白茅根多糖性质及活性研究
目 录
1 引言 1
1.1 白茅根多糖的生物学活性 1
1.2 理化性质 2
1.3 结构鉴定 2
1.4 存在的问题与不足 3
1.5 研究的目的与意义 3
2 实验原料与设备 3
2.1 主要实验原料及试剂，设备 3
2.2 仪器与设备 4
3 试验方法 4
3.1 操作流程 4
3.2 白茅根多糖提取与纯化 6
3.3 白茅根多糖理化性质 7
3.4 白茅根多糖的抗氧化活性 8
4 结果分析与讨论 10
4.1 白茅根洗脱曲线分析 10
4.3 白茅根多糖抗氧化活性的分析 16
结论 20
致谢 21
参考文献 22
1 引言
多糖是一种聚合物。糖苷键的形成是由单糖之间脱水而成，糖苷键直链或者支链连接[1]。多糖分布广泛，动植物、海藻以及微生物等几乎所有的生物中都有多糖。除了作为生物机体的能量来源和是生物体构成原料外，多糖参与生物效应调节，是一种良好的调节剂。多糖可以用来掌握细胞的分裂，也可以控制分化，提强机体的免疫功能，控制细胞的生长和衰老。
白茅根是一禾本科草药。白茅根的根茎既可以用来散热并且促进排尿又可以凉血和止血。一般是用在急性肾炎同时也包括相应可以传染性肝炎等临床治疗。白茅根根据报道主要是三萜类的一种物质。一般来说葡萄糖的含量比较多，但是相对来说果糖以及木糖含量比较少等。根据报道白茅根的药用价值和食用价值非常大。白茅根主要的成分之一就是多糖[2]。本文结合近年白茅根多糖的研究文献，就白茅根多糖的性质与 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: ^3^5`1^9`1^6^0`7^2#
活性进行一定程度上的研究。
1.1 白茅根多糖的生物学活性
1.1.1 利尿作用
白茅根是一种味本身甘寒的植物，可以用来清除肺部和胃的热。因为它有利水作用，因此可以导热下行。特别是在发烧的时候和阴津不足，最适合食用本产品。功效类似于清肺胃的芦苇根，但芦苇根火，好清热气；白茅根既可以用来凉血又可以用来止血，一般说来主要是偏于血分。对于治乙肝大三阳转阴有着非常好的功效[3]。但白茅根对肝的副作用是非常的严重，和干扰素类型产差不多。患者使用时要谨慎，最好不要使用该产品。
1.1.2 抗肿瘤作用
多糖的抗肿瘤功能主要是因为单糖之间糖苷键的链接形式。实验表明白茅根多糖的抗肿瘤作用主要是因为糖链部分和糖链的大小。白茅根多糖可以对人肝癌细胞的增殖的起到非常好的抑制作用，在抑制作用上白茅根多糖呈现很好的剂量-时间-效应关系[4]。实验研究表明白茅根多糖对小鼠实体瘤具有显著的抑制作用。
1.1.3 抗氧化活性
实验对白茅根多糖的体外抗氧化活性进行研究。我们分别测定了还原能力、DPPH清除率、羟基自由基清除、金属螯合能力，超氧阴离子清除力5项指标来评价白茅根多糖的抗氧化活性。我们并将其并与VC和EDTA-2Na进行比较。
1.1.4 T淋巴细胞免疫调节
通过研究发现白茅根多糖有着有免疫调节效应的作用对正常人T淋巴细胞。主要是白茅根多糖可以作用于乙肝患者体内的T淋巴细胞、提高调节宿主的细胞免疫功能。这样就可以进一步达到消灭清除在宿主体内起到持续增殖致病的免疫效应的乙型肝炎病毒，让乙型肝炎患者恢复康复[5]。
1.1.5 调节血糖与血脂代谢紊乱的活性
白茅根多糖可对提高糖尿病小鼠的血脂以及血糖代谢混乱的问题有着非常好的作用。研究表明白茅根多糖可显著降低糖尿病小鼠体内的总胆固醇、低密度脂蛋白、甘油三酯 （TG）、GSP。与盐酸二甲双胍相当，可以升高糖尿病小鼠的肝糖原水平，也会升高小鼠体内的高密度脂蛋白的这种水平。白茅根多糖对糖尿病小鼠糖脂代谢紊乱的活性可以非常好地调节。
