多肽类抗生素协同纳米金对大肠杆菌金黄色葡萄球菌等病原菌的抑菌效果研究
摘要:肽类抗生素(peptide antibiotics)是一类广泛存在于生物体内具有抵抗外界微生物侵害的小分子多肽。本文选用一种多肽类抗生素：多粘菌素b，研究其对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌及单增李斯特菌的杀菌效果，分析确定对大肠杆菌及金黄色葡萄球菌的最小杀菌浓度；用多粘菌素b修饰纳米金，比较了修饰前后不同的杀菌率，结果表明：使用多粘菌素b修饰纳米金后对于金黄色葡萄球菌、单增李斯特的杀菌率提高了4.41%和7.49%，而对于大肠杆菌以及沙门氏菌修饰前后的杀菌率分别提高了0.4%和0.2%，说明纳米金的加入可以显著提高多粘菌素b对于革兰氏阳性菌的杀菌率，而不能显著提高多粘菌素b对于革兰氏阴性菌的杀菌率。
目录
摘要1
关键词1
Abstract1
Keywords1
引言2
1 材料与方法2
1.1 材料2
1.1.1 实验菌株2
1.1.2 实验药物与试剂2
1.1.3 实验仪器与设备2
1.2方法3
1.2.1菌液的制备3
1.2.2纳米金溶液的制备3
1.2.3多粘菌素b的最小抑菌浓度及最小杀菌浓度的测定3
1.2.4不同浓度的纳米金溶液的抑菌活性测定3
1.2.5纳米金和多粘菌素b溶液协同抑菌性能测定3
1.2.6 数据分析4
2 结果分析4
2.1纳米金对于多粘菌素b性质的影响4
2.2多粘菌素b的最小抑菌浓度及最小杀菌浓度测定4
2.3不同浓度的纳米金溶液抑菌性能4
2.4纳米金和多粘菌素b溶液协同抑菌性能测定5
3讨论6
3.1纳米金的抗菌机理6
致谢7
参考文献7
多肽类抗生素协同纳米金对大肠杆菌金黄色葡萄球菌等病原菌的抑菌效果研究
引言
引言：在当下随着人们的生活水平的提高及市场肉品供应的日益丰富，人们对于肉品的消费逐渐趋向于新鲜和卫生。自20世纪90年代以来，我国的肉类产量已经居世界首位。肉类的生产与消费对于肉类加工和储藏提出了新的
*好棒文|www.hbsrm.com +Q: 3_5_1_9_1_6_0_7_2
要求。目前，我国肉类销售的仍以冷冻肉储藏销售以及市场开放式的热鲜肉销售为主要形式。引起肉类的腐败变质的因素可分为生物、化学以及物理三类，具体来说主要形式有以下几种:①微生物生长活动，主要指细菌、酵母菌以及霉菌;②肉中酶活动以及其它的化学反应;③昆虫、寄生虫以及啮齿动物浸染;④食品温度控制的不当;⑤吸水或者失水;⑥氧气参与的各种反应;⑦光;⑧物理胁迫和滥用;⑨时间。这其中其尤以微生物引起的腐败最为普遍，所产生的危害最大也最难控制，因而这种腐败也最受人们的关注[1]。目前，对生鲜肉制品，人们主要采取的措施有：气调保鲜技术；真空保鲜技术；高压处理保鲜；微波保鲜等等[2]。
肽类抗生素(peptide antibiotics)是一类广泛的存在在生物体中具有抵抗外界的微生物侵害、消除体内的突变细胞的小分子多肽。肽类抗生素不仅仅具有高效的广谱的抗微生物作用，还参与到免疫应答、伤口愈合、细胞因子的释放、白细胞的趋化等反应过程中，是一类广谱的、安全的、不易产生耐药菌的抗生素[3]。多粘菌素b是 多粘芽胞杆菌（bacilluspolymyxa）产生的一组多肽类的抗生素。其抗菌谱以及临床应用和多粘菌素E相似，其对于革兰阴性杆菌，例如大肠杆菌、绿脓杆菌、副大肠杆菌、肺炎克雷白杆菌、嗜酸杆菌、百日咳杆菌以及痢疾杆菌等有较好的抑制和杀菌作用[4]。
纳米金指金的微小颗粒，纳米金的直径在1～100 nm，具有较高的电子密度、介电特性以及催化作用，能够与多种生物的大分子相结合，且不影响到其生物活性[5]。可以由氯金酸通过还原的方式可以方便地制备出各种的不同粒径的纳米金溶液，纳米金溶液的颜色依直径的大小呈红色至紫色[6]。纳米金在医药等诸多的领域当中得到了广泛的应用。在医药的领域当中，纳米金溶液已经广泛的应用于疾病诊断，药物的检测，细胞的成像等方面当中[7]。纳米金其自身所具有一定生物的活性，同时纳米金具有光热效应， 可以作为载体用于负载药物，以上的3种方式均可以用来开发新的药物，广泛的用于疾病的治疗和研究。当下纳米金已经广泛的用于艾滋病[8]、肿瘤[9]、帕金森病[10]等的疾病的治疗中。其中，美国国家癌症研究所( National Cancer Institute ，NCI)目前已经完成了对于纳米金的负载肿瘤的坏死因子的抗肿瘤药 1期的临床的试验[11]，目前正在准备进行2期的临床的试验。
