金针菇锌多糖的活性评价
摘要：金针菇多糖锌多糖作为金针菇多糖成分之一，因其已表现出来的抗氧化作用等功能成为研究的热点。本文使用热水浸提法通过去蛋白、醇沉等步骤从金针菇菌丝体中分离出一种金针菇粗多糖，将金针菇粗多糖经DEAE 纤维素-52 离子交换色谱、Sephadex G-100 葡聚糖凝胶色谱分离纯化得到F 水金针菇多糖组分。同时通过分析其红外吸收光谱及测定其过氧化氢、羟自由基、超氧阴离子自由基、DPPH 的清除率评价金针菇锌多糖的体外抗氧化活性。
目录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1
1 材料与仪器工作条件2
1.1 实验材料2
1.1.1 金针菇原料的处理 2
1.1.2 主要试剂 2
1.1.3 主要仪器2
2 实验方法3
2.1 金针菇多糖的初步分离提取 3
2.1.1 金针菇粗多糖的提取3
2.1.2 去蛋白技术3
2.1.3 醇沉3
2.2 金针菇多糖的进一步分离纯化3
2.2.1 金针菇多糖DEAE 纤维素52 色谱柱分离纯化3
2.2.1.1 DEAE Cellulose52 预处理3
2.2.1.2 装柱3
2.2.1.3 多糖的DEAE Cellulose52 分离纯化与收集3
2.2.2 金针菇多糖Sephadex G100 凝胶色谱分离纯化4
2.2.2.1 Sephadex G100 的预处理4
2.2.2.2 装柱和平衡4
2.2.2.3 金针菇多糖分级纯化4
2.3 金针菇锌多糖的红外光谱分析4
2.4 金针菇锌多糖抗氧化能力测定4
2.4.1 DPPH（1,1二苯基2三硝基苯胫）自由基清除能力测定4
2.4.2 过氧化氢消除率的测定4
2.4.3 羟自由基（OH）的清除能力4
2.4.4 超氧阴离子自由基(02 )的清除作用5
3 结果与分析5
3.1 金针菇锌多糖的外观5
3.
*好棒文|www.hbsrm.com +Q: ^351916072*
2 金针菇锌多糖的红外光谱分析6
3.3 金针菇锌多糖的抗氧化的活性7
3.3.1 DPPH（1,1二苯基2三硝基苯胫）自由基清除能力测定7
3.3.2 过氧化氢消除率的测定7
3.3.3 羟自由基（OH）的清除能力8
3.3.4 超氧阴离子自由基(02 )的清除作用8
4 讨论9
4.1 实验结果的总结9
4.2 创新之处9
4.3 研究意义9
致谢11
参考文献12
金针菇锌多糖的活性评价
食品质量与安全学生 白倞怿
引言
引言
金针菇多糖在金针菇中的含量较高，在金针菇中的众多主要活性物质中研究最多的化学成分为金针菇多糖（FVP），它的单糖组分主要有葡萄糖、半乳糖、甘露糖、木糖等。据报道，已分离出的多糖既有均一多糖也有杂多糖，且结构多样。早在20世纪60年代，金针菇多糖就被日本学者Yoshioka[1]成功地分离提纯，其化学结构和生物活性也被进行了初步的探索。大冢重远[2]等也从金针菇发酵液中提取出了抗癌粘多糖KM45；Fhernanda RS等[3]研究金针菇多糖结构过程中分离出1种以半乳糖为主的杂多糖，并经GCMS（气相色谱质谱）分析得到，单糖组成为岩藻糖、甘露糖和半乳糖；而国内对此方面的研究起步较晚。近几年，我国也开始对金针菇多糖的分离、纯化、结构开始进行逐步的研究，目前已经有了很大进展。如王玉峰等[4]从金针菇菌丝体中分离纯化得到2种金针菇杂多糖，分别命名为FVP1 和FVP2。
随着科学研究的深入，金针菇已经成为营养学家们的新宠。与绝大部分蔬菜相比，金针菇的各种营养成分含量名列前茅，堪称营养宝库[5]。它富含精氨酸和赖氨酸以及多种矿物质和维生素，而且锌含量相对较高，据研究和报道显示，金针菇能够增强儿童生长和智力发育，尽管许多报道已经表明金针菇具有改善记忆力功能的作用[6,7,8]，然而金针菇中主要的改善记忆功能成分物质仍然不明确。
