卡特兰类原球茎液体增殖及分化条件研究
摘要：以长势旺盛、大小均匀的卡特兰杂交后代类原球茎和无菌苗为材料，对其离体组织液体增殖及分化条件进行观察和研究。结果表明，激素、有机添加物的种类和浓度对其增殖及分化有着不同影响：在类原球茎增殖阶段，试验比较了不同种类及浓度的细胞分裂素（6-BA、KT、2iP）和不同浓度椰汁对卡特兰类原球茎增殖的影响，结果表明以6-BA 0.4mg/L和椰汁100ml/L 效果最佳，培养25d后增殖系数分别为2.41、2.28；试验比较了不同浓度NAA和IBA对卡特兰无菌苗生根的影响，以NAA0.2mg/L为宜；添加不同浓度的椰汁对卡特兰丛芽生长影响不同，以150ml/L椰汁最佳，培养30d后平均鲜重增加669.64%。研究结果对卡特兰种苗快繁及育种研究提供了参考。
目录
摘要 5
关键词 5
Abstract 5
Key words 5
1 材料与方法 6
1．1 试验材料 6
1． 2 试验方法 6
1．2．1 不同细胞分裂素浓度对卡特兰类原球茎增殖的影响 6
1．2．2 不同椰汁浓度对卡特兰类原球茎增殖的影响 6
1．2．3 不同浓度生长素对卡特兰无菌苗生根的影响 7
1．2．4 不同椰汁浓度对卡特兰丛芽生长的影响 7
1．3 数据处理 7
2 结果与分析 7
2．1 不同浓度细胞分裂素和生长素对卡特兰类原球茎增殖的影响 7
2．2 不同椰汁浓度对卡特兰类原球茎增殖的影响 8
2．3 不同浓度生长素对卡特兰无菌苗生根的影响 9
2．4 不同浓度椰汁对卡特兰丛芽生长的影响 9
3 讨论 10
致谢 11
参考文献： 12
附录A 缩略词（Abbreviations）: 11
图1 不同细胞分裂素对卡特兰类原球茎增殖的影响 8
图2 不同浓度椰汁对卡特兰丛芽生长的影响 10
表1 不同浓度细胞分裂素对卡特兰类原球茎增殖的影响 8
表2 不同椰汁浓度对卡特兰类原球茎增殖的影响 9
表3
*好棒文|www.hbsrm.com +Q: ^3^5^1^9^1^6^0^7^2^*
不同浓度NAA和IBA对卡特兰无菌苗生根效果的影响 9
表4 不同浓度椰汁对卡特兰丛芽生长的影响 10
卡特兰类原球茎液体增殖及分化条件研究
引言
卡特兰（Cattleya）为兰科（Orchidaceae）卡特兰属（Cattleya）植物，卡特兰属是兰科800多个天然属之一，属附生兰类，全球共约野生 原种65个，全部原产于中南美洲的热带和亚热带地区，广泛分布于哥伦比亚和巴西，附生于林中大树或石壁上[1]。其花色五彩斑斓、花型硕大多姿、气息芬芳可人、颜色丰富多彩，有“热带兰之王”、“兰花皇后”、“洋兰之王”等美称，深受全世界人的喜爱，国家元首互相访问、新婚喜庆的捧花、贵宾胸花等都将其作为首选之花。哥伦比亚、巴西、哥斯达黎加等国均以卡特兰为国花[2]。
卡特兰是洋兰中花器官最大，造型奇特，色彩艳丽的一个属类，有较高的观赏价值与经济价值，利用组织培养的方法, 可对其进行大量快速繁殖。在国外，Adelberg[3]、Sai Prasad[4]、Peak[5]等对卡特兰的组织培养进行了研究。近年来，国内外研究者对卡特兰的组织培养技术也开展了许多研究。研究者采用无菌小苗[6]、种子[7 10]、根蔸[10]、根段[11]、茎段[3, 13]、茎尖[1015]、茎节[12]、叶片[12]、花梗腋芽[6]（不带花梗组织, 仅取腋芽）、茎尖腋芽[16]等诱导形成愈伤组织、丛生芽或类原球茎，进一步诱导芽的分化和根的形成，进而形成完整分生苗实现卡特兰的离体快繁。国内许多研究学者在改进培养基，提高组培快繁效率等方面开展了较多工作，这些研究主要以固体培养的方式进行相关研究，而液体培养鲜有报道。
相比较于传统的固体培养，液体培养更适宜于外植体吸收养分，增殖和生长效果显著，本文对卡特兰类原球茎的液体增殖及分化条件进行了研究，旨在建立高效卡特兰离体快繁条件，为卡特兰优质种苗生产及育种研究提供有效参考。
材料与方法
1．1 试验材料
取卡特兰杂交果荚无菌播种，待种子萌发并形成类原球茎后，选取生长健壮、长势一致、半透明状浅绿色的类原球茎，切除已分化出芽的部分后，作为液体增殖条件的试验材料，另一部分类原球茎用于分化培养丛芽、无菌苗，用于分化和生长试验的材料。
1． 2 试验方法
1．2．1 不同细胞分裂素浓度对卡特兰类原球茎增殖的影响
