外源激素处理对老鸦瓣鳞茎膨大过程中保护酶活性及丙二醛含量的影响
目录
摘要1
关键词1
引言1
1材料与方法1
1.1材料处理 1
1.1.1材料1
1.1.2处理方法1
1.2实验设计 2
1.2.1丙二醛(MDA)含量的测定 2
1.2.2过氧化物酶(POD)活性的测定 2
1.2.3超氧化物歧化酶(SOD)活性的测定 2
2结果与分析2
2.1不同浓度的外源激素处理对老鸦瓣鳞茎内MDA含量的影响 2
2.2不同浓度的外源激素处理对老鸦瓣鳞茎内POD酶活性的影响 4
2.3不同浓度的外源激素处理对老鸦瓣鳞茎内SOD酶活性的影响 5
3讨论6
3.1不同浓度的外源激素处理对老鸦瓣鳞茎内MDA含量的影响 6
3.2不同浓度的外源激素处理对老鸦瓣鳞茎内保护酶系的影响6
3.3展望6
致谢6
参考文献7
Abstract8
引言
外源激素处理对老鸦瓣鳞茎膨大过程中保护酶活性
及丙二醛含量的影响
学 生 张 燕
[摘要] 目的：探究外源激素（SA、MeJA）对老鸦瓣鳞茎膨大过程中保护酶活性及丙二醛含量的影响。方法：在老鸦瓣鳞茎膨大的初期与末期取样，采用分光光度计测定各个处理的MDA含量及保护酶SOD、POD活力，并用Excel软件进行数据统计分析。结果：整体来看，外源激素SA、MeJA处理对MDA含量及SOD、POD酶活性有提高作用，但在个别浓度处理下也出现了不同应答。结论：适宜浓度的SA与MeJA能提高鳞茎内保护酶的活性；而高浓度的激素处理会提高MDA含量，对植株造成逆境损害，保护酶系也会产生一些相应防御措施。整体来说适宜浓度的SA、MeJA能提高保护酶活性，将MDA含量维持于低水平。
[关键词] 老鸦瓣；鳞茎膨大；激素；丙二醛；保护酶
老鸦瓣Tulipa edulis（Miq.）Baker．为百合科郁金香属植物，分布于江苏、安徽、浙江、 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: @351916072@
江西、湖北、湖南、辽宁、山东和陕西等省，朝鲜和日本也有分布。老鸦瓣生长期短，与郁金香、浙贝母、川贝母等同科药用植物生物学特性相似。光慈姑为其地下鳞茎，具有解毒散结，行血化瘀的功效，主治咽喉肿痛，瘰疬，痈疽，疮肿，产后瘀滞。鳞茎为地下变态茎的一种，内贮藏极为丰富的营养物质和水分。鳞茎是叶鞘基部在一定的条件下膨大而形成的。近年来由于光慈菇抗癌功效的开发利用范围不断扩大，老鸦瓣资源需求不断增大。但长久以来，光慈菇主要来源于野生，市场需求激增导致其供需矛盾日益突出，实现老鸦瓣规范化栽培成为亟待解决的问题。
目前关于老鸦瓣生物学方面的研究相对较少，仅邴其忠等对老鸦瓣栽培特性以及徐红建等对老鸦瓣光合生理进行了相应研究，关于外源激素对其鳞茎膨大期生理影响的研究鲜见报道。老鸦瓣鳞茎作为主要用药部位，研究外源激素处理对于鳞茎膨大的影响有很重要的意义。
本文通过探究外源激素水杨酸和茉莉酸甲酯处理对老鸦瓣鳞茎膨大过程中保护酶活性及丙二醛含量的影响，旨在揭示外源激素对老鸦瓣的鳞茎膨大影响规律，为实现老鸦瓣规范化种植提供依据。
1 材料与方法
1．1 材料处理
1．1．1 材料 供试材料为老鸦瓣Tulipa edulis（Miq.）Baker.鳞茎。待老鸦瓣植株地上部枯萎后收获鳞茎，选取鳞片无病虫害、鳞茎盘无损伤，平均质量 1.5g 的鳞茎，用湿沙贮藏。
1．1．2 处理方法 （1）鳞茎采收后用湿沙贮藏越夏，于2013年10月选取鳞片无病虫害、鳞茎盘无损伤，平均质量 1.5g 的鳞茎，用50%的多菌灵可湿性粉剂600倍液消毒浸泡30min后，用不同浓度的水杨酸和茉莉酸甲酯溶液浸球3h，两种溶液均设置5个水平：0mM、0.01mM、0.1mM、1.0mM、10mM。然后，定植于规格为20×30cm的花盆中，每个处理14盆，每盆10个鳞茎。花盆置于日光温室中，正常栽培管理。
（2）各处理于2014年3月用不同浓度的水杨酸和茉莉酸甲酯进行叶面喷施处理，每隔3天喷施一次，连续喷施3次。于鳞茎膨大期动态取样，在膨大初期与末期取样，共取样2次。
实验设计
1．2．1 丙二醛（MDA）含量的测定 取0.5g老鸦瓣鳞茎样品，加5% TCA 5mL，研磨后所得匀浆在3000 r/min下离心10 min。取上清液2mL，加0.67%的TBA 2mL，混合后在100 ℃水浴上煮沸30 min，冷却后再心一次。分别测定上清液在450 nm、532 nm、600 nm处的吸光度值。按公式C（μmol/L）= 6.45×（A－A）－0.56×A计算MDA浓度，再计算MDA含量（mol/gFW）= C（mol/L）×× （W=0.5g,V=4mL，V=5mL）
1．2．2 过氧化物酶(POD)活性的测定 准确称取0.5g老鸦瓣鳞茎样品，加入5mL预冷的0.05mol/L的pH5.9的磷酸缓冲液，研磨成匀浆。将匀浆全部转入10mL离心管中，4000rpm离心15min(4℃)。用于POD活性的测定。采用愈创木酚法测定。
测定的反应体系包括：2.0mL 0.05mol/L的pH5.9的磷酸缓冲液，1.0mL 2% HO，1.0mL 0.05mol/L愈创木酚和1.0mL酶液。反应体系加入酶液后,立即在470nm波长下比色，每隔12s记录1次吸光度，共记录5次，然后以每分钟内A变化0.01的酶量为一个酶活性单位(U)。最后计算POD酶活性（V=8mL，V=1ml，W=0.2g，t=3）
1．2．3 超氧化物歧化酶(SOD)活性的测定 准确称取0.5g老鸦瓣鳞茎样品，加入3mL预冷的0.05mol/L的pH5.9的磷酸缓冲液，冰浴上研磨成匀浆，转入预冷的10mL离心管中，加2mL磷酸缓冲液洗涤研钵，洗液也转入离心管中，4000rpm离心15min(4℃)。上清液即为SOD粗提液。取4支5mL指形管，2支为测定管，2支为对照管，依次加入0.05mol/L的pH5.9的磷酸缓冲液1.5mL，130mmol/L Met溶液0.3mL，100μmol/L EDTANa溶液0.3ml，20μmol/L核黄素0.3ml，酶液2ml，蒸馏水1ml，混匀后将1支对照管置于暗处，其他各管置于25℃、4000lx光照下反应20min，以不照光的对照管作空白，分别测定其他各管的吸光度。超氧化物歧化酶活性，采用己知SOD活性单位抑制NBT光还原的50%为1个酶活性单位(U)。最后计算SOD酶活性（V=8mL，V=1ml，W=0.2g）
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