金针菇多糖(FVP)作为一种活性功能物质，其免疫功能也正在被挖掘。前述大冢重远[2]等从金针菇的发酵液中提取出的胞外杂多糖，对肉瘤S180和腹水瘤均有较好的抑制作用；金针菇多糖的免疫活性又被王玉峰[4]等人采用淋巴细胞转化实验进行了研究，分离纯化得到的两种金针菇多糖FVP和FVP均具有免疫增强活性，且FVP免疫活性更强。又如常春雷[9]在研究中指出，多糖可通过刺激巨噬细胞产生细胞因子而发挥抗肿瘤作用。
根据研究，金针菇多糖还能有效地降低体内血脂、预防动脉硬化、增进人体血液循环等[10]。金针菇多糖的降血脂功效首先被展开研究。占建波等人在成功提取金针菇多糖后，通过建模方式来进行降血脂的研究，最终成功建立小鼠模型，模型检测结果表明，金针菇多糖确实可以降低血脂，尤其可以明显地降低TC的含量，这为金针菇多糖在降血脂方面开辟了新的研究领域。
此外，其次金针菇多糖具有免疫调节作用， 如袁强[11]指出，金针菇多糖能使小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的降低，恢复免疫受抑小鼠的淋转功能以及NK 细胞杀伤活性， 提高免疫活性；金针菇多糖还具有保肝作用，张健[12~14]等对金针菇多糖保肝研究结果显示，多糖能显著增加小鼠原代肝细胞的活力，可使原代肝细胞培养液中ALT活性明显低于模型，说明金针菇多糖具有保护肝细胞作用。因此,可利用金针菇多糖开发多种生理活性的功能食品，它在开发新药方面也具有特殊的优势。
本实验通过现代分离手段，获得高纯度、高活性的金针菇锌多糖；测定金针菇锌多糖部分体外活性为金针菇锌多糖功能产品的开发提供初步理论依据。从而为金针菇的应用开发提供更加广阔的前景，促进整个食用菌产业的发展。
1 材料与仪器工作条件
1．1 实验材料
1．1．1 金针菇原料的处理
新鲜金针菇经晾晒至半干后，放在电热恒温鼓风干燥箱中，60℃ 鼓风烘干，然后用粉碎机将其粉碎，过60 目筛子，制得金针菇粉，置于冰箱备用。
1．1．2 主要试剂
1000μg/m Zn 标准储备液 国家标准物质中心
DEAE cellulose52 whatman 公司
Sephadex G100 SigmaAldrich 公司
PH 8.2 的TrisHcl 缓冲液；磷酸缓冲液
目录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1
1 材料与仪器工作条件2
1.1 实验材料2
1.1.1 金针菇原料的处理 2
1.1.2 主要试剂 2
1.1.3 主要仪器2
2 实验方法3
2.1 金针菇多糖的初步分离提取 3
2.1.1 金针菇粗多糖的提取3
2.1.2 去蛋白技术3
2.1.3 醇沉3
2.2 金针菇多糖的进一步分离纯化3
2.2.1 金针菇多糖DEAE 纤维素52 色谱柱分离纯化3
2.2.1.1 DEAE Cellulose52 预处理3
2.2.1.2 装柱3
2.2.1.3 多糖的DEAE Cellulose52 分离纯化与收集3
2.2.2 金针菇多糖Sephadex G100 凝胶色谱分离纯化4
2.2.2.1 Sephadex G100 的预处理4
2.2.2.2 装柱和平衡4
2.2.2.3 金针菇多糖分级纯化4
2.3 金针菇锌多糖的红外光谱分析4
2.4 金针菇锌多糖抗氧化能力测定4
2.4.1 DPPH（1,1二苯基2三硝基苯胫）自由基清除能力测定4
2.4.2 过氧化氢消除率的测定4
2.4.3 羟自由基（OH）的清除能力4
2.4.4 超氧阴离子自由基(02 )的清除作用5
3 结果与分析5
3.1 金针菇锌多糖的外观5
3.
