鸡蛋膜蛋白多肽的钙螯合作用研究

摘要:为了探究鸡蛋膜及其水解物对钙离子的螯合作用,本实验通过单因素实验及EDTA滴定法确定了鸡蛋膜及其水解物螯合钙离子的最佳螯合工艺条件。实验所测得的鸡蛋膜-钙螯合复合物的最适螯合工艺条件为:反应pH为7、鸡蛋膜与无水氯化钙质量比为15:1、反应体系温度为45°C、反应体系时间为20 min,在此条件下的螯合率是45.69%。鸡蛋膜水解物-钙螯合物的最适螯合工艺条件为:反应pH为8、鸡蛋膜水解物与无水氯化钙质量比为5:1、反应体系温度为45°C、反应体系时间为20 min,此时的螯合率是39.36%。
目录
摘要1
关键词1
Abstract 1
Key words1
引言(或绪论)1
1材料与方法2
1.1材料试剂与设备2
1.1.1材料2
1.1.2试剂2
1.1.3设备2
1.2实验方法2
1.2.1单因素实验 2
1.2.1.1反应pH2
1.2.1.2样品与氯化钙的质量比3
1.2.1.3反应温度3
1.2.1.4反应时间3
1.2.2螯合率的测定3
2结果与分析3
2.1鸡蛋膜 钙螯合物、鸡蛋膜水解物钙螯合物单因素实验滴定结果 3
2.1.1反应PH对螯合率的影响 4
2.1.2鸡蛋膜及其水解物与氯化钙质量比对螯合率的影响 4
2.1.3反应温度对螯合率的影响 5
2.1.4反应时间对螯合率的影响 5
3讨论5
致谢6
参考文献6
鸡蛋膜蛋白多肽的钙螯合作用研究
引言
钙元素在人体的发育生长过程中起着至关重要的作用。钙是人体含量最丰富的无机元素,也是人体不可或缺的微量元素,它既是身体的构造者,又是身体的调节者,是我们人体的“生命元素”。其中,骨骼和牙齿中所含有的钙就占到了人体中钙的总含量的99%,主要作用就是维持骨质形态与硬度并促进其生长发育。身体钙缺乏是目前发生较多的情况,无论是老人还是儿童,缺钙几乎是全球性的营养问题[1]。
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骨质缺钙会导致骨质疏松,对身体产生不便影响。人体中的钙含量还有l%是起到生理功能的调节作用,它是存在于软组织细胞和血液中的。缺钙时,血凝发生障碍,人体会出现各种出血症状,还会出现肌张力异常和神经传导阻滞等各种症状。除此之外,钙离子对细胞膜功能的维持、对细胞的粘着、对人体内的酶反应的激活以及各种正常的生理代谢过程都有重要作用。
正因为如此,补钙剂的研究开发一直是个热门。人们不断研究开发出了各种钙元素补充剂,从无机钙盐到有机钙盐,从传统的到新型的等等。无机钙盐吸收率低,而且容易在肾脏停留引起肾结石,传统的有机钙盐也会有不同程度的有毒副作用,所以研究人员不断进行更多的探索,探究出新型有机钙盐,比如氨基酸钙,生物效价高。后来又发现机体吸收蛋白质是以小肽的形式吸收的,而并不是以单一的氨基酸形式吸收,而且从国内外的研究来看,多肽金属元素螯合物要比氨基酸金属元素螯合物具有更高的配合率和稳定性,同时其具有吸收快、生物效价高、营养性强等优点以及抗菌抗氧化、免疫调节等活性,具有很高的开发价值和应用前景。于是研究人员开始不断进行各种多肽螯合钙的研究试验。
目前,蛋白对钙离子的螯合作用也有相关研究。比如,俞园园[2]为了探究制备出补钙性能优良而且安全性高的补钙制剂,在pH值为5.0,类人胶原蛋白与CaCl2的质量比10∶1的条件下,通过水体系合成方法来制备类人胶原蛋白钙螯合复合物。Jung等[34]则是在实验中利用提取的肉食性鱼肠道酶对鳕鱼骨进行酶解,并从酶解液中分离出鱼骨磷酸肽,让其与钙进行螯合,此方法得到的螯合钙复合物被认为是一种新型的营养性的食品。梁春辉[5]等通过对比小鼠血磷和血钙的变化以及小鼠的股骨骨质变化,来研究胶原多肽螯合钙制剂对生长期的小鼠的壮骨作用,发现胶原多肽螯合钙复合物在股骨重量、长度、骨钙、骨磷和有机质含量方面均明显高于其他的补钙制剂(比如,葡萄糖酸钙、碳酸钙)。李彦春[6]等在实验中利用酶两步法,从制革厂的边角废料中制备出高纯度的胶原多肽,然后按胶原多肽∶葡萄糖钙=1∶2的质量比反应,制得新型胶原补钙制剂,并通过小鼠实验证明了胶原多肽钙的补钙效果明显高于其他的无机钙。祝德义[7]等通过用傅里叶变换红外光谱、紫外光谱、环境扫描电镜等手段,来研究胶原多肽与钙结合的方式,对胶原多肽和钙结合的产物进行了初步表征,结果表明,Ca2+既能与胶原多肽的、氨基配位结合,也能与胶原多肽的羧基离子键结合,而且发现胶原多肽有吸附作用,可以促进钙的进一步吸收。
鸡蛋做为一种大众化消费食物,其蛋壳膜是鸡蛋产品的一种副产物,鸡蛋膜伴随着鸡蛋的生产与消费的增加也大量产生。鸡蛋膜的主要成分为蛋白质,约占膜总重的90%,所以鸡蛋膜的直接丢弃是对蛋白质资源的极大浪费,对它的综合利用变得必要。鸡蛋膜对金属离子具有吸附作用,通过优化洗脱条件及pH,蛋壳膜可吸附和分离各种不同类型的金属离子,这对净化废水中的重金属离子起着重要作用,因此鸡蛋膜在工业上应用广泛。目前国内外关于鸡蛋膜吸附金属离子的研究很多且效果很好,例如在Shinichi Ishikawa等人[89]的研究中,蛋壳膜对银、金、钴三种重金在溶液中的吸附率分别能达到97%、98%、94%。但是对于鸡蛋膜水解物螯合金属离子的研究较少。本实验拟研究鸡蛋膜水解物对金属离子的螯合作用,为其作为新的金属离子载体做实践指导。而且鸡蛋膜是一种天然蛋白来源,将其水解物制备出的钙螯合物应用于食品添加剂将具有很大的潜力。
1.1 材料试剂与设备
1.1.1 材料
鸡蛋膜及鸡蛋膜水解物均由实验室前期实验制备。
1.1.2 试剂
无水氯化钙固体颗粒、无水乙醇分析纯、氢氧化钠固体分析纯、乙二胺四乙酸二钠固体、钙指示剂、氯化钠固体颗粒等均为国产分析试剂。
1.1.3 设备
仪器名称
生产厂家
HH系列数显恒温水浴锅
上海江星仪器有限公司
HH恒温水浴锅
上海叶拓仪器仪表有限公司
AllegraTM64R Centrifuge离心机

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