大丽花繁育特性的初步研究

以大丽花(Dahlia pinnata Cav.)花粉为试验材料,采用离体萌发法研究了大丽花花粉离体萌发的最适培养基,并进一步对大丽花花粉的储藏特性、不同品种的萌发率差异等进行研究。结果表明蔗糖、硼酸在一定的浓度范围内能促进大丽花花粉的萌发,其花粉萌发的最适蔗糖和硼酸浓度分别为4%和0.01%,萌发率最高为29.72%。花粉最佳储藏温度为4℃,约35d花粉失去活性。以配比为BK+4%蔗糖(0.01%H3BO3、0.03%Ca(NO3)2·4H2O、MgSO4·7H2O、0.01%KNO3、4%蔗糖)的培养基最适宜大丽花花粉的萌发,大部分品种花粉均能萌发。利用筛选出的培养基检测62个大丽花品种的花粉萌发率,结果表明,大丽花品种间的花粉萌发率差异很大,总平均萌发率为18.54%,萌发率中间值为15.00%。其中‘梅尔的橘子酱’的花粉萌发率最高,为45.17%,无花粉的品种有2个,为‘斗牛舞’和‘起飞’。
目录
摘要 1
关键词 1
Abstract 1
Key words 1
引言 1
1 材料与方法 2
1.1 实验材料 2
1.2 试验方法 2
1.2.1 花粉萌发培养基的筛选 2
1.2.2 花粉的储藏 2
1.2.3 花粉生活力的测定 2
1.3 数据处理 3
2 结果与分析 3
2.1 不同培养基成分对花粉萌发的影响 3
2.1.1 PEG对大丽花花粉萌发的影响 3
2.1.2 蔗糖对大丽花花粉萌发的影响 3
2.1.3 硼酸对大丽花花粉萌发的影响 3
2.1.4 蔗糖和PEG共同作用对大丽花花粉萌发的影响 4
2.2 大丽花花粉储藏特性研究 4
2.3 不同大丽花品种的花粉萌发率差异聚类分析 5
3 讨论 7
致谢 8
参考文献 8
大丽花繁育特性的初步研究
引言
引言
大丽花(Dahlia pinnata Cav.)原产于墨西哥、危地马拉及哥伦比亚一带, 是菊科 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: *351916072* 
大丽花属的多年生球根草本花卉, 从夏到秋花开不绝, 具有极高的观赏价值[1]。其为了纪念一位瑞典著名的植物分类学家达尔(Dahl),而取名为大丽花。大丽花又称天竺牡丹、地瓜花、西番莲(北京)、洋芍药(广州)等,它多姿多彩,有着富丽和吉利的象征。墨西哥视它为国花,西雅图尊它为市花。在我国,大丽花能适应各地的环境条件,深受老百姓的青睐。由于它形姿优美、色彩娇艳、品种繁多、花期长、适应性强, 且易于栽培, 故已普及于世界各地[2],广泛地应用于园林绿化、切花生产和庭院种植,同时还具有一定的药用价值。
近年来,关于大丽花的研究报道不多,有关大丽花名优品种的引种栽培、规模化生产技术研究、观赏特征与品种分类[3]、优良品种扦插繁殖[4]、表型性状遗传多样性[5]、干旱胁迫的影响[6]、花芽分化[7]等已有部分报道,但对大丽花的花粉萌发、储藏等方面的繁育特性研究还未见到相关报道。
目前,已有很多文献发表了关于菊科植物花粉活力的研究,包括冷蒿、野菊等[8][9],但对大丽花花粉生活力的测定研究很少。花粉生活力测定方法常用的有:花粉离体萌发、核及原生质染色、酶测试及荧光染色法,其中花粉离体萌发法更接近于自然实际情况,而且这种方法还为试管授精以克服不亲和性[10][11],通过花粉进行基因转移等高新技术研究奠定了基础[12]。笔者采用大丽花花粉,利用离体萌发法,研究PEG、硼酸、蔗糖和萌发温度对及花粉萌发的影响,以期探索出适合大丽花花粉萌发的培养基, 并测得了62个大丽花品种的花粉萌发率,以期为大丽花花粉生活力的测定、人工授粉、栽培、育种、引种等研究提供理论基础。