选取生长健壮、颜色相同、长势一致的类原球茎，切除已分化出芽的部分后分别转接至含不同种类不同浓度配比的细胞分裂素的增殖培养基中。增殖培养基以MS为基本培养基，附加不同种类不同浓度的细胞分裂素：6BA（0.2、0.4、0.8mg/L）、KT （0.2、0.4、0.8mg/L）、2iP（0.2、0.4、0.8mg/L）。培养基中其他成分为：蔗糖30g/L，椰汁100ml/L。其中pH5.6，培养条件为光照强度2000lx，光周期12h/8h，温度25±2℃，采用150ml的三角瓶为液体培养容器，每瓶添加培养基50ml，每个处理3瓶，每瓶接种0.50g卡特兰类原球茎，置于转速为100 r/min摇床上无菌培养。无菌培养25d后统计类原球茎质量，并计算增殖系数。增殖系数=增殖后质量/0.50。
1．2．2 不同椰汁浓度对卡特兰类原球茎增殖的影响
选取生长健壮、颜色相同、长势一致的类原球茎，切除已分化出芽的部分后分别转接至含不同浓度椰汁的增殖培养基中。增殖培养基以MS为基本培养基，添加不同浓度的椰汁：0ml/L、50ml/L、100ml/L、150ml/L，培养基中其他成分为：蔗糖30g/L，椰汁100ml/L。其中pH5.6，培养条件为光照强度2000lx，光周期12h/8h，温度25±2℃，采用150ml的三角瓶为液体培养容器，每瓶添加培养基50ml，每个处理3瓶，每瓶接种0.50g卡特兰类原球茎，置于转速为100r/min摇床上无菌培养。无菌培养25d后观察类原球茎褐化状况，统计类原球茎质量，并计算增殖系数。增殖系数=增殖后质量/0.50。
1．2．3 不同浓度生长素对卡特兰无菌苗生根的影响
选取由类原球茎分化并在无激素培养基上培养一段时间后生长健壮、颜色相同、长势一致的卡特兰无菌苗，切除幼根后分别转接至含不同种类和不同浓度的生长素的培养基中。生根培养基以MS为基本培养基，附加不同种类和不同浓度的生长素：NAA（0.1、0.2、0.3、0.4mg/L）；IBA（0.1、0.2、0.3、0.4 mg/L）。培养基中其他成分为：蔗糖30g/L，椰汁100ml/L，琼脂5.5g/L。其中pH5.6，培养条件为光照强度2000lx，光周期12h/8h，温度25±2℃，采用240mL的培养瓶为组培容器，每瓶添加培养基50ml，每个处理接种3瓶，每瓶接种8株高度1cm左右的卡特兰无菌苗。无菌苗培养25d后，统计生根株数，每株根数及根长，并计算生根率。生根率=（生根数/8）*100%。
目录
摘要 5
关键词 5
Abstract 5
Key words 5
1 材料与方法 6
1．1 试验材料 6
1． 2 试验方法 6
1．2．1 不同细胞分裂素浓度对卡特兰类原球茎增殖的影响 6
1．2．2 不同椰汁浓度对卡特兰类原球茎增殖的影响 6
1．2．3 不同浓度生长素对卡特兰无菌苗生根的影响 7
1．2．4 不同椰汁浓度对卡特兰丛芽生长的影响 7
1．3 数据处理 7
2 结果与分析 7
2．1 不同浓度细胞分裂素和生长素对卡特兰类原球茎增殖的影响 7
2．2 不同椰汁浓度对卡特兰类原球茎增殖的影响 8
2．3 不同浓度生长素对卡特兰无菌苗生根的影响 9
2．4 不同浓度椰汁对卡特兰丛芽生长的影响 9
3 讨论 10
致谢 11
参考文献： 12
附录A 缩略词（Abbreviations）: 11
图1 不同细胞分裂素对卡特兰类原球茎增殖的影响 8
图2 不同浓度椰汁对卡特兰丛芽生长的影响 10
表1 不同浓度细胞分裂素对卡特兰类原球茎增殖的影响 8
表2 不同椰汁浓度对卡特兰类原球茎增殖的影响 9
表3
*好棒文|www.hbsrm.com +Q: ^3^5^1^9^1^6^0^7^2^*
不同浓度NAA和IBA对卡特兰无菌苗生根效果的影响 9
表4 不同浓度椰汁对卡特兰丛芽生长的影响 10
卡特兰类原球茎液体增殖及分化条件研究
引言
卡特兰（Cattleya）为兰科（Orchidaceae）卡特兰属（Cattleya）植物，卡特兰属是兰科800多个天然属之一，属附生兰类，全球共约野生 原种65个，全部原产于中南美洲的热带和亚热带地区，广泛分布于哥伦比亚和巴西，附生于林中大树或石壁上[1]。其花色五彩斑斓、花型硕大多姿、气息芬芳可人、颜色丰富多彩，有“热带兰之王”、“兰花皇后”、“洋兰之王”等美称，深受全世界人的喜爱，国家元首互相访问、新婚喜庆的捧花、贵宾胸花等都将其作为首选之花。哥伦比亚、巴西、哥斯达黎加等国均以卡特兰为国花[2]。
