不同营养条件对芍药根中芍药苷含量的影响
目录
摘要1
关键词1
引言1
1 材料与方法1
1.1 仪器与试剂 1
1.2 材料1
1.3 色谱条件1
1.4 对照品溶液的制备2
1.5 供试品溶液的备 2
1.5.1 样品的前期管理2
1.5.2 样品溶液的制备 2
1.6线性关系2
1.7 稳定性试验 2
1.8 重复性试验 2
1.9 回收率试验 2
2. 结果 2
2.1 同一生长期不同营养条件对芍药根中芍药苷含量影响的变化 2
2.2 不同生长期同一营养条件对芍药根中芍药苷含量影响的变化 3
3 讨论 3
致谢4
参考文献4
Abstract5
Key word5
不同营养条件对芍药根中芍药苷含量的影响
【摘要】 目的：分析芍药在不同营养条件下所含芍药苷含量变化的相关性。方法：分别划分浇灌自来水的空白组A，浇灌营养液全液组B，浇灌缺K营养液组C，浇灌缺N营养液组D。甲醇加热回流法提取芍药苷，用HPLCUV法测定，C18（4.6mm*250mm,5μm）为固定相，甲醇水（30:70）为流动相；流速：1mL?min1；检测波长：230nm；用外标法峰面积计算以上四组芍药苷含量。结果：浇灌缺N营养液的芍药根芍药苷含量最多，浇灌自来水的芍药根芍药苷含量最低。结论：初步测定缺乏N、K元素的条件在芍药开花前的阶段对芍药根中芍药苷含量的积累成正相关。
【关键词】 芍药苷；N、K缺乏
白芍为毛茛科植物芍药Paeonia lactiflora Pall.的干燥根[1]，味苦，性微寒，具有平肝止痛，养血调经，敛阴止汗之功效。现代药理研究证明，白芍具有具有抗炎、抗肿瘤、镇静、抑菌、降血糖等药理作用[2]。其化学成分主要为单萜类、三萜类、黄酮类、挥发油等[3]。其中，芍药苷(Paeoniflorin) 是一种蒎烷单萜苷，《中国药典》2010 年版一部规定白芍含量的测定方法用HPLC法，测定指标为芍药苷[4]，并规定白芍干燥品含芍药苷不 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: @351916072@
得少于1.6%。由于N、K元素的缺乏对于芍药根中芍药苷含量的影响尚未见报道，因此实验采用无土栽培和HPLCUV法测定缺乏N、K条件下的芍药苷含量，了解不同因素对芍药苷积累的影响程度。
1 材料与方法
1.1 仪器与试剂 Agilent 1120 G4288A检测仪。流动相为：甲醇（色谱醇及分析醇）、纯净水（自制）、芍药苷标准品（中国药品生物制品检定所，批号0736200934）
1.3 色谱条件 色谱柱：Kromasil C18（4.6mm*250mm,5μm）；流动相：甲醇水（30:70）；流速：1mL?min1;检测波长：230nm;柱温：室温。对照品及样品的HPLC 图见图1。
A
B
C
图1 对照品及样品的HPLC 图
A 对照品；B缺N营养液；C营养液全液
1.4 对照品溶液的制备 精确称取芍药苷标准品0.040 g用甲醇﹙色谱纯﹚溶解至100 mL容量瓶中，定容，其浓度为0.4 mgmL﹣1。
1.5 供试品溶液的制备
1.5.1 样品的准备 营养液采用Hoagland溶液，划分四个对照组，分别为空白组(A)，全营养液组(B)，大量元素缺K营养液组(C)，大量元素缺N营养液组(D)。将芍药根分别栽培至上述4个对照组中，按照计划浇灌不同溶液。11月26日进行第一次浇灌，此后每15天浇灌一次，每次每盆按照不同营养条件浇灌溶液40mL。于1月4日进行第一次取样。于4月29日进行第二次取样。
1.5.2 样品溶液的制备 称取2.3.1中的样品各3g，置于100mL锥形瓶中，加入25mL甲醇加热回流30min，倒出溶液后再进行一次提取，加入溶剂25mL加热回流30min，合并两次提取液置于50mL容量瓶，定容，摇匀，封口保存，待用。
1.6 线性关系 取标准品溶液，经微孔滤膜分别进样6 μL、8 μL、10 μL、12 μL、14 μL分别进样测定。记录色谱图，峰面积对进样量进行线性回归，其回归方程为：Y=8.1×106x－4.6×106，R2=0.9999。结果表明，上述条件下线性关系良好。
1.7 稳定性试验 取标准品溶液，在同一上分别在2 h、4 h、6 h、10 h、16 h、24 h精密吸取标准品溶液15 μL 在2.1 项色谱条件条件下测定，记录平均峰面积为115937286，RSD2.8%。
1.8 重复性试验 取空白组样品约3g，共5份，测定其RSD=0.5％。
1.9 回收率试验 取芍药苷样品溶液，加入芍药苷标准品溶液﹙0.4 mgmL﹣1﹚1 mL，用甲醇定容至10 mL，静置，按照2.1项下色谱条件，进样5 μL，测定含量，计算平均回收率为96.5%。
2. 结果与分析
2.1同一生长期不同营养条件对芍药根中芍药苷含量影响的变化
表1 第一阶段不同营养条件芍药苷含量的变化
1
mgg﹣1
2
mgg﹣1
3
mgg﹣1
平均数
mgg﹣1
水(A)
全营养液(B)
缺K营养液(C)
缺N营养液(D)
0.8
0.2184
0.128
0.131
0.14
0.2181
0.126
0.129
0.13
0.2199
0.129
0.132
0.11cC
0.2188aA
0.130bB
0.127bB
经上表可得，A组芍药苷含量最低，B组芍药苷含量最高。在新根萌发至0.5cm时对芍药根进行测定，4种不同的处理条件对芍药苷含量均有一定的正效应，尤为明显的是浇灌全营养液的B组，增长率明显较其他实验组高，增长量为0.21％；只浇灌自来水的A组芍药苷的含量增加较为缓慢，仅为0.001％；而缺K营养液C组和缺N营养液D组的增加量居中，分别为0.12％和0.13％。
表2 第二阶段不同营养条件芍药苷含量的变化
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