微波法提取百合多糖工艺研究
摘 要目的探究和确定微波法提取百合多糖最佳工艺条件。方法以百合多糖的得率为指标，以微波功率、微波时间、液料比、提取次数为因素，利用单因素实验确定因素水平，使用响应面法进行三因素四水平设计性试验，对微波法提取百合多糖的工艺进行优化研究。结果百合多糖微波提取的最优工艺条件是微波作用时间4min，微波功率400W，液料比20:1ml/g，提取次数2次，多糖得率为12.96%。结论本实验为大规模工业微波法提取百合多糖提供了依据。
目 录
1 绪论 1
1.1 主要活性成分研究 1
1.1.1 多糖 1
1.1.2 皂甙类 1
1.1.3 黄酮类 1
1.1.4 生物碱 1
1.2药理作用 2
1.2.1 抗衰老作用 2
1.2.2 抗肿瘤 2
1.2.3 平喘、止咳作用 2
1.2.4免疫调节 2
1.2.5降血糖 2
1.3临床应用 3
1.3.1治疗更年期综合征 3
1.3.2治疗更年期综合征 3
1.3.3治疗手术后的虚症 3
1.3.4治疗百合病 3
1.3.5治疗抑郁症 3
1.3.6治疗肺结核 3
1.4食疗作用 3
1.4.1早餐鲜百合 3
1.4.2梨子百合菊花饮 3
1.4.3百合炖乌鸡 4
2 微波法提取中药有效成分的研究进展 5
2.1黄酮类成分 5
2.2多糖类成分 5
2.3蒽醌类成分 5
2.4有机酸类成分 6
3 实验部分 7
3.1仪器与材料 7
3.1.1仪器 7
3.1.2材料 7
3.2方法 7
3.2.1样品的处理 7
3.2.2微波温度的确定 7
3.2.3百合多糖的制备 8
3.2.4百合多糖样品液的配制 8
3.2.5百合的得率测定 8
3.2.6葡萄糖标准曲线的绘制 8 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: ^351916072*
4 结果与分析 10
4.1单因素实验 10
4.1.1液料比对多糖得率的影响 10
4.1.2提取时间对多糖得率的影响 10
4.1.3 微波功率对百合多糖得率的影响 11
4.1.4提取次数对百合多糖得率的影响 12
4.2响应面法优化百合多糖提取工艺 12
4.2.1响应面数值分析结果 13
4.2.2交互因素分析 15
4.3小结 18
参考文献 19
致 谢 21
1 绪论
百合作为补益类中药有着悠久长远的历史《神农本草经》上有最早记录。百合是重要的药食同源植物，它不仅营养丰富，还含有多糖、甾体皂甙、酚类化合物、黄酮类化合物和生物碱等多种活性指标成分，其多糖含量较高。用于治疗咳嗽繁多、少痰、心烦惊悸、失眠等症。在现代研究中，百合在抗疲劳、抗抑郁、抗肿瘤、降血糖、抗氧化、免疫调节、止咳等方面有很好的疗效[1]。在全民预防疾病的观念逐步提升的背景下，对于多糖的研究越来越深入，提取方法也不断推陈出新，百合多糖的常见提取方法有溶剂法、酶法、超声波辅助法、微波法等，较为先进的提取方法有超临界流体萃取法。本实验采用微波法将多糖从百合当中提取出来，并以百合多糖得率为指标，采用微波法，以微波功率、微波作用时间、液料比、提取次数为因素，对微波水提取法提取百合多糖的工艺进行研究，响应面法优化提取工艺，微波法提取百合多糖最优工艺的研究为大规模工业化生产提供了实验依据。
1.1 主要活性成分研究
1.1.1多糖类
多糖作为多种中草药的活性成分之一，有很大的研究价值。百合中经分离和纯化的两种多糖具有显著的降血糖作用，即百合多糖LP1、百合多糖LP2。
1.1.2皂甙类