1.1.6 抗辐射功能
白茅根多糖可以作用于免疫器官并产生相应的抗辐射功能，与阳性药物盐酸胱胺的有效程度接近。一般认为多糖的抗辐射机理是提高机体对辐射的耐受性，可以通过清除自由基、强化造血系统的功能，一般也会起到活化吞噬细胞的作用。
1.2 理化性质
多糖的理化性质除了包括总糖、分子量测定、蛋白质。也包括糖醛酸、单糖的组成、粘度等理化性质[6]。一般来说与多糖的生理活性非常密切联系的是多糖的理化性质。对多糖结构进行测定是对多糖的理化性质测定与分析的前提。多糖的活性和它的结构非常有规则地和理化性质联系在一起。并且这两种因素是在一起作用影响多糖活性的。理化性质是由结构决定的。所以，我们在研究多糖结构与效应联系的时候，除了分开研究影响对多糖生物活性的这些各级物理化学性质和结构分别的影响外，还要研究对多糖活性产生的综合效应的每一种因素之间的互相影响。
1.3 结构鉴定
一级结构、二级结构和及其以上的高级结构一般认为是多糖的糖链结构，多糖结构研究的基础是一级结构。需要弄清楚肽链，脂类这种非糖部分的连接方式。以及糖残基种类、摩尔分子比、分支点上糖残基 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: ^3^5`1^9`1^6^0`7^2#
构型、分子质量、糖环类型、糖链等相关的问题才可以很清楚地知道多糖糖链结构。了解多糖一级结构我们可以参考的方法一般包括红外光谱，紫外光谱，液相色谱[7]。以及甲基化反应等有关化学方法。免疫学法和生物学方法也可以。
1.4 存在的问题与不足
虽然许多新型的质谱检测技术和电泳技术如毛细管电泳、基质辅助激光解析质谱、荧光辅助电泳技术等非常广泛地应用于多糖的纯度和结构测定中，但是因为多糖的复杂性是非常高和不均一性也是非常强的，所以对多糖结构的考察仍旧是今后研究的难点之一。
无论我们从天然资源中提取分离先关的产品，或者利用化学法去进行提取或酶法制备，都需要一个快速连续的方法体系，当然成本不能高的方法来生产多糖药物或者是去生产一些比较好的保健食品。这样才能满足市场需求和生物学、临床研究的需要。
目前虽然已经证明多糖可以明显提高体内和体外的细胞免疫和体液免疫。以及对肿瘤细胞的增殖和迁移有非常好地抑制作用。但是一些关键问题如多糖为何具有选择性，为何只抑制肿瘤细胞生长而不作用正常细胞生长以及其抗肿瘤机制等仍尚未完全研究清楚。此外，如何解决一些问题如多糖类药物口服给药利用度差、血液清除速度快。并且如何通过建立合理、有效的评价模型来确定多糖类药物的安全性和这种药物的有效性，这些都是今后的主要研究方向。
1.5 研究的目的与意义
白茅根类药物已应用于临床主要是作为抗肿瘤、增强免疫活性药物，具有很小的毒副作用等特点。实验将通过测定粗多糖及纯化样品的清除自由基中的DPPH、还原力、也需要测定超氧阴离子清除活性、也包括以及测定羟基自由基清除能力进行体外的抗氧化活性的评价。金属离子螯合能力也是抗氧化活性指标之一。测定白茅根多糖的理化性质结构，与抗氧化活性。
2 实验原料与设备
2.1 主要实验原料及试剂，设备
2.1.1 主要实验原料
白茅根
2.1.2 主要实验试剂
结 论
1、白茅根多糖提取水料比1：20，提取次数2次，提取温度90℃，时间5 h。
1 引言 1
1.1 白茅根多糖的生物学活性 1