*好棒文|www.hbsrm.com +Q: ^351916072*
2 金针菇锌多糖的红外光谱分析6
3.3 金针菇锌多糖的抗氧化的活性7
3.3.1 DPPH（1,1二苯基2三硝基苯胫）自由基清除能力测定7
3.3.2 过氧化氢消除率的测定7
3.3.3 羟自由基（OH）的清除能力8
3.3.4 超氧阴离子自由基(02 )的清除作用8
4 讨论9
4.1 实验结果的总结9
4.2 创新之处9
4.3 研究意义9
致谢11
参考文献12
金针菇锌多糖的活性评价
食品质量与安全学生 白倞怿
引言
引言
金针菇多糖在金针菇中的含量较高，在金针菇中的众多主要活性物质中研究最多的化学成分为金针菇多糖（FVP），它的单糖组分主要有葡萄糖、半乳糖、甘露糖、木糖等。据报道，已分离出的多糖既有均一多糖也有杂多糖，且结构多样。早在20世纪60年代，金针菇多糖就被日本学者Yoshioka[1]成功地分离提纯，其化学结构和生物活性也被进行了初步的探索。大冢重远[2]等也从金针菇发酵液中提取出了抗癌粘多糖KM45；Fhernanda RS等[3]研究金针菇多糖结构过程中分离出1种以半乳糖为主的杂多糖，并经GCMS（气相色谱质谱）分析得到，单糖组成为岩藻糖、甘露糖和半乳糖；而国内对此方面的研究起步较晚。近几年，我国也开始对金针菇多糖的分离、纯化、结构开始进行逐步的研究，目前已经有了很大进展。如王玉峰等[4]从金针菇菌丝体中分离纯化得到2种金针菇杂多糖，分别命名为FVP1 和FVP2。
随着科学研究的深入，金针菇已经成为营养学家们的新宠。与绝大部分蔬菜相比，金针菇的各种营养成分含量名列前茅，堪称营养宝库[5]。它富含精氨酸和赖氨酸以及多种矿物质和维生素，而且锌含量相对较高，据研究和报道显示，金针菇能够增强儿童生长和智力发育，尽管许多报道已经表明金针菇具有改善记忆力功能的作用[6,7,8]，然而金针菇中主要的改善记忆功能成分物质仍然不明确。
金针菇多糖(FVP)作为一种活性功能物质，其免疫功能也正在被挖掘。前述大冢重远[2]等从金针菇的发酵液中提取出的胞外杂多糖，对肉瘤S180和腹水瘤均有较好的抑制作用；金针菇多糖的免疫活性又被王玉峰[4]等人采用淋巴细胞转化实验进行了研究，分离纯化得到的两种金针菇多糖FVP和FVP均具有免疫增强活性，且FVP免疫活性更强。又如常春雷[9]在研究中指出，多糖可通过刺激巨噬细胞产生细胞因子而发挥抗肿瘤作用。
根据研究，金针菇多糖还能有效地降低体内血脂、预防动脉硬化、增进人体血液循环等[10]。金针菇多糖的降血脂功效首先被展开研究。占建波等人在成功提取金针菇多糖后，通过建模方式来进行降血脂的研究，最终成功建立小鼠模型，模型检测结果表明，金针菇多糖确实可以降低血脂，尤其可以明显地降低TC的含量，这为金针菇多糖在降血脂方面开辟了新的研究领域。
此外，其次金针菇多糖具有免疫调节作用， 如袁强[11]指出，金针菇多糖能使小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的降低，恢复免疫受抑小鼠的淋转功能以及NK 细胞杀伤活性， 提高免疫活性；金针菇多糖还具有保肝作用，张健[12~14]等对金针菇多糖保肝研究结果显示，多糖能显著增加小鼠原代肝细胞的活力，可使原代肝细胞培养液中ALT活性明显低于模型，说明金针菇多糖具有保护肝细胞作用。因此,可利用金针菇多糖开发多种生理活性的功能食品，它在开发新药方面也具有特殊的优势。
本实验通过现代分离手段，获得高纯度、高活性的金针菇锌多糖；测定金针菇锌多糖部分体外活性为金针菇锌多糖功能产品的开发提供初步理论依据。从而为金针菇的应用开发提供更加广阔的前景，促进整个食用菌产业的发展。
1 材料与仪器工作条件
1．1 实验材料
1．1．1 金针菇原料的处理
新鲜金针菇经晾晒至半干后，放在电热恒温鼓风干燥箱中，60℃ 鼓风烘干，然后用粉碎机将其粉碎，过60 目筛子，制得金针菇粉，置于冰箱备用。
1．1．2 主要试剂
1000μg/m Zn 标准储备液 国家标准物质中心
DEAE cellulose52 whatman 公司
Sephadex G100 SigmaAldrich 公司
PH 8.2 的TrisHcl 缓冲液；磷酸缓冲液
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