昆虫线虫品系CM19的系统鉴定
昆虫线虫品系CM19的系统鉴定[20200614171922]
摘要：昆虫病原线虫 (Entomopathogenic nematodes，EPN) 是20世纪发展起来的一种有潜能的，安全的生物防治因子。昆虫病原线虫寄主范围广泛。对于人畜安全，不会污染环境，亦不会产生抗性，且成本低，适宜于大规模生产，使用方便。目前已广泛应用于农林害虫的防治中。本研究采用大蜡螟幼虫诱捕线虫的方法，从土样中分离出1株昆虫病原线虫品系CM19。提取 CM19的基因组总DNA，利用通用引物扩增其18S rDNA序列。序列测定后进行同源比对，结果表明CM19与Oscheius的亲缘关系最近，18 rDNA的最高同源性为97%。基于对CM19的形态学观察发现，CM19的形态特征与Oscheius属线虫的特征有一定差异，如虫体较小、有两个咽等。结合CM19的形态学结构和18S rDNA系统发育树的构建，确认新分离的线虫为CM19为Oscheius属的一个新种。
*好棒文|www.hbsrm.com +Q: ^3^5`1^9`1^6^0`7^2#
关键字:昆虫病原线虫；CM19；系统分类；生物防治
目录
摘要 3
关键词 3
Abstract 3
Key words 3
引言 5
1 材料与方法 6
1．1 实验材料 6
1．2 线虫的分离 6
1．2．1 线虫的分离 6
1．2．2 线虫的繁育 6
1．3 线虫的形态学观察 6
1．3．1 光学显微镜下线虫形态结构的观察与测定 6
1.3.1.1线虫收集： 6
1.3.1.2试剂 6
1.3.1.3线虫处理 6
1.3.1.4临时标本的制作 7
1.3.1.5永久标本的制作 7
1.3.2 扫描电镜下线虫形态观察 7
1．4 线虫的分子学鉴定 7
1．4．1 光学显微线虫18rDNA扩增 7
1.4.1.1 PCR用线虫样品的处理 8
1.4.1.2 PCR扩增线虫18S rDNA基因 8
1.4.1.3 PCR扩增产物琼脂糖凝胶电泳纯化 9
1.4.1.4 DNA的纯化-按照试剂盒说明 9
1.4.1.5 DNA片段测序 10
1.4.2 序列分析和系统进化分析 10
2 结果与分析 10
2.1 线虫CM19形态测量特征 10
2.2 光学显微镜及电子显微镜下线虫形态观察 11
2.3 线虫的分子生物学分析 14
3 讨论 14
3．1 讨论 14
3．2 新分类单元描述 14
致谢 15
参考文献： 1 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: ^3^5`1^9`1^6^0`7^2#
6
附录1 符号及缩略词对照表 17
附录2 CM19测量结果 18
附录3 CM19的18s rDNA序列..19
昆虫病原线虫CM19的鉴定
摘要：昆虫病原线虫 (Entomopathogenic nematodes，EPN) 是20世纪发展起来的一种有潜能的，安全的生物防治因子。昆虫病原线虫寄主范围广泛。对于人畜安全，不会污染环境，亦不会产生抗性，且成本低，适宜于大规模生产，使用方便。目前已广泛应用于农林害虫的防治中。本研究采用大蜡螟幼虫诱捕线虫的方法，从土样中分离出1株昆虫病原线虫品系CM19。提取 CM19的基因组总DNA，利用通用引物扩增其18S rDNA序列。序列测定后进行同源比对，结果表明CM19与Oscheius的亲缘关系最近，18 rDNA的最高同源性为97%。基于对CM19的形态学观察发现，CM19的形态特征与Oscheius属线虫的特征有一定差异，如虫体较小、有两个咽等。结合CM19的形态学结构和18S rDNA系统发育树的构建，确认新分离的线虫为CM19为Oscheius属的一个新种。
*好棒文|www.hbsrm.com +Q: ^3^5`1^9`1^6^0`7^2#
关键字:昆虫病原线虫；CM19；系统分类；生物防治
目录
摘要 3
关键词 3
Abstract 3
Key words 3
引言 5
1 材料与方法 6
1．1 实验材料 6
1．2 线虫的分离 6
1．2．1 线虫的分离 6
1．2．2 线虫的繁育 6
1．3 线虫的形态学观察 6
1．3．1 光学显微镜下线虫形态结构的观察与测定 6
1.3.1.1线虫收集： 6
1.3.1.2试剂 6
1.3.1.3线虫处理 6
1.3.1.4临时标本的制作 7
1.3.1.5永久标本的制作 7
1.3.2 扫描电镜下线虫形态观察 7
1．4 线虫的分子学鉴定 7
1．4．1 光学显微线虫18rDNA扩增 7
1.4.1.1 PCR用线虫样品的处理 8
1.4.1.2 PCR扩增线虫18S rDNA基因 8
1.4.1.3 PCR扩增产物琼脂糖凝胶电泳纯化 9
1.4.1.4 DNA的纯化-按照试剂盒说明 9
1.4.1.5 DNA片段测序 10
1.4.2 序列分析和系统进化分析 10
2 结果与分析 10
2.1 线虫CM19形态测量特征 10
2.2 光学显微镜及电子显微镜下线虫形态观察 11
2.3 线虫的分子生物学分析 14
3 讨论 14
3．1 讨论 14
3．2 新分类单元描述 14
致谢 15
参考文献： 1 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: ^3^5`1^9`1^6^0`7^2#
6
附录1 符号及缩略词对照表 17
附录2 CM19测量结果 18
附录3 CM19的18s rDNA序列..19
昆虫病原线虫CM19的鉴定
版权保护: 本文由 hbsrm.com编辑，转载请保留链接: www.hbsrm.com/swgc/smkx/483.html
