罗布麻茶黄酮化合物提取条件优化研究
罗布麻茶黄酮化合物提取条件优化研究[20200509190533]
摘要：大量药理实验表明总黄酮是罗布麻茶的主要活性成分之一，罗布麻茶中的多种黄酮化合物具有抗氧化,降压降脂等多重生理和药理活性。本研究以罗布麻茶为对象，以总黄酮含量为研究指标，利用单因素实验对其黄酮提取参数进行初步筛选, 包括氧化钠浓度、料液比、提取温度和提取时间。在单因素实验的基础上，通过正交试验优化了罗布麻茶中总黄酮提取的最佳条件，研究结果表明：总黄酮的最佳提取参数为氢氧化钠浓度为4.5mol/L、料液比为1：12、提取温度为65℃、提取时间为80min，该研究为深入研究罗布麻的黄酮化合物的分离与纯化奠定了基础。
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关键字:罗布麻茶；黄酮；正交试验；工艺优化
目录
摘要 1
关键词 1
Abstrac 1
Key words 1
前言 1
1 材料与方法 2
1.1材料 2
1.2实验方法 2
1.2.1标准曲线的制备 2
1.2.2罗布麻茶总黄酮的测定 3
1.2.3单因素及正交试验设计 3
2结果与分析 3
2.1单因素实验 3
2.1.1不同溶剂对黄酮提取效果的影响 3
2.1.2不同氢氧化钠浓度对黄酮提取的影响 4
2.1.3不同提取时间对黄酮提取的影响 4
2.1.4不同料液比对黄酮提取的影响 5
2.1.5不同提取温度对黄酮提取的影响 5
2.2正交实验 6
2.2.1黄酮提取正交实验设计 6
2.2.2黄酮提取正交表及实验结果均值极差分析 6
2.2.3黄酮提取最佳工艺确定 7
2.3验证试验 8
2.4讨论与分析 8
3结论 9
致谢 9
参考文献： 9
罗布麻茶黄酮化合物的提取条件优化研究
引言
前言
罗布麻又称夹竹桃麻,野麻,茶叶花，为夹竹桃科多年生草本植物由它的叶制成的药茶,能够降血压，防治气管炎和感冒，还具有抗辐射,抗衰老等功能.因此罗布麻茶作为一种极具开发潜力的天然保健茶而日益受到人们的关注。含有黄酮甙、强心甙类，芸香甙类，多种氨基酸，槲皮素以及钾、钙、铁、锌等多种微量元素[1]。具有清热利尿、平肝安神、镇咳平喘、降血压、降血脂；抗炎、抗过敏等功能；用于治疗高血压、冠心病、颈椎 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: ￥3^5`1^9`1^6^0`7^2$
病、失眠.肾炎浮肿、便秘.神经衰弱、更年期综合症等疾病；具有抗癌、抗过敏等功能。
大自然罗布麻茶符合国际非药物绿色降压标准。其作用机理是：一方面，药用成份总黄酮可迅速降低血脂、血粘、减轻心脏负担，打通堵塞，有效剥离附着在血管壁上的血脂，将多余的血脂通过大量的深色尿液排出体外。另一方面，芸香甙等有效成份能够清除血管壁钙质重金属和化学药物代谢毒素等血液垃圾，补钾排钠，软化血管，恢复血管壁弹性。起到了平衡人体血压血脂之功效。现代药理学研究发现，罗布麻在改善眩晕心悸、失眠疗效显著，奏效快，尤其令人惊奇的是不会降低血压的调节作用，这一特点是其他降压药所没有的[2]。罗布麻茶加入少量的糖和桔皮，可大大改善气味和可口感。罗布麻茶特别适用于“五高”人群患者：即高血压、高血糖、高血脂、高血粘、高体重人士；办公室疲劳症、烟酒综合症、更年期综合症、亚健康及有“将军肚”的人士。 罗布麻茶同时还对便秘、失眠、神经衰弱、月经紊乱、抗疲劳等有独特的食疗效果。强心利尿对糖尿病有辅助治疗，罗布麻茶还有抗菌、抗病毒、消炎的定痛作用。
