测定
碱性磷酸酶 采用对硝基苯基磷酸二钠法[8]，在一定条件下，每分钟催化产生1μmolpNP酶量定义为 1个活力单位。
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