1.2 理化性质 2
1.3 结构鉴定 2
1.4 存在的问题与不足 3
1.5 研究的目的与意义 3
2 实验原料与设备 3
2.1 主要实验原料及试剂，设备 3
2.2 仪器与设备 4
3 试验方法 4
3.1 操作流程 4
3.2 白茅根多糖提取与纯化 6
3.3 白茅根多糖理化性质 7
3.4 白茅根多糖的抗氧化活性 8
4 结果分析与讨论 10
4.1 白茅根洗脱曲线分析 10
4.3 白茅根多糖抗氧化活性的分析 16
结论 20
致谢 21
参考文献 22
1 引言
多糖是一种聚合物。糖苷键的形成是由单糖之间脱水而成，糖苷键直链或者支链连接[1]。多糖分布广泛，动植物、海藻以及微生物等几乎所有的生物中都有多糖。除了作为生物机体的能量来源和是生物体构成原料外，多糖参与生物效应调节，是一种良好的调节剂。多糖可以用来掌握细胞的分裂，也可以控制分化，提强机体的免疫功能，控制细胞的生长和衰老。
白茅根是一禾本科草药。白茅根的根茎既可以用来散热并且促进排尿又可以凉血和止血。一般是用在急性肾炎同时也包括相应可以传染性肝炎等临床治疗。白茅根根据报道主要是三萜类的一种物质。一般来说葡萄糖的含量比较多，但是相对来说果糖以及木糖含量比较少等。根据报道白茅根的药用价值和食用价值非常大。白茅根主要的成分之一就是多糖[2]。本文结合近年白茅根多糖的研究文献，就白茅根多糖的性质与 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: ^3^5`1^9`1^6^0`7^2#
活性进行一定程度上的研究。
1.1 白茅根多糖的生物学活性
1.1.1 利尿作用
白茅根是一种味本身甘寒的植物，可以用来清除肺部和胃的热。因为它有利水作用，因此可以导热下行。特别是在发烧的时候和阴津不足，最适合食用本产品。功效类似于清肺胃的芦苇根，但芦苇根火，好清热气；白茅根既可以用来凉血又可以用来止血，一般说来主要是偏于血分。对于治乙肝大三阳转阴有着非常好的功效[3]。但白茅根对肝的副作用是非常的严重，和干扰素类型产差不多。患者使用时要谨慎，最好不要使用该产品。
1.1.2 抗肿瘤作用
多糖的抗肿瘤功能主要是因为单糖之间糖苷键的链接形式。实验表明白茅根多糖的抗肿瘤作用主要是因为糖链部分和糖链的大小。白茅根多糖可以对人肝癌细胞的增殖的起到非常好的抑制作用，在抑制作用上白茅根多糖呈现很好的剂量-时间-效应关系[4]。实验研究表明白茅根多糖对小鼠实体瘤具有显著的抑制作用。
1.1.3 抗氧化活性
实验对白茅根多糖的体外抗氧化活性进行研究。我们分别测定了还原能力、DPPH清除率、羟基自由基清除、金属螯合能力，超氧阴离子清除力5项指标来评价白茅根多糖的抗氧化活性。我们并将其并与VC和EDTA-2Na进行比较。
1.1.4 T淋巴细胞免疫调节
通过研究发现白茅根多糖有着有免疫调节效应的作用对正常人T淋巴细胞。主要是白茅根多糖可以作用于乙肝患者体内的T淋巴细胞、提高调节宿主的细胞免疫功能。这样就可以进一步达到消灭清除在宿主体内起到持续增殖致病的免疫效应的乙型肝炎病毒，让乙型肝炎患者恢复康复[5]。
1.1.5 调节血糖与血脂代谢紊乱的活性
白茅根多糖可对提高糖尿病小鼠的血脂以及血糖代谢混乱的问题有着非常好的作用。研究表明白茅根多糖可显著降低糖尿病小鼠体内的总胆固醇、低密度脂蛋白、甘油三酯 （TG）、GSP。与盐酸二甲双胍相当，可以升高糖尿病小鼠的肝糖原水平，也会升高小鼠体内的高密度脂蛋白的这种水平。白茅根多糖对糖尿病小鼠糖脂代谢紊乱的活性可以非常好地调节。
