菊花‘神马’转基因阳性株系的筛选
本实验以菊花品种‘神马’为材料，采用高保真PCR的方法克隆CmJAZ1基因开放阅读框序列(564bp)，并将不包含末尾Jas结构域的部分(1-348bp)构建到菊花表达载体pMDC32，以农杆菌介导的叶盘法进行菊花‘神马’的遗传转化，获得3株超表达转pMDC32-CmJAZ1△jas基因菊花阳性植株。利用SDS法提取阳性植株的基因组DNA，选择Hyg抗性的特异性引物，经PCR检测，植物表达载体成功整合到植物基因组中；提取DNA检测成功的阳性株系的RNA，反转录合成cDNA，经qRT-PCR检测CmJAZ1△jas基因在转基因株系中成功表达。
目录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1
引言1
1材料与方法 2
1.1 植物材料、表达载体和菌株 2
1.2菊花CmJAZ1基因的克隆2
1.3菊花表达载体构建 3
1.4农杆菌叶盘法进行菊花‘神马’的遗传转化 4
1.5转基因株系的分子检测 4
1.5.1 PCR检测 4
1.5.2 转基因株系的CmJAZ1△jas基因表达水平检测 5
2结果与分析 7
2.1转基因菊花阳性株系的获得及分子鉴定 7
2.1.1转基因菊花阳性株系的获得 7
2.1.2转基因菊花的分子检测 7
3讨论 9致谢10
参考文献10 菊花‘神马’转基因阳性株系的筛选
目录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1
引言1
1材料与方法 2
1.1 植物材料、表达载体和菌株 2
1.2菊花CmJAZ1基因的克隆2
1.3菊花表达载体构建 3
1.4农杆菌叶盘法进行菊花‘神马’的遗传转化 4
1.5转基因株系的分子检测 4
1.5.1 PCR检测 4
1.5.2 转基因株系的CmJAZ1△jas基因表达水平检测 5
2结果与分析 7
2.1转基因菊花阳性株系的获得及分子鉴定 7
2.1.1转基因菊花阳性株系的获得 7
2.1.2转基因菊花的分子检测 7
3讨论 9致谢10
参考文献10 菊花‘神马’转基因阳性株系的筛选
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