卡特兰是洋兰中花器官最大，造型奇特，色彩艳丽的一个属类，有较高的观赏价值与经济价值，利用组织培养的方法, 可对其进行大量快速繁殖。在国外，Adelberg[3]、Sai Prasad[4]、Peak[5]等对卡特兰的组织培养进行了研究。近年来，国内外研究者对卡特兰的组织培养技术也开展了许多研究。研究者采用无菌小苗[6]、种子[7 10]、根蔸[10]、根段[11]、茎段[3, 13]、茎尖[1015]、茎节[12]、叶片[12]、花梗腋芽[6]（不带花梗组织, 仅取腋芽）、茎尖腋芽[16]等诱导形成愈伤组织、丛生芽或类原球茎，进一步诱导芽的分化和根的形成，进而形成完整分生苗实现卡特兰的离体快繁。国内许多研究学者在改进培养基，提高组培快繁效率等方面开展了较多工作，这些研究主要以固体培养的方式进行相关研究，而液体培养鲜有报道。
相比较于传统的固体培养，液体培养更适宜于外植体吸收养分，增殖和生长效果显著，本文对卡特兰类原球茎的液体增殖及分化条件进行了研究，旨在建立高效卡特兰离体快繁条件，为卡特兰优质种苗生产及育种研究提供有效参考。
材料与方法
1．1 试验材料
取卡特兰杂交果荚无菌播种，待种子萌发并形成类原球茎后，选取生长健壮、长势一致、半透明状浅绿色的类原球茎，切除已分化出芽的部分后，作为液体增殖条件的试验材料，另一部分类原球茎用于分化培养丛芽、无菌苗，用于分化和生长试验的材料。
1． 2 试验方法
1．2．1 不同细胞分裂素浓度对卡特兰类原球茎增殖的影响
选取生长健壮、颜色相同、长势一致的类原球茎，切除已分化出芽的部分后分别转接至含不同种类不同浓度配比的细胞分裂素的增殖培养基中。增殖培养基以MS为基本培养基，附加不同种类不同浓度的细胞分裂素：6BA（0.2、0.4、0.8mg/L）、KT （0.2、0.4、0.8mg/L）、2iP（0.2、0.4、0.8mg/L）。培养基中其他成分为：蔗糖30g/L，椰汁100ml/L。其中pH5.6，培养条件为光照强度2000lx，光周期12h/8h，温度25±2℃，采用150ml的三角瓶为液体培养容器，每瓶添加培养基50ml，每个处理3瓶，每瓶接种0.50g卡特兰类原球茎，置于转速为100 r/min摇床上无菌培养。无菌培养25d后统计类原球茎质量，并计算增殖系数。增殖系数=增殖后质量/0.50。
1．2．2 不同椰汁浓度对卡特兰类原球茎增殖的影响
选取生长健壮、颜色相同、长势一致的类原球茎，切除已分化出芽的部分后分别转接至含不同浓度椰汁的增殖培养基中。增殖培养基以MS为基本培养基，添加不同浓度的椰汁：0ml/L、50ml/L、100ml/L、150ml/L，培养基中其他成分为：蔗糖30g/L，椰汁100ml/L。其中pH5.6，培养条件为光照强度2000lx，光周期12h/8h，温度25±2℃，采用150ml的三角瓶为液体培养容器，每瓶添加培养基50ml，每个处理3瓶，每瓶接种0.50g卡特兰类原球茎，置于转速为100r/min摇床上无菌培养。无菌培养25d后观察类原球茎褐化状况，统计类原球茎质量，并计算增殖系数。增殖系数=增殖后质量/0.50。
1．2．3 不同浓度生长素对卡特兰无菌苗生根的影响
选取由类原球茎分化并在无激素培养基上培养一段时间后生长健壮、颜色相同、长势一致的卡特兰无菌苗，切除幼根后分别转接至含不同种类和不同浓度的生长素的培养基中。生根培养基以MS为基本培养基，附加不同种类和不同浓度的生长素：NAA（0.1、0.2、0.3、0.4mg/L）；IBA（0.1、0.2、0.3、0.4 mg/L）。培养基中其他成分为：蔗糖30g/L，椰汁100ml/L，琼脂5.5g/L。其中pH5.6，培养条件为光照强度2000lx，光周期12h/8h，温度25±2℃，采用240mL的培养瓶为组培容器，每瓶添加培养基50ml，每个处理接种3瓶，每瓶接种8株高度1cm左右的卡特兰无菌苗。无菌苗培养25d后，统计生根株数，每株根数及根长，并计算生根率。生根率=（生根数/8）*100%。
版权保护: 本文由 hbsrm.com编辑，转载请保留链接: www.hbsrm.com/nongxue/yy/581.html