1.1.6 抗辐射功能
白茅根多糖可以作用于免疫器官并产生相应的抗辐射功能，与阳性药物盐酸胱胺的有效程度接近。一般认为多糖的抗辐射机理是提高机体对辐射的耐受性，可以通过清除自由基、强化造血系统的功能，一般也会起到活化吞噬细胞的作用。
1.2 理化性质
多糖的理化性质除了包括总糖、分子量测定、蛋白质。也包括糖醛酸、单糖的组成、粘度等理化性质[6]。一般来说与多糖的生理活性非常密切联系的是多糖的理化性质。对多糖结构进行测定是对多糖的理化性质测定与分析的前提。多糖的活性和它的结构非常有规则地和理化性质联系在一起。并且这两种因素是在一起作用影响多糖活性的。理化性质是由结构决定的。所以，我们在研究多糖结构与效应联系的时候，除了分开研究影响对多糖生物活性的这些各级物理化学性质和结构分别的影响外，还要研究对多糖活性产生的综合效应的每一种因素之间的互相影响。
1.3 结构鉴定
一级结构、二级结构和及其以上的高级结构一般认为是多糖的糖链结构，多糖结构研究的基础是一级结构。需要弄清楚肽链，脂类这种非糖部分的连接方式。以及糖残基种类、摩尔分子比、分支点上糖残基 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: ^3^5`1^9`1^6^0`7^2#
构型、分子质量、糖环类型、糖链等相关的问题才可以很清楚地知道多糖糖链结构。了解多糖一级结构我们可以参考的方法一般包括红外光谱，紫外光谱，液相色谱[7]。以及甲基化反应等有关化学方法。免疫学法和生物学方法也可以。
1.4 存在的问题与不足
虽然许多新型的质谱检测技术和电泳技术如毛细管电泳、基质辅助激光解析质谱、荧光辅助电泳技术等非常广泛地应用于多糖的纯度和结构测定中，但是因为多糖的复杂性是非常高和不均一性也是非常强的，所以对多糖结构的考察仍旧是今后研究的难点之一。
无论我们从天然资源中提取分离先关的产品，或者利用化学法去进行提取或酶法制备，都需要一个快速连续的方法体系，当然成本不能高的方法来生产多糖药物或者是去生产一些比较好的保健食品。这样才能满足市场需求和生物学、临床研究的需要。
目前虽然已经证明多糖可以明显提高体内和体外的细胞免疫和体液免疫。以及对肿瘤细胞的增殖和迁移有非常好地抑制作用。但是一些关键问题如多糖为何具有选择性，为何只抑制肿瘤细胞生长而不作用正常细胞生长以及其抗肿瘤机制等仍尚未完全研究清楚。此外，如何解决一些问题如多糖类药物口服给药利用度差、血液清除速度快。并且如何通过建立合理、有效的评价模型来确定多糖类药物的安全性和这种药物的有效性，这些都是今后的主要研究方向。
1.5 研究的目的与意义
白茅根类药物已应用于临床主要是作为抗肿瘤、增强免疫活性药物，具有很小的毒副作用等特点。实验将通过测定粗多糖及纯化样品的清除自由基中的DPPH、还原力、也需要测定超氧阴离子清除活性、也包括以及测定羟基自由基清除能力进行体外的抗氧化活性的评价。金属离子螯合能力也是抗氧化活性指标之一。测定白茅根多糖的理化性质结构，与抗氧化活性。
2 实验原料与设备
2.1 主要实验原料及试剂，设备
2.1.1 主要实验原料
白茅根
2.1.2 主要实验试剂
结 论
1、白茅根多糖提取水料比1：20，提取次数2次，提取温度90℃，时间5 h。
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