芍药多糖对芍药苷吸附性的初步研究
目录
[摘要] 1
[关键词] 1
1 仪器与试药 1
1.1 仪器 1
1.2 试剂 1
1.3 材料 1
2 方法和结果 1
2.1 色谱条件 1
2.2 对照品溶液的制备 1
2.3 供试品溶液的制备 1
2.3.1 芍药多糖的制备 1
2.3.2 样品溶液的制备 1
2.4 线性关系 1
2.5 稳定性试验 2
2.6 重复性试验 2
2.7 回收率试验 2
2.8 结果 2
2.8.1 多糖浓度不同时芍药苷随时间变化的释放量 2
2.8.2 多糖浓度不同时芍药苷随时间变化的残留量 3
3 讨论 3
致谢 4
参考文献 4
附录 4
Abstract： 4
Key words: 4
芍药多糖对芍药苷吸附性的初步研究
[摘要] 目的：测量芍药多糖对芍药苷吸附能力的相关性。 方法：将粗糖提纯后，分别称取0.15mg，0.1mg，0.05mg的多糖，放在透析袋中，用高效液相测量其对20mg芍药苷的吸附力。 结果：芍药多糖对芍药苷有吸附力，且吸附性呈正向相关。结论：芍药多糖对芍药苷有吸附力，且吸附力为0.282。
[关键词] 芍药；芍药多糖；吸附性；芍药苷含量
白芍为毛茛科植物芍Paeonia Lactiflora Pall. 的干燥根，芍药的根经炮制加工后可以得到白芍、酒白芍、炒白芍和土炒白芍等中药材饮片，白芍具有清肝泻火，平抑肝阳，养阴除烦的功能，药典上规定其芍药苷含量不得低于1.2％。近来研究发现多糖有提高人体免疫力的功能，如茯苓多糖等。目前主要以研究芍药苷为主，对芍药多糖的研究还比较少。本实验通过测量芍药多糖对芍药苷的吸附能力，以期观察芍药多糖对芍药苷吸附性力大小和吸附的变化动态。
1 仪器与试药
1.1 仪器 烘箱、离心机、旋转蒸发仪、水浴锅、Agilent 11 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: ^351916072*
20G4288A—一体式液相色谱仪、
1.2 试剂 95％乙醇（分析纯）、三氯乙酸、甲醇（色谱纯）、纯净水（自制）、芍药苷标品（中国药品生物制品检定所，批号为0736200934）
1.3 材料 芍药根 从江苏省仪征市星河生态园芍药种质资源圃获得，且经大学园艺学院中药系周立良副教授鉴定属于芍药科芍药Paeonia Lactiflora Pall. 。
2.方法与结果
色谱条件 色谱柱：汉邦C18（4.6mm×250mm，5μm ）；流动相：甲醇水（35：65）；流速1mL/min；检测波长：230nm；进样量：10μL柱温：室温。(见附录)
对照品溶液的制备 精确称取芍药苷标准品22.5mg，用甲醇（色谱纯）溶解至50mL容量瓶中，并定容至刻度线，其浓度为0.45mg/mL。
供试品溶液的制备
2.3.1 芍药多糖的制备 将干燥的芍药根泡软切块后放入烧杯中，加水淹没，水浴加热2h，后倒出溶液，重复两次后，将三次的溶液混合后用旋转蒸发仪蒸发至200mL，然后加入浓度为15%的三氯乙酸溶液至无沉淀生成，充分搅拌二十分钟后，用NaCl中和酸度，离心，取上清液；再用旋转蒸发仪蒸发水分至50mL，后加95%的乙醇，直至无沉淀生成，后离心，用95%的乙醇清洗，后在烘箱内用60℃的温度将其烘干即得到较为纯净的芍药多糖。
2.3.2样品溶液的制备
芍药多糖放入透析袋，芍药苷直接放入试剂中
分别称取2.3.1中的干燥样品50mg、100mg和150mg，溶于5ML水中备用；再称取芍药苷标准品18mg三份，分别放入三个容量为100mL的烧杯中，加水定容只45mL；将三份芍药多糖的溶液放入相同规格的透析袋中，封口后放入烧杯中，并分别标好为50、100、150。
芍药多糖和芍药苷充分混合放入透析袋中后再放入试剂中
分别称取2.3.1中的干燥样品50mg、100mg和150mg，和芍药苷标准品18mg三份和芍药多糖混合均匀后，放入三个100mL的烧杯中，定容至50mL，份别标号为70、120、170。
2.4 线性关系
取标准品溶液，过微孔滤膜，分别进样2μL、3μL、4μL、9μL、10μL注入液相色谱仪，记录色谱图中对应芍药苷的峰面积，并对其进行线性回归统计，经计算（表1）数据得回归方程为：Y=2×106x4×106，R=0.9998。
表1 标准品芍药苷含量及峰面积
进样量（μL）
芍药苷含量（μg）
2
0.9
3
1.35
4
1.8
9
4.05
10
4.5
2.5稳定性试验
取标准品溶液，在同一仪器上分别在2h、4h、6h、8h、12h、24h精密吸取5μL,在2.1项条件下测定，记录平均峰面积为22594041，RSD1.4%。
2.6重复性试验
从制备的芍药多糖中取样100mg，共6份，与18mg芍药苷充分混合定容至50ML，12h后分别测定，测定芍药苷残余量平均浓度为0.0778mg/mL，RSD0.9%。
2.7回收率试验
取芍药苷样品溶液，加入芍药苷标准品溶液﹙0.45 mg/mL﹚1mL，用甲醇﹙色谱纯﹚定容至10mL，静置，按照2.1项下色谱条件，进样10 μL，测定含量，计算平均回收率为97.7%。
2.8 结果
2.8.1多糖浓度不同时芍药苷随时间变化的释放量
由图2可以很明显的看出，两者混合均匀时，芍芍药多糖对芍药苷有较强的吸附力，且吸附较为缓慢，比溶液中芍药苷达到平衡所用的时间长，约在10h左右达到平衡；芍药多糖的吸附力在一定浓度的芍药苷浓度下，与其浓度成比例，吸附力约为0.282。
2.8.2多糖浓度不同时芍药苷的残余量
由图3可以看出，烧杯中的芍药苷含量先是迅速的减少，后又增加，最后减少达到平衡，同时可以看出芍药多糖对芍药苷有较强的吸附力，且成正向相关；与图3相比，最后达到平衡时芍药苷的残余量较多，芍药多糖的吸附力约为0.264。
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