腊树肠多糖的体外消化特性的研究

本实验通过水提醇沉的方法得到较为纯净的腊树肠多糖,并建立口腔、胃和小肠体外模拟消化系统对此多糖进行消化,通过DNS法测定还原糖含量以及高效液相色谱测定消化后多糖的分子质量的方法来推测腊树肠多糖的消化情况。结果表明腊树肠多糖是一类酸性多糖,在模拟胃液中消化中会产生一定的絮凝沉淀,可能是由于胃中的酸性环境导致多糖的空间构型和稳定性有所变化,该多糖在模拟口腔、模拟胃液、模拟肠液中多糖分子量和还原糖含量均没有显著变化,由此推断腊树肠多糖在体外不会被口腔、胃及小肠消化。
目录
摘要3
关键词3
Abstract3
Key words3
绪论3
1材料与方法4
1.1材料 4
1.2方法 4
1.2.1提取工艺4
1.2.2提取要点5
1.2.3体外消化液配制5
1.2.4体外消化5
1.2.5 DNS测还原糖 5
1.2.6 色谱条件. 5
1.2.7 数据分析软件 5
2结果与分析6
2.1多糖基本理化性质 6
2.2 多糖消化液分子量分析 6
2.3DNS法测消化液还原糖量 6
3讨论 9
致谢10
参考文献10
腊树肠多糖的体外消化特性的研究
引言
绪论:近些年来,多糖开始逐渐出现在人们的研究领域中。人们研究发现多糖参与细胞多种生命现象的调节,比如免疫细胞之间信息的传递,这与细胞膜表面的多糖的介导有密切的关系[13]。大量的药理和临床研究表明,多糖类化合物是一类免疫调节剂,它能够激活免疫细胞,提高机体的免疫功能,而对正常细胞无毒副作用[45]。多糖还具有抗病毒活性,比如艾滋病毒、巨细胞病毒、流感病毒、囊状胃炎病毒、劳斯肉瘤病毒、鸟肉瘤病毒、牛艾滋病毒等[610]。多糖还具有保护骨关节的功效,汪巍[11]等研究了甘草多糖腔内注射对大鼠骨关节的影响,分别对3组大鼠注射生理盐水、甘草多糖溶液、硫酸氨基葡萄糖, 根据观察关节软骨Mankins评分、血清和关节滑膜中MDA含量、SOD活性来测定关节软骨中糖胺多糖含 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: &351916072& 
量。结果表明注射甘草多糖的大鼠骨关节炎软骨的形态结构有明显改善,表明甘草多糖对骨关节炎软骨具有一定的保护作用。除了治疗疾病,多糖还具有美容的效果,Shimomura等从甲壳类动物的肉类降解产物中得到一种具有美容功效的酸性多糖。实验证明,此酸性多糖可抑制延缓衰老的透明质酸的分解,减少皮肤细纹和干裂,因而可作为美容食品和化妆品的有效成分,且其副作用小。薛德军等[12]研究发现,肉苁蓉能延缓皮肤衰老,增加动物羟脯氨酸的含量,胶原蛋白含量增加,皮肤弹性增加,降低体内脂褐质的堆积。
多糖是一类重要的生物活性大分子物质,广泛存在于植物中。目前从天然产物中已有三百多种多糖类化合物被分离提取出来[13]。其中尤其是从中药中提取的水溶性多糖更为重要,这类多糖已经成为新药的发展方向之一[14]。越来越多的研究证明多糖具有复杂的生物活性,可以说,多糖的大多数生物活性和功能方面都和免疫系统有关系,多糖的研究跟蛋白质、核酸等相比较晚,但经过这些年对多糖的功能的挖掘和探究,其重要的生理功能引起人们越来越多的兴趣。目前,各国都在利用先进的仪器和技术从植物、微生物、海洋生物中寻找对肿瘤等疾病有帮助的多糖或其衍生药物,与此同时也进行对多糖空间结构和作用机理的探究,到现在为止,研究的比较多的天然多糖有高等真菌产生的葡聚糖和某些植物产生的果胶类的多糖,还有海洋藻类产生的硫酸酯多糖类。具有相当广阔的应用前景。
腊树肠来自于植物牛角树,苏木亚科属,是泰国国花,原产于东南亚南部。分布在巴基斯坦南部、缅甸以及中国南部、西南部等地,生长于海拔一千米的地区。具有润便,开通阻滞的作用[15]。
为了研究物质在体内的消化,体外消化可以在某种程度上显示该物质在体内的变化情况。体外消化模拟系统是通过模拟动物消化的生理特点,采用与动物体内类似的消化酶系和环境,在体外评定物质消化吸收的一种方法。他的优点是:试验条件可控,干扰因素少,消耗少,重现性好,试验时间短,成本低[16]。但是体外模拟消化技术是非生理状态下的仪器去检测,其准确性还需通过体内的试验加以验证[17]。体外消化后的食物,活性物质在各种酶的干扰下,转化成不同的结构形式,因此具有不同的化学性质[18]。营养素和植物化学物质在体内消化吸收受食物基质的物理性质、酶、身体的化学消化效率等因素的影响[19]。经胃肠消化后,食物中的抗氧化活性成分及其活力可能会发生变化,这些结果在以前的报道中均有研究[20]。生物活性物质在体内的消化吸收和代谢过程非常复杂,国内外已经有许多体内外研究。体内的研究是直接通过对人体或动物的尿液、血液或粪便分析其中的活性物质[21]。但是分析浓度非常低环境干扰较高,体内研究既费时又困难,所以采用体外模拟胃肠消化模型评价食物的抗氧化。由于研究的多糖的不同,多糖体外消化模型之间会存在一定差异[2223]。多糖体外的消化模型主要是通过对多糖消化产物的还原糖含量、分子质量、单糖的组成、小分子物质的产生以及物理性状等方面来研究多糖体外消化的结果[24]。
为了探究腊树肠多糖消化后的情况,本实验采用高效液相色谱法和DNS分别测定消化前后消化液中多糖分子量和还原糖变化。高效液相色谱法测多糖具有许多优点,如分辩率高于其它色谱法;速度快,十几分钟到几十分钟可完成;重复性高;高效相色谱柱可反复使用;自动化操作,节省时间,分析精确度高。但只使用高效液相色谱法不足以说明腊树肠多糖的消化问题,本实验还采用DNS法测定腊树肠多糖消化后的产物的还原糖含量与高效液相色谱的结果一起进行对比与分析,DNS法试剂稳定性好,可存放长达一年之久,操作简单,灵明度高,结果准确且应用广泛。
目前,对于腊树肠多糖的研究甚少,尚未有对腊树肠多糖的体外消化的研究报道,而研究腊树肠多糖的消化对了解腊树肠多糖发挥的功能机理有重要的作用,同时为腊树肠多糖的功能特性研究提供一些思路和依据。本实验运用体外消化模拟系统来研究腊树肠多糖的消化特性。
材料与方法
1.1材料

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