材料与方法
1.1试验材料
试验于2016年9月~11月的大丽花盛花期进行,以大学锁石村菊花花卉基地的62个大丽花品种(见表5)为试验材料。于晴天的10点至14点随机地选取盛花期发育良好、长势健壮、且没有病虫害的大丽花植株,采集即将花药开裂的花朵。使用镊子采集花药,将花药置于硫酸纸上,放置通风处光照一段时间后,将硫酸纸铺开,花粉便会自然地散落于纸上。散落的大丽花花粉用离心管收集起来备用[13],也可以直接用毛笔刷取出新鲜的花粉,在28℃的烘箱中干燥4~8小时[14]。如在野外不方便采集花粉时,也可以摘取含苞待放或者是初开的花朵,连同一段长度适中并带有叶片的枝条,放入盛有清水的瓶子中,带回实验室后待大丽花散粉时再收集花粉[15]。
1.2 试验方法
1.2.1 花粉萌发培养基的筛选 以花粉量较多的大丽花‘十字架’为试验材料,采用花粉离体萌发的方法测定花粉萌发率以筛选最适合的培养基配比。BK培养基(0.01%H3BO3、0.03%Ca(NO3)24H2O、MgSO47H20、0.01%KNO3)作为基本培养基,添加不同浓度的PEG、蔗糖、硼酸,以筛选最适合大丽花花粉萌发的培养基。
不同PEG浓度处理:BK培养基+PEG,PEG的浓度为0、5%、10%、15%;
不同蔗糖浓度处理:BK培养基+蔗糖,蔗糖的浓度为2%、4%、6%、8%、15%;
不同硼酸浓度处理:BK培养基+最适蔗糖浓度+硼酸,硼酸的浓度为0.01%、0.02%、0.03%、0.04%、0.05%;
蔗糖、硼酸、PEG组合处理:BK培养基+最适蔗糖浓度+最适硼酸浓度+PEG,PEG的浓度为0、5%、10%、15%。
液体培养基可直接配置,将配好的培养基滴在载玻片上,将花粉散播其上,为避免水分蒸发造成误差过大,应尽可能增大培养环境的空气湿度[16]。测定花粉的生活力,花粉萌发率最高的即为筛选出的最适大丽花花粉萌发培养基,花粉生活力的测定方法、操作步骤、培养条件和时间同下述1.2.3花粉离体培养方法。
1.2.2 花粉的储藏 采集新鲜的花粉以3种不同的大丽花品种‘英535’和‘塞尚画廊’‘白色砰砰’为试验材料,均匀地分成4份装入1个离心管中,在离心管密封保存,置于室温、低温4℃、低温20℃、超低温80℃四个不同的温度下储藏。每隔5天,采取适量的花粉,采用筛选出的花粉萌发率最高的液体培养基来测定大丽花花粉的萌发率。试验的操作步骤、培养的条件和时间同下述1.2.3花粉离体培养方法。
1.2.3 花粉生活力的测定 取凹的载玻片放于铺有一张湿滤纸的培养皿中,用移液枪移取适量的液滴于载玻片的凹处,用清洁的牙签蘸取少许的待测花粉撒于液滴上,使其置于温度为25℃、湿度为75%的光照培养箱中恒温培养4h,培养后在显微镜下观察并统计大丽花花粉的萌发率。当花粉管的长度超过花粉粒的长度时视为萌发[17]。每个处理统计5个观察视野,每个观察视野的花粉数不少于50粒,取3次重复的平均值作为花粉的萌生率。
花粉萌发率%=(已萌发的花粉数/花粉粒总数)×100

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