百合中含有的皂甙为甾体皂甙，按结构差异可分为四个类别，即螺甾皂甙、变形螺甾烷皂甙和异螺甾皂甙和呋甾皂甙。从卷丹鳞茎中提取出的甾体皂甙包括两种，薯蓣皂苷由薯蓣皂苷元和三个糖基组成，提果皂苷由提果皂苷元和三个糖基组成[2]。
1.1.3黄酮类
黄酮类成分是植物具有治疗疾病作用的重要内在原因之一。黄酮类以母核结构不同为分类依据，分为黄酮类、黄酮醇类、异黄酮类、高异黄酮、花色素类、二氢黄酮类、查尔酮类、黄烷酮类等，呈游离态或结合态存在于植物中。
1.1.4生物碱
秋水仙碱是现代研究百合生物碱的主要对象，可从百合植物碱中分离得到，为淡黄色粉末状或针状结晶，易溶于极性溶剂水和乙醇，也易溶于氯仿，有强烈毒性，秋水仙碱制成药品常作为高效抗风湿药。
1.2药理作用
1.2.1抗衰老作用
百合粗多糖能够升高因D半乳糖所致的衰老小鼠的血液中SOD、CAT和GSHP活力百合中的维生素矿物质可以促进机体的新陈代谢，有利于机体内垃圾的排泄，延缓衰老。现代的化妆品及护肤品使用百合及其提取物的案例正在逐渐增加，这一作用的研究具有潜在的商业价值。
1.2.2抗肿瘤
百合多糖具有一些多糖类成分的通用药理作用，即抗肿瘤作用，且对人体正常的细胞作用温和。能够调节免疫系统是当代医学界经过实验证明百合多糖具有抗肿瘤作用的主要原因，将肿瘤细胞移植至小鼠体内来观察纯化百合多糖对肿瘤的影响和对荷瘤小鼠免疫功能的影响，结果发现H22肿瘤细胞生长遭到抑制，百合多糖能刺激胸腺、脾脏等免疫系统，增加它们的重量［35］。使用百合多糖的和没有使用百合多糖的实验移瘤小鼠，肿瘤的重量明显少于后者。LP1是从百合中提取分离、纯化的多糖,前期实验表明LP1有一定的增强免疫和抗肿瘤作用[68]。百合中所含有的秋水仙碱，诱导生成多倍体，并且干扰肿瘤细胞的蛋白质代谢[9,10]。因此可以抑制癌细胞的分裂，减弱其增值能力。
1.2.3平喘、止咳作用
采用“二氧化硫引咳法”制作的小鼠咳嗽模型在服用百合水煎剂后，小鼠的咳嗽次数减少，肺活量变大；百合可增强气管、支气管的排泌功能，故起到祛痰止咳的作用；对由小鼠咳嗽因氨水者也可用百合水煎剂来止咳［11］。
1.2.4免疫调节
目 录
1 绪论 1
1.1 主要活性成分研究 1
1.1.1 多糖 1
1.1.2 皂甙类 1
1.1.3 黄酮类 1
1.1.4 生物碱 1
1.2药理作用 2
1.2.1 抗衰老作用 2
1.2.2 抗肿瘤 2
1.2.3 平喘、止咳作用 2
1.2.4免疫调节 2
1.2.5降血糖 2
1.3临床应用 3
1.3.1治疗更年期综合征 3
1.3.2治疗更年期综合征 3
1.3.3治疗手术后的虚症 3
1.3.4治疗百合病 3
1.3.5治疗抑郁症 3
1.3.6治疗肺结核 3
1.4食疗作用 3
1.4.1早餐鲜百合 3
1.4.2梨子百合菊花饮 3
1.4.3百合炖乌鸡 4
2 微波法提取中药有效成分的研究进展 5
2.1黄酮类成分 5
2.2多糖类成分 5
2.3蒽醌类成分 5
2.4有机酸类成分 6
3 实验部分 7
3.1仪器与材料 7
3.1.1仪器 7
3.1.2材料 7
3.2方法 7
3.2.1样品的处理 7
3.2.2微波温度的确定 7
3.2.3百合多糖的制备 8
3.2.4百合多糖样品液的配制 8
3.2.5百合的得率测定 8
3.2.6葡萄糖标准曲线的绘制 8 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: ^351916072*
4 结果与分析 10
4.1单因素实验 10
4.1.1液料比对多糖得率的影响 10
4.1.2提取时间对多糖得率的影响 10
4.1.3 微波功率对百合多糖得率的影响 11
4.1.4提取次数对百合多糖得率的影响 12