罗布麻叶主要物质成分含黄酮甙、酸性物质，有机酸，氨基酸，多糖甙，鞣质，甾醇，甾体皂甙元和三萜类物质。
（1）黄酮类：有芸香甙、槲皮素、异槲皮素，新异芸香甙、金丝桃甙。
（2）有机酸类：有延胡素酸、琥珀酸、绿原酸、混合长链脂肪酸。
（3）醇类：有D.（－）β-婆罗醇、-谷甾醇、羽扇豆醇、正十三烷醇、β-香树精、中肌醇。
（4）其他：正二十九烷，蔗糖，儿茶素，蒽醌，谷氨酸，氯化钾，别外含有微量元素钾、钙、锰、铁、镁、锌、硒、锶、溴等[3]。
大量的药理实验证明总黄酮是罗布麻叶的主要活性成分之一,具有抗氧化,降压降脂等多重生理和药理活性。因此总黄酮含量也就成为目前检测罗布麻保健茶品质的关键指标。本研究以罗布麻茶为对象，以总黄酮含量为研究指标，在单因素试验的基础上，采用碱提取酸沉淀法测定了罗布麻茶中总黄酮的含量,利用单因素和正交实验对其黄酮提取参数进行优化，该研究旨在为深入研究罗布麻的黄酮化合物的分离与纯化奠定基础。
1 材料与方法
1.1材料
1.1.1原料：罗布麻茶产自新疆，经搅拌机磨碎作待测样品。
1.1.2试剂：蒸馏水，无水乙醇，槲皮素，氢氧化钾，乙酸钾，甲醇，丙酮，乙酸乙酯，氯仿，石油醚等，三氯化铝盐酸。
1.1.3主要仪器：HH系列数显恒温水浴锅，KF3102电子天平，HR2084飞利浦搅拌机，722S分光光度计。
1.2实验方法
1.2.1标准曲线的制备
槲皮素标准曲线的制作：精确称取0.5 g槲皮素，溶解于80%乙醇中，依次稀释成10.0,20.0,30.0,40.0,50.0,60.0,80.0,100.0 μg/ml的标准或样品溶液。吸取0.5 ml标准溶液，加入1.5ml95%乙醇，0.1 ml 10% AlCl3，0.1 ml 1 mol/L乙酸钾，2.8ml蒸馏水混匀，在室温下静置30 min后，在415 nm处测定吸光度值，每个样品平行测定三次。空白用蒸馏水代替槲皮素溶液[4]。得到槲皮素的标准曲线方程y=0.0031x-0.0078,(R2=0.9955)，式中，x为槲皮素溶液浓度（μg /ml）± SD，y为样品的 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: ￥3^5`1^9`1^6^0`7^2$
吸光度。如图所示（见图1）
图1 槲皮素标准曲线
1.2.2罗布麻茶总黄酮的测定
准确称取0.5g样品，用甲醇提取，抽滤得滤渣，加入浓度为2N的氢氧化钠10ml得到水解液，中和后按照标准曲线制作方法测定。
1.2.3单因素及正交试验设计
单因素实验主要有不同溶剂对黄酮提取效果的影响，不同氢氧化钠浓度对黄酮提取效果的影响，不同提取时间对黄酮提取效果的影响，不同料液比对黄酮提取效果的影响和不同提取温度对黄酮提取效果的影响[5]。
正交实验通过对乙醇提取法提取工艺中氢氧化钠浓度、料液比、提取温度，提取时间等影响罗布麻茶中总黄酮提取量的因素进行正交实验,确定最佳的工艺参数[6]。
2结果与分析
2.1单因素实验
2.1.1不同溶剂对黄酮提取效果的影响
准确称取6份（0.5g）罗布麻茶样品，分别用石油醚，氯仿，乙酸乙酯，丙酮，甲醇，水溶解至25ml。一小时后测定其黄酮含量。结果见图2.
