不同光强白光对蚂蟥生长及内在成分的研究

目录
摘要3
关键词3
引言3
1 材料3
1.1 试剂 3
1.2 仪器 3
2 方法3
2.1试验设计 3
2.2 测定项目4
2.2.1日增重率、特定生长率、存活率的测定4
2.2.2消化酶活力的测定4
2.2.3抗逆酶的测定4
2.2.4 酶比活力定义 4
2.2.5 药材品质的测定 4
2.3数据分析 5
3 结果5
3.1 不同光照强度对蚂蟥生长、存活率的影响5
3.2不同光照强度对蚂蟥消化酶的影响5
3.3不同光照强度对蚂蟥幼苗抗逆酶的影响5
3.4不同光照强度对蚂蟥药材品质的影响6
4 讨论6
4.1 不同光照强度对蚂蟥生长、存活率的影响6
4.2不同光照强度对蚂蟥消化酶的影响6
4.3不同光照强度对蚂蟥幼苗抗逆酶的影响6
4.4不同光照强度对蚂蟥药材品质的影响7
致谢7
参考文献7 Abstract8
引言
不同光强白光对蚂蟥生长及内在成分的研究
学生 胡敏
[摘要] 目的：测定和比较不同光强白光条件下蚂蟥Whitmania pigra 生长及内在成分。方法：实验设计了从33.33 ～ 136.44 μmol.m2.s1 5 个光照强度梯度，测定光强白光条件下蚂蟥生长及内在成分。结果：在85.00 μmol.m2.s1条件下，蚂蟥生长最快，消化酶、抗逆酶最高，存活率最低。在113.56 μmol.m2.s1条件下，抗凝血酶活性最高。结论: 在不同光强白光条件下，蚂蟥生长最适光强为85.00 μmol.m2.s1，药材品质最适光强为113.56 μmol.m2.s1。
[关键词] 蚂蟥；生长；消化酶；光强；药材品质
蚂蟥Whitmania pigra Whitman为水蛭科动物，别名宽体金线蛭，其干燥全体为药材水蛭。水蛭性平、味咸苦、有小毒，具有通经、破瘀、消肿之功效，主治 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: ^351916072# 
血瘀经闭，瘕积聚[1] 。水蛭体中含有一种生物活性物质水蛭素，是最重要的凝血酶抑制剂，被广泛用于治疗跌打损伤、高血压、多发性脑血栓、心肌梗塞、血栓静脉炎等疾病。其来源复杂，在我国河北、安徽、江苏、江西、湖南、湖北等地均有分布[2]。
近年来以水蛭为原料的药品及保健品日渐增多，而其野生资源却日益枯竭，导致水蛭药材及药品价格不断攀升，因此水蛭的人工养殖日趋受到重视。对医蛭Hirudo nipponia的研究国外已作了大量报道[35] ，对蚂蟥的研究则多侧重在药理和生理方面[68]，而光照对蚂蟥生长及其摄食规律的影响等有关蚂蟥人工养殖的基础性研究还未见报道。本实验在不同光强白光光照条件下，通过对蚂蟥生长及其摄食规律的实验研究，从而可为水蛭的人工养殖提供科学依据。
1 材料
1．1 试剂
蚂蟥（由大学中药材研究所提供），经郭巧生教授鉴定为蚂蟥（Whitmania pigra Whitman）。养殖用水为经充分曝气24 h以上的自来水。
0.5%淀粉溶液、DNS试剂、 FolinPhenol 试剂（Sigma公司）、0.5%干酪素、考马斯亮蓝G250（南京建成生物技术公司）、0.4 mol.L1的三氯乙酸溶液、磷酸氢二钠柠檬酸缓冲液、碳酸钠碳酸氢钠缓冲溶液、0.4 mol.L1的碳酸钠溶液、对棕榈酸硝基苯酯pNPP溶液、30%三氯乙酸、10%碳酸钠溶液、0.9%氯化钠溶液、对硝基酚溶液等。
1．2 仪器
756CRT紫外分光光度计（上海精密科学仪器有限公司）、TGL16G离心机（飞鸽）、FA1104分析天平（上海精科天平）、KQ250B超声仪（昆山市超声仪器公司）、DELTA320 型PH计（梅特勒托利多仪器有限公司）、匀浆机(宁波新芝生物科技股份有限公司)。
2 方法
2．1 试验设计
采用塑料罐（2L）进行试验，设5个白光光照梯度（见表1），每组20个重复。每个罐子投入蚂蟥20条，试验进行60 d。每日下午5：00投喂配合螺蛳，每星期换水2次，试验期间水温25±3 ℃。
表1.光照强度情况
光照组
光照强度/μmol.m2.s1
W1
33.33±4.27
W2
61.00±6.30
W3
85.00±6.75
W4
113.56±7.90
W5
136.44±8.89
2.2 测定项目
2.2.1 增重率、特定生长率、存活率的测定
增重率=（试验末平均重量－试验初平均重量）/试验初平均重量*100%；
特定生长率=（㏑(试验末平均重量)－㏑(试验初平均重量)）/试验时间*100%；
存活率=试验末条数/试验初条数*100%。
2.2.2 消化酶活力的测定[9]
蛋白酶活性测定：采用福林酚法，在37 ℃，pH3.2和pH9.2条件下，每分钟水解干酪素产生1μg酪氨酸定义为1个蛋白酶活力单位。
淀粉酶活性测定：采用 3,5二硝基水杨酸比色法，在37 ℃，pH5.2条件下，单位体积的酶量，每分钟水解淀粉生成1㎎还原糖的产量为1个淀粉酶活力单位。
脂肪酶活性测定：采用对棕榈酸硝基苯酯比色法，在37 ℃，pH8.2条件下，1 min催化释放1 μmol对硝基酚的酶量定义为 1个活力单位。
2.2.3 抗逆酶的测定
碱性磷酸酶：采用对硝基苯基磷酸二钠法[10]，在一定条件下，每分钟催化产生产生1μmolpNP酶量定义为 1个活力单位。
过氧化氢酶：采用比色法[11]，在一定条件下，每min分解1 μmol的过氧化氢为1个酶活力单位。
超氧化物歧化酶：采用连苯三酚氧化法[12]，在一定条件下，每mL反应液中，每 min 抑制连苯三酚自氧化速率达50%的酶量为一个活力单位。

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