4.2响应面法优化百合多糖提取工艺 12
4.2.1响应面数值分析结果 13
4.2.2交互因素分析 15
4.3小结 18
参考文献 19
致 谢 21
1 绪论
百合作为补益类中药有着悠久长远的历史《神农本草经》上有最早记录。百合是重要的药食同源植物，它不仅营养丰富，还含有多糖、甾体皂甙、酚类化合物、黄酮类化合物和生物碱等多种活性指标成分，其多糖含量较高。用于治疗咳嗽繁多、少痰、心烦惊悸、失眠等症。在现代研究中，百合在抗疲劳、抗抑郁、抗肿瘤、降血糖、抗氧化、免疫调节、止咳等方面有很好的疗效[1]。在全民预防疾病的观念逐步提升的背景下，对于多糖的研究越来越深入，提取方法也不断推陈出新，百合多糖的常见提取方法有溶剂法、酶法、超声波辅助法、微波法等，较为先进的提取方法有超临界流体萃取法。本实验采用微波法将多糖从百合当中提取出来，并以百合多糖得率为指标，采用微波法，以微波功率、微波作用时间、液料比、提取次数为因素，对微波水提取法提取百合多糖的工艺进行研究，响应面法优化提取工艺，微波法提取百合多糖最优工艺的研究为大规模工业化生产提供了实验依据。
1.1 主要活性成分研究
1.1.1多糖类
多糖作为多种中草药的活性成分之一，有很大的研究价值。百合中经分离和纯化的两种多糖具有显著的降血糖作用，即百合多糖LP1、百合多糖LP2。
1.1.2皂甙类
百合中含有的皂甙为甾体皂甙，按结构差异可分为四个类别，即螺甾皂甙、变形螺甾烷皂甙和异螺甾皂甙和呋甾皂甙。从卷丹鳞茎中提取出的甾体皂甙包括两种，薯蓣皂苷由薯蓣皂苷元和三个糖基组成，提果皂苷由提果皂苷元和三个糖基组成[2]。
1.1.3黄酮类
黄酮类成分是植物具有治疗疾病作用的重要内在原因之一。黄酮类以母核结构不同为分类依据，分为黄酮类、黄酮醇类、异黄酮类、高异黄酮、花色素类、二氢黄酮类、查尔酮类、黄烷酮类等，呈游离态或结合态存在于植物中。
1.1.4生物碱
秋水仙碱是现代研究百合生物碱的主要对象，可从百合植物碱中分离得到，为淡黄色粉末状或针状结晶，易溶于极性溶剂水和乙醇，也易溶于氯仿，有强烈毒性，秋水仙碱制成药品常作为高效抗风湿药。
1.2药理作用
1.2.1抗衰老作用
百合粗多糖能够升高因D半乳糖所致的衰老小鼠的血液中SOD、CAT和GSHP活力百合中的维生素矿物质可以促进机体的新陈代谢，有利于机体内垃圾的排泄，延缓衰老。现代的化妆品及护肤品使用百合及其提取物的案例正在逐渐增加，这一作用的研究具有潜在的商业价值。
1.2.2抗肿瘤
百合多糖具有一些多糖类成分的通用药理作用，即抗肿瘤作用，且对人体正常的细胞作用温和。能够调节免疫系统是当代医学界经过实验证明百合多糖具有抗肿瘤作用的主要原因，将肿瘤细胞移植至小鼠体内来观察纯化百合多糖对肿瘤的影响和对荷瘤小鼠免疫功能的影响，结果发现H22肿瘤细胞生长遭到抑制，百合多糖能刺激胸腺、脾脏等免疫系统，增加它们的重量［35］。使用百合多糖的和没有使用百合多糖的实验移瘤小鼠，肿瘤的重量明显少于后者。LP1是从百合中提取分离、纯化的多糖,前期实验表明LP1有一定的增强免疫和抗肿瘤作用[68]。百合中所含有的秋水仙碱，诱导生成多倍体，并且干扰肿瘤细胞的蛋白质代谢[9,10]。因此可以抑制癌细胞的分裂，减弱其增值能力。
1.2.3平喘、止咳作用
采用“二氧化硫引咳法”制作的小鼠咳嗽模型在服用百合水煎剂后，小鼠的咳嗽次数减少，肺活量变大；百合可增强气管、支气管的排泌功能，故起到祛痰止咳的作用；对由小鼠咳嗽因氨水者也可用百合水煎剂来止咳［11］。
1.2.4免疫调节
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