本实验主要研究了多粘菌素b对于大肠杆菌以及金黄色葡萄球菌的抑菌效果，测定了多粘菌素b对于金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度（MIC），研究了不同浓度的纳米金对于大肠杆菌以及金黄色葡萄球菌的抑菌效果。此外，实验还研究了多粘菌素b与纳米金的混合溶液对于大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌以及单增李斯特菌的抑菌效果。
1 材料与方法
1.1材料
1.1.1实验菌株
金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、沙门氏菌、单增李斯特菌。
1.1.2 实验药物与试剂
多粘菌素b 索莱宝公司
平板计数琼脂 上海盛思生化科技有限公司；
柠檬酸钠 分析纯 国药集团化学试剂有限公司；
碳酸钾 分析纯 国药集团化学试剂有限公司；
LB肉汤培养基 上海盛思生化科技有限公司；
营养肉汤培养基 上海盛思生化科技有限公司。
1.1.3 实验仪器与设备
锥形瓶 蜀牛玻璃仪器有限公司
量筒 蜀牛玻璃仪器有限公司
净化工作台 苏净集团苏州安泰空气技术有限公司；
电热恒温培养箱 上海一恒科学仪器有限公司；
AUY120 型电子天平（精确度为0.1mg），日本岛津公司；
KH400KDB型高功率数控超声清洗器 昆山禾创超声仪器有限公司；
DF101S型集热式恒温加热磁力搅拌器 巩义市科华仪器设备有限公司；
紫外可见分光光度计 岛津企业管理（中国）有限公司；
台式高速冷冻离心机 南京百奥生物科技有限公司。
1.2实验方法
1.2 .1菌液的制备
大肠杆菌菌液的制备：将大肠杆菌菌种到入到LB肉汤培养基中，于37摄氏度条件下培养12小时，用LB肉汤将菌液稀释到浓度为105 CFU/mL备用[2]。
目录
摘要1
关键词1
Abstract1
Keywords1
引言2
1 材料与方法2
1.1 材料2
1.1.1 实验菌株2
1.1.2 实验药物与试剂2
1.1.3 实验仪器与设备2
1.2方法3
1.2.1菌液的制备3
1.2.2纳米金溶液的制备3
1.2.3多粘菌素b的最小抑菌浓度及最小杀菌浓度的测定3
1.2.4不同浓度的纳米金溶液的抑菌活性测定3
1.2.5纳米金和多粘菌素b溶液协同抑菌性能测定3
1.2.6 数据分析4
2 结果分析4
2.1纳米金对于多粘菌素b性质的影响4
2.2多粘菌素b的最小抑菌浓度及最小杀菌浓度测定4
2.3不同浓度的纳米金溶液抑菌性能4
2.4纳米金和多粘菌素b溶液协同抑菌性能测定5
3讨论6
3.1纳米金的抗菌机理6
致谢7
参考文献7
多肽类抗生素协同纳米金对大肠杆菌金黄色葡萄球菌等病原菌的抑菌效果研究
引言
引言：在当下随着人们的生活水平的提高及市场肉品供应的日益丰富，人们对于肉品的消费逐渐趋向于新鲜和卫生。自20世纪90年代以来，我国的肉类产量已经居世界首位。肉类的生产与消费对于肉类加工和储藏提出了新的
*好棒文|www.hbsrm.com +Q: 3_5_1_9_1_6_0_7_2
要求。目前，我国肉类销售的仍以冷冻肉储藏销售以及市场开放式的热鲜肉销售为主要形式。引起肉类的腐败变质的因素可分为生物、化学以及物理三类，具体来说主要形式有以下几种:①微生物生长活动，主要指细菌、酵母菌以及霉菌;②肉中酶活动以及其它的化学反应;③昆虫、寄生虫以及啮齿动物浸染;④食品温度控制的不当;⑤吸水或者失水;⑥氧气参与的各种反应;⑦光;⑧物理胁迫和滥用;⑨时间。这其中其尤以微生物引起的腐败最为普遍，所产生的危害最大也最难控制，因而这种腐败也最受人们的关注[1]。目前，对生鲜肉制品，人们主要采取的措施有：气调保鲜技术；真空保鲜技术；高压处理保鲜；微波保鲜等等[2]。