图2 不同溶剂下黄酮含量
结果表明(图2)，黄酮在甲醇溶剂下溶解率最高，由极性可知水>甲醇>丙酮>乙酸乙酯>氯仿>石油醚，由于水不是有机溶剂，所以可以得到黄酮在极性越大的有机溶剂下溶解率最大。因此选用甲醇作为溶剂[7]。
2.1.2不同氢氧化钠浓度对黄酮提取的影响
3 4.5 80 65 1:18
2.2.2黄酮提取正交表及实验结果均值极差分析
表2 黄酮提取正交表及实验结果分析表
因素 A B C D 结果(mg/g)
实验1 1 1 1 1 11.74
实验2 1 2 2 2 9.65
实验3 1 3 3 3 12.71
实验4 2 1 2 3 10.77
实验5 2 2 3 1 21.2
实验6 2 3 1 2 17.06
摘要：大量药理实验表明总黄酮是罗布麻茶的主要活性成分之一，罗布麻茶中的多种黄酮化合物具有抗氧化,降压降脂等多重生理和药理活性。本研究以罗布麻茶为对象，以总黄酮含量为研究指标，利用单因素实验对其黄酮提取参数进行初步筛选, 包括氧化钠浓度、料液比、提取温度和提取时间。在单因素实验的基础上，通过正交试验优化了罗布麻茶中总黄酮提取的最佳条件，研究结果表明：总黄酮的最佳提取参数为氢氧化钠浓度为4.5mol/L、料液比为1：12、提取温度为65℃、提取时间为80min，该研究为深入研究罗布麻的黄酮化合物的分离与纯化奠定了基础。
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关键字:罗布麻茶；黄酮；正交试验；工艺优化
目录
摘要 1
关键词 1
Abstrac 1
Key words 1
前言 1
1 材料与方法 2
1.1材料 2
1.2实验方法 2
1.2.1标准曲线的制备 2
1.2.2罗布麻茶总黄酮的测定 3
1.2.3单因素及正交试验设计 3
2结果与分析 3
2.1单因素实验 3
2.1.1不同溶剂对黄酮提取效果的影响 3
2.1.2不同氢氧化钠浓度对黄酮提取的影响 4
2.1.3不同提取时间对黄酮提取的影响 4
2.1.4不同料液比对黄酮提取的影响 5
2.1.5不同提取温度对黄酮提取的影响 5
2.2正交实验 6
2.2.1黄酮提取正交实验设计 6
2.2.2黄酮提取正交表及实验结果均值极差分析 6
2.2.3黄酮提取最佳工艺确定 7
2.3验证试验 8
2.4讨论与分析 8
3结论 9
致谢 9
参考文献： 9
罗布麻茶黄酮化合物的提取条件优化研究
引言
前言
罗布麻又称夹竹桃麻,野麻,茶叶花，为夹竹桃科多年生草本植物由它的叶制成的药茶,能够降血压，防治气管炎和感冒，还具有抗辐射,抗衰老等功能.因此罗布麻茶作为一种极具开发潜力的天然保健茶而日益受到人们的关注。含有黄酮甙、强心甙类，芸香甙类，多种氨基酸，槲皮素以及钾、钙、铁、锌等多种微量元素[1]。具有清热利尿、平肝安神、镇咳平喘、降血压、降血脂；抗炎、抗过敏等功能；用于治疗高血压、冠心病、颈椎 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: ￥3^5`1^9`1^6^0`7^2$
病、失眠.肾炎浮肿、便秘.神经衰弱、更年期综合症等疾病；具有抗癌、抗过敏等功能。
大自然罗布麻茶符合国际非药物绿色降压标准。其作用机理是：一方面，药用成份总黄酮可迅速降低血脂、血粘、减轻心脏负担，打通堵塞，有效剥离附着在血管壁上的血脂，将多余的血脂通过大量的深色尿液排出体外。另一方面，芸香甙等有效成份能够清除血管壁钙质重金属和化学药物代谢毒素等血液垃圾，补钾排钠，软化血管，恢复血管壁弹性。起到了平衡人体血压血脂之功效。现代药理学研究发现，罗布麻在改善眩晕心悸、失眠疗效显著，奏效快，尤其令人惊奇的是不会降低血压的调节作用，这一特点是其他降压药所没有的[2]。罗布麻茶加入少量的糖和桔皮，可大大改善气味和可口感。罗布麻茶特别适用于“五高”人群患者：即高血压、高血糖、高血脂、高血粘、高体重人士；办公室疲劳症、烟酒综合症、更年期综合症、亚健康及有“将军肚”的人士。 罗布麻茶同时还对便秘、失眠、神经衰弱、月经紊乱、抗疲劳等有独特的食疗效果。强心利尿对糖尿病有辅助治疗，罗布麻茶还有抗菌、抗病毒、消炎的定痛作用。
