卡特兰的离体培养和快速繁殖条件研究
摘要：卡特兰为兰科卡特兰属植物，卡特兰花大色艳，深受大众喜爱，尤其是在西方发达国家，有“洋兰之王”的美称。卡特兰生长速度慢，常规分株繁殖法难以达到快速繁殖的要求，植物组培快繁技术繁殖系数高，无菌苗性状稳定，因此已成为卡特兰繁殖的主要途径。目前，国内外对卡特兰的研究报道较少，关于卡特兰组织培养方面的研究亦不多。本研究以卡特兰无菌苗为试验材料，研究了卡特兰无菌苗增殖及生根条件，并初步对卡特兰无菌苗快速生长体系进行了研究，为卡特兰组培快繁及商品化生产提供理论依据。本研究得到卡特兰增殖培养的最适宜培养基条件为6-BA 2.0mg/L，椰子汁200mL/L；生根培养的最适宜培养基条件为NAA0.20mg/L，椰子汁200mL/L。
目录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1
引言1
1 材料与方法2
1.1 试验材料 2
1.2 试验方法 2
1.2.1 植物生长调节剂对卡特兰无菌苗增殖和生根的影响2
1.2.2 有机添加物对卡特兰无菌苗增殖和生根的影响2
2 结果与分析3
2.1 不同细胞分裂素种类和浓度对卡特兰侧芽增殖和生长的影响3
2.2不同生长素种类和浓度对卡特兰生根的影响4
2.3不同浓度有机添加物对卡特兰增殖和生根的影响5
3 讨论 6
4 结论7
致谢7
参考文献8
卡特兰的离体培养和快速繁殖条件研究
引言
卡特兰(Cattleya hybrid)属兰科卡特兰属，原生于美洲的热带地区，原生种有60余种[1]。目前世界上栽培的卡特兰几乎都是人工改良的杂交品种，包括卡特兰属内种间杂交种，以及与若干近缘属进行杂交形成的属间杂交品种[2] 。卡特兰花大，花色娇艳多变，花朵芳香馥郁，是重要的的兰花之一，深受全世界人的喜爱，尤其是在西方发达国家，因此有“洋兰之王”的美称[3]。我国因历史因素，栽培卡特兰的时间较短，从上世纪80年代才开始大规模生产。卡特兰的繁殖问题一直是大家关注的焦点，目前常见的繁殖方法有分株、无菌播种和组织培养[4] 。组织培养是目前
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比较重要的卡特兰繁殖方式，是将卡特兰的离体组织接种到特定的培养基上，在适宜的条件下进行脱分化然后形成愈伤组织，最后再分化生长发育成新的植株。组织培养是大规模生产卡特兰常用的方法之一。目前国内外对卡特兰的研究报道较少，关于卡特兰组织培养方面的研究亦不多。作者所在实验室在卡特兰的离体快速繁殖技术研究中已经初步探讨了不同植物生长调节剂条件对卡特兰离体培养的增殖和生根的影响。本研究在此基础上进一步探讨不同细胞分裂素、生长素以及有机添加物的种类和浓度对卡特兰组织培养效果的影响，以建立适合于卡特兰优良品种快速繁殖的条件，为卡特兰的规模化生产提供技术基础。
1 材料与方法
1.1 试验材料
试验在大学园艺学院组织培养实验室进行。试验材料为大学园艺学院观赏植物生物技术实验室保存的卡特兰品种C1无菌苗。选择长势一致、健壮无污染的植株作为试验材料。
1.2 试验方法
事先将所有卡特兰无菌苗接种在同一配方的增殖培养基上，培养基配方为：MS基本培养基，6BA 1.0mg/L，NAA 0.2mg/L，蔗糖30g/L，琼脂粉6.5g/L，pH5.6。每次使其生长一个月，再转接，转接3次。每次接种时将根和老叶切除，侧芽可切下继续培养。使所有卡特兰无菌苗大小和长势一致，达到控制变量的效果，卡特兰无菌苗只对本次试验的植物生长调节剂及有机添加物处理反应。
1.2.1 植物生长调节剂对卡特兰无菌苗增殖和生根的影响