肽类抗生素(peptide antibiotics)是一类广泛的存在在生物体中具有抵抗外界的微生物侵害、消除体内的突变细胞的小分子多肽。肽类抗生素不仅仅具有高效的广谱的抗微生物作用，还参与到免疫应答、伤口愈合、细胞因子的释放、白细胞的趋化等反应过程中，是一类广谱的、安全的、不易产生耐药菌的抗生素[3]。多粘菌素b是 多粘芽胞杆菌（bacilluspolymyxa）产生的一组多肽类的抗生素。其抗菌谱以及临床应用和多粘菌素E相似，其对于革兰阴性杆菌，例如大肠杆菌、绿脓杆菌、副大肠杆菌、肺炎克雷白杆菌、嗜酸杆菌、百日咳杆菌以及痢疾杆菌等有较好的抑制和杀菌作用[4]。
纳米金指金的微小颗粒，纳米金的直径在1～100 nm，具有较高的电子密度、介电特性以及催化作用，能够与多种生物的大分子相结合，且不影响到其生物活性[5]。可以由氯金酸通过还原的方式可以方便地制备出各种的不同粒径的纳米金溶液，纳米金溶液的颜色依直径的大小呈红色至紫色[6]。纳米金在医药等诸多的领域当中得到了广泛的应用。在医药的领域当中，纳米金溶液已经广泛的应用于疾病诊断，药物的检测，细胞的成像等方面当中[7]。纳米金其自身所具有一定生物的活性，同时纳米金具有光热效应， 可以作为载体用于负载药物，以上的3种方式均可以用来开发新的药物，广泛的用于疾病的治疗和研究。当下纳米金已经广泛的用于艾滋病[8]、肿瘤[9]、帕金森病[10]等的疾病的治疗中。其中，美国国家癌症研究所( National Cancer Institute ，NCI)目前已经完成了对于纳米金的负载肿瘤的坏死因子的抗肿瘤药 1期的临床的试验[11]，目前正在准备进行2期的临床的试验。
本实验主要研究了多粘菌素b对于大肠杆菌以及金黄色葡萄球菌的抑菌效果，测定了多粘菌素b对于金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度（MIC），研究了不同浓度的纳米金对于大肠杆菌以及金黄色葡萄球菌的抑菌效果。此外，实验还研究了多粘菌素b与纳米金的混合溶液对于大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌以及单增李斯特菌的抑菌效果。
1 材料与方法
1.1材料
1.1.1实验菌株
金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、沙门氏菌、单增李斯特菌。
1.1.2 实验药物与试剂
多粘菌素b 索莱宝公司
平板计数琼脂 上海盛思生化科技有限公司；
柠檬酸钠 分析纯 国药集团化学试剂有限公司；
碳酸钾 分析纯 国药集团化学试剂有限公司；
LB肉汤培养基 上海盛思生化科技有限公司；
营养肉汤培养基 上海盛思生化科技有限公司。
1.1.3 实验仪器与设备
锥形瓶 蜀牛玻璃仪器有限公司
量筒 蜀牛玻璃仪器有限公司
净化工作台 苏净集团苏州安泰空气技术有限公司；
电热恒温培养箱 上海一恒科学仪器有限公司；
AUY120 型电子天平（精确度为0.1mg），日本岛津公司；
KH400KDB型高功率数控超声清洗器 昆山禾创超声仪器有限公司；
DF101S型集热式恒温加热磁力搅拌器 巩义市科华仪器设备有限公司；
紫外可见分光光度计 岛津企业管理（中国）有限公司；
台式高速冷冻离心机 南京百奥生物科技有限公司。
1.2实验方法
1.2 .1菌液的制备
大肠杆菌菌液的制备：将大肠杆菌菌种到入到LB肉汤培养基中，于37摄氏度条件下培养12小时，用LB肉汤将菌液稀释到浓度为105 CFU/mL备用[2]。
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