罗布麻叶主要物质成分含黄酮甙、酸性物质，有机酸，氨基酸，多糖甙，鞣质，甾醇，甾体皂甙元和三萜类物质。
（1）黄酮类：有芸香甙、槲皮素、异槲皮素，新异芸香甙、金丝桃甙。
（2）有机酸类：有延胡素酸、琥珀酸、绿原酸、混合长链脂肪酸。
（3）醇类：有D.（－）β-婆罗醇、-谷甾醇、羽扇豆醇、正十三烷醇、β-香树精、中肌醇。
（4）其他：正二十九烷，蔗糖，儿茶素，蒽醌，谷氨酸，氯化钾，别外含有微量元素钾、钙、锰、铁、镁、锌、硒、锶、溴等[3]。
大量的药理实验证明总黄酮是罗布麻叶的主要活性成分之一,具有抗氧化,降压降脂等多重生理和药理活性。因此总黄酮含量也就成为目前检测罗布麻保健茶品质的关键指标。本研究以罗布麻茶为对象，以总黄酮含量为研究指标，在单因素试验的基础上，采用碱提取酸沉淀法测定了罗布麻茶中总黄酮的含量,利用单因素和正交实验对其黄酮提取参数进行优化，该研究旨在为深入研究罗布麻的黄酮化合物的分离与纯化奠定基础。
1 材料与方法
1.1材料
1.1.1原料：罗布麻茶产自新疆，经搅拌机磨碎作待测样品。
1.1.2试剂：蒸馏水，无水乙醇，槲皮素，氢氧化钾，乙酸钾，甲醇，丙酮，乙酸乙酯，氯仿，石油醚等，三氯化铝盐酸。
1.1.3主要仪器：HH系列数显恒温水浴锅，KF3102电子天平，HR2084飞利浦搅拌机，722S分光光度计。
1.2实验方法
1.2.1标准曲线的制备
槲皮素标准曲线的制作：精确称取0.5 g槲皮素，溶解于80%乙醇中，依次稀释成10.0,20.0,30.0,40.0,50.0,60.0,80.0,100.0 μg/ml的标准或样品溶液。吸取0.5 ml标准溶液，加入1.5ml95%乙醇，0.1 ml 10% AlCl3，0.1 ml 1 mol/L乙酸钾，2.8ml蒸馏水混匀，在室温下静置30 min后，在415 nm处测定吸光度值，每个样品平行测定三次。空白用蒸馏水代替槲皮素溶液[4]。得到槲皮素的标准曲线方程y=0.0031x-0.0078,(R2=0.9955)，式中，x为槲皮素溶液浓度（μg /ml）± SD，y为样品的 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: ￥3^5`1^9`1^6^0`7^2$
吸光度。如图所示（见图1）
图1 槲皮素标准曲线
1.2.2罗布麻茶总黄酮的测定
准确称取0.5g样品，用甲醇提取，抽滤得滤渣，加入浓度为2N的氢氧化钠10ml得到水解液，中和后按照标准曲线制作方法测定。
1.2.3单因素及正交试验设计
单因素实验主要有不同溶剂对黄酮提取效果的影响，不同氢氧化钠浓度对黄酮提取效果的影响，不同提取时间对黄酮提取效果的影响，不同料液比对黄酮提取效果的影响和不同提取温度对黄酮提取效果的影响[5]。
正交实验通过对乙醇提取法提取工艺中氢氧化钠浓度、料液比、提取温度，提取时间等影响罗布麻茶中总黄酮提取量的因素进行正交实验,确定最佳的工艺参数[6]。
2结果与分析
2.1单因素实验
2.1.1不同溶剂对黄酮提取效果的影响
准确称取6份（0.5g）罗布麻茶样品，分别用石油醚，氯仿，乙酸乙酯，丙酮，甲醇，水溶解至25ml。一小时后测定其黄酮含量。结果见图2.
图2 不同溶剂下黄酮含量
结果表明(图2)，黄酮在甲醇溶剂下溶解率最高，由极性可知水>甲醇>丙酮>乙酸乙酯>氯仿>石油醚，由于水不是有机溶剂，所以可以得到黄酮在极性越大的有机溶剂下溶解率最大。因此选用甲醇作为溶剂[7]。
2.1.2不同氢氧化钠浓度对黄酮提取的影响
3 4.5 80 65 1:18
2.2.2黄酮提取正交表及实验结果均值极差分析
表2 黄酮提取正交表及实验结果分析表
因素 A B C D 结果(mg/g)
实验1 1 1 1 1 11.74
实验2 1 2 2 2 9.65
实验3 1 3 3 3 12.71
实验4 2 1 2 3 10.77
实验5 2 2 3 1 21.2
实验6 2 3 1 2 17.06
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