选择长势一致、健壮无污染的卡特兰无菌苗，切除根、侧芽及老叶后分别接种在试验设置的含有不同植物生长调节剂种类的培养基上，每种植物生长调节剂分别设置不同的浓度梯度。培养基其他成分如下：MS基本培养基，蔗糖30g/L，琼脂粉6.5g/L，pH5.6。试验设置的植物生长调节剂种类及其浓度的处理如下：细胞分裂素类：6BA（6苄基腺嘌呤）0，0.5，1.0，1.5，2.0，2.5，3.0 mg/L；2ip（异戊烯基腺嘌呤）0.5，1.0，1.5，2.0，2.5，3.0 mg/L；KT（激动素）0.05，0.10，0.15，0.20，0.25 mg/L。生长素类：IBA（吲哚丁酸）0.1，0.2，0.3，0.4，0.5，0.6，0.7 mg/L；NAA（萘乙酸）0.05，0.10，0.15，0.20，0.25，0.30 mg/L；IAA（吲哚乙酸）0.1，0.2，0.3，0.4，0.5 mg/L。
每种植物生长调节剂的每个浓度处理均配制3份培养基，每份培养基上接种至少5株卡特兰无菌苗。放入组培室生长，2个月后进行转接，转接时统计各植物生长调节剂种类及浓度处理下无菌苗的侧芽数、侧芽长度、根数和根长度。通过数据分析，得到适宜卡特兰增殖和生根的细胞分裂素和生长素种类及浓度。
1.2.2 有机添加物对卡特兰无菌苗增殖和生根的影响
以筛选的卡特兰无菌苗增殖培养基和生根培养基为基础，进一步添加有机物椰子汁。选择长势一致、健壮的卡特兰无菌苗，切除根、侧芽及老叶后分别接种试验设置的含有不同浓度有机添加物的增殖培养基和生根培养基上。试验设置的有机添加物浓度处理为50，100，150，200，250 mL/L。
培养基其他成分如下：MS基本培养基，蔗糖30g/L，琼脂粉6.5g/L，pH5.6。每个有机添加物的浓度处理均配制3份培养基，每份培养基上接种至少5株卡特兰无菌苗。放入组培室生长，2个月后进行转接，转接时统计各浓度处理下无菌苗的侧芽数、侧芽长度、根数和根长度。通过数据分析，得到适宜卡特兰增殖和生根的有机添加物浓度，并以此得出最适宜卡特兰无菌苗增殖培养和生根培养的培养基条件。
2 结果与分析
2.1 不同细胞分裂素种类和浓度对卡特兰侧芽增殖和生长的影响
表1 不同细胞分裂素种类和浓度对卡特兰增殖的影响
Table 1 Effects of different cytokinins on the proliferation of Cattleya hybrid
细胞分裂素
平均侧芽数
平均侧芽
长度（cm）
最长侧芽
长度（cm）
增殖系数
种类
浓度（mg/L）
6BA
0.0
1.50
1.15
1.23
1.50e
0.5
1.67
1.16
目录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1
引言1
1 材料与方法2
1.1 试验材料 2
1.2 试验方法 2
1.2.1 植物生长调节剂对卡特兰无菌苗增殖和生根的影响2
1.2.2 有机添加物对卡特兰无菌苗增殖和生根的影响2
2 结果与分析3
2.1 不同细胞分裂素种类和浓度对卡特兰侧芽增殖和生长的影响3
2.2不同生长素种类和浓度对卡特兰生根的影响4
2.3不同浓度有机添加物对卡特兰增殖和生根的影响5
3 讨论 6
4 结论7
致谢7
参考文献8
卡特兰的离体培养和快速繁殖条件研究
引言
卡特兰(Cattleya hybrid)属兰科卡特兰属，原生于美洲的热带地区，原生种有60余种[1]。目前世界上栽培的卡特兰几乎都是人工改良的杂交品种，包括卡特兰属内种间杂交种，以及与若干近缘属进行杂交形成的属间杂交品种[2] 。卡特兰花大，花色娇艳多变，花朵芳香馥郁，是重要的的兰花之一，深受全世界人的喜爱，尤其是在西方发达国家，因此有“洋兰之王”的美称[3]。我国因历史因素，栽培卡特兰的时间较短，从上世纪80年代才开始大规模生产。卡特兰的繁殖问题一直是大家关注的焦点，目前常见的繁殖方法有分株、无菌播种和组织培养[4] 。组织培养是目前
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比较重要的卡特兰繁殖方式，是将卡特兰的离体组织接种到特定的培养基上，在适宜的条件下进行脱分化然后形成愈伤组织，最后再分化生长发育成新的植株。组织培养是大规模生产卡特兰常用的方法之一。目前国内外对卡特兰的研究报道较少，关于卡特兰组织培养方面的研究亦不多。作者所在实验室在卡特兰的离体快速繁殖技术研究中已经初步探讨了不同植物生长调节剂条件对卡特兰离体培养的增殖和生根的影响。本研究在此基础上进一步探讨不同细胞分裂素、生长素以及有机添加物的种类和浓度对卡特兰组织培养效果的影响，以建立适合于卡特兰优良品种快速繁殖的条件，为卡特兰的规模化生产提供技术基础。
1 材料与方法
1.1 试验材料
试验在大学园艺学院组织培养实验室进行。试验材料为大学园艺学院观赏植物生物技术实验室保存的卡特兰品种C1无菌苗。选择长势一致、健壮无污染的植株作为试验材料。
1.2 试验方法
事先将所有卡特兰无菌苗接种在同一配方的增殖培养基上，培养基配方为：MS基本培养基，6BA 1.0mg/L，NAA 0.2mg/L，蔗糖30g/L，琼脂粉6.5g/L，pH5.6。每次使其生长一个月，再转接，转接3次。每次接种时将根和老叶切除，侧芽可切下继续培养。使所有卡特兰无菌苗大小和长势一致，达到控制变量的效果，卡特兰无菌苗只对本次试验的植物生长调节剂及有机添加物处理反应。
1.2.1 植物生长调节剂对卡特兰无菌苗增殖和生根的影响
选择长势一致、健壮无污染的卡特兰无菌苗，切除根、侧芽及老叶后分别接种在试验设置的含有不同植物生长调节剂种类的培养基上，每种植物生长调节剂分别设置不同的浓度梯度。培养基其他成分如下：MS基本培养基，蔗糖30g/L，琼脂粉6.5g/L，pH5.6。试验设置的植物生长调节剂种类及其浓度的处理如下：细胞分裂素类：6BA（6苄基腺嘌呤）0，0.5，1.0，1.5，2.0，2.5，3.0 mg/L；2ip（异戊烯基腺嘌呤）0.5，1.0，1.5，2.0，2.5，3.0 mg/L；KT（激动素）0.05，0.10，0.15，0.20，0.25 mg/L。生长素类：IBA（吲哚丁酸）0.1，0.2，0.3，0.4，0.5，0.6，0.7 mg/L；NAA（萘乙酸）0.05，0.10，0.15，0.20，0.25，0.30 mg/L；IAA（吲哚乙酸）0.1，0.2，0.3，0.4，0.5 mg/L。
每种植物生长调节剂的每个浓度处理均配制3份培养基，每份培养基上接种至少5株卡特兰无菌苗。放入组培室生长，2个月后进行转接，转接时统计各植物生长调节剂种类及浓度处理下无菌苗的侧芽数、侧芽长度、根数和根长度。通过数据分析，得到适宜卡特兰增殖和生根的细胞分裂素和生长素种类及浓度。
1.2.2 有机添加物对卡特兰无菌苗增殖和生根的影响
以筛选的卡特兰无菌苗增殖培养基和生根培养基为基础，进一步添加有机物椰子汁。选择长势一致、健壮的卡特兰无菌苗，切除根、侧芽及老叶后分别接种试验设置的含有不同浓度有机添加物的增殖培养基和生根培养基上。试验设置的有机添加物浓度处理为50，100，150，200，250 mL/L。
培养基其他成分如下：MS基本培养基，蔗糖30g/L，琼脂粉6.5g/L，pH5.6。每个有机添加物的浓度处理均配制3份培养基，每份培养基上接种至少5株卡特兰无菌苗。放入组培室生长，2个月后进行转接，转接时统计各浓度处理下无菌苗的侧芽数、侧芽长度、根数和根长度。通过数据分析，得到适宜卡特兰增殖和生根的有机添加物浓度，并以此得出最适宜卡特兰无菌苗增殖培养和生根培养的培养基条件。
2 结果与分析
2.1 不同细胞分裂素种类和浓度对卡特兰侧芽增殖和生长的影响
表1 不同细胞分裂素种类和浓度对卡特兰增殖的影响
Table 1 Effects of different cytokinins on the proliferation of Cattleya hybrid
细胞分裂素
平均侧芽数
平均侧芽
长度（cm）
最长侧芽
长度（cm）
增殖系数
种类
浓度（mg/L）
6BA
0.0
1.50
1.15
1.23
1.50e
0.5
1.67
1.16
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