紫色不结球白菜花色苷成分分析及其抗氧化性测定
摘要：以紫色不结球白菜为原材料，用水提取法和凝胶层析法从紫色白菜中提取纯化花色苷，采用高效液相色谱法对其进行成分分析，并以Vc作对照物质，对其抗氧化性进行研究。结果表明，紫色不结球白菜花色苷抗氧化性良好，其总还原力与浓度呈显著的正相关性，对超氧阴离子自由基、羟基自由基、DPPH?自由基都有良好的清除效果。表明每100μg紫色不结球白菜花色苷的总还原力与80μgVc相当，羟基清除率与25μgVc相当，超氧阴离子清除率与18μgVc基本一致，对DPPH?的清除效果在浓度高于25μg·g-1后强于Vc，而本研究中紫色不结球白菜叶片中花色苷的总含量为51.63μg·g-1，在这一浓度下，花色苷对DPPH?的清除效果可以达到60%以上，高于Vc清除效果。可见，紫色不结球白菜花色苷是良好的自由基清除剂，抗氧化能力与其含量密切相关。
目录
摘要 1
关键词 1
Abstract 1
Key words 1
0引言 1
1 材料与方法 2
1.1 材料与处理 2
1.2 测定方法 2
2 结果与分析 3
2.1 紫色不结球白菜花色苷组分测定 3
2.2 紫色不结球白菜花色苷的抗氧化性 5
2.2.1 紫色不结球白菜花色苷总还原力 5
2.2.2 紫色不结球白菜花色苷 O2清除率 6
2.2.3 紫色不结球白菜花色苷OH清除率 6
2.2.4 紫色不结球白菜花色苷DPPH清除率 7
3 讨论 7
3.1 紫色不结球白菜花色苷的组成成分 7
3.2 紫色不结球白菜花色苷的抗氧化性 7
3.2.1 紫色不结球白菜花色苷总还原力 7
3.2.2 紫色不结球白菜花色苷 O2清除率 8
3.2.3 紫色不结球白菜花色苷OH清除率 8
3.2.4 紫色不结球白菜花色苷DPPH清除率 8
4 结论 8
致谢 8
参考文献 9
图 1 紫色不结球白菜花色苷HPLC图谱（各波峰所代表的物质见表1） 3
*好棒文|www.hbsrm.com +Q: *351916072*
图2 峰1的碎片离子（MS）图和碎片离子（MS/MS）图 3
图3紫色不结球白菜花色苷总还原力 5
图4紫色不结球白菜花色苷O2清除率 5
图5 紫色不结球白菜花色苷OH清除率 6
图6 紫色不结球白菜花色苷DPPH清除率 6
表1 紫色不结球白菜中主要的花色苷组分及含量 3
紫色不结球白菜花色苷成分及其抗氧化性分析
引言
引言
十字花科芸薹属不结球白菜(Brassica campestris ssp. chinensis Makino)，俗名为小白菜、青菜。人们生活质量的不断提高，对养生保健的注重水平也愈来愈明显，当前，在保健和抗衰老方面，彩色蔬菜如紫色蔬菜、黑色蔬菜等的功用逐步深入人心，被人们接受认同。据有关报道，蔬菜的颜色越深，其营养成分含量就越丰富[1]，因此人们越来越多地关注彩色蔬菜。近年来，紫色不结球白菜是非常受大众欢迎的特色蔬菜之一，紫色叶片，含量丰富的花色苷类物质，是获取天然花色苷的重要原材料之一。
植物呈现各种色彩离不开花色苷的作用，不仅如此，花色苷还可以为人体健康提供许多有利条件。花色苷是一种抗氧化剂且其抗氧化效能强大。它能使血管弹性提高，血液循环得以改善，过敏和炎症得到有效抑制等，同时，还可以使自由基在人体内得以有效清除，以免人体受到损害，起到保护的效果[2]。因此，目前开发研究热点之一是花色苷新资源地挖掘、花色苷的资源库地更新充实。
研究有关果蔬花色苷的报道较多[34]，如紫甘蓝、蓝莓等，而对于研究紫色不结球白菜花色苷的报道很少，李长新等曾研究了紫色不结球白菜“紫罗兰”的花色苷组分，鉴定得到矢车菊素丙二酰葡萄糖苷[5]为其花色苷的主要组成成分，但紫色不结球白菜品种不同，其花色苷组分也具有一定差异。大批研究表明：花色苷抗氧化作用强，对清除体内自由基，降低氧化酶活性有很明显的成效，对于高血脂大鼠、低密度脂蛋白，能够降低甘油脂水平，胆固醇含量，此外，有利于高甘油脂脂蛋白的分解代谢的改善，抑制胆固醇吸收，保护胃粘膜。同时，还具有抗肿瘤、抗过敏、抗突变功能[6]。花色苷吸收紫外光的功用成效好，在人体内起着紫外屏障的作用，有利于细胞分化等生物学过程的正常进行，同时能够有效预防冠心病和心肌缺血、治疗循环紊乱和心绞痛延缓癌细胞的生长。国内外在钻研紫色不结球白菜中的花色苷方面相较于浆果中的花色苷较少，国外以前有对于纯化紫色不结球白菜花色苷的报导。
植物的种类对花色苷种类有极其大的影响,此外品种不同，花色苷的种类、数量还深受其之间的影响。本试验的材料‘紫冠1号’，是一种紫色不结球白菜，杂交一代种，其叶片平展，正面呈紫色且有光泽，背面绿色，花色苷含量丰富。本试验采取高效液相色谱法与质谱法联用来分析紫色不结球白菜各个组分，推测花色苷结构，旨在为紫色不结球白菜的育种与品质改良提供方法与技术支持，以期可以为丰富花青素资源库，探索花色苷新资源提供有关数据。最后研究紫色不结球白菜的抗氧化能力，进一步为紫色不结球白菜色素的开发利用提供有关理论支撑。
1 材料与方法
1.1 材料与处理
紫色不结球白菜种植于大学校区塑料大棚内。待其成熟摘叶洗净剪碎用乙醇法萃取其花色苷得到花色苷的粗提液，凝胶层析法进一步分离纯化得到紫色不结球白菜花色苷溶液[7]。
采用高效液相色谱法[8]鉴定花色苷组成成分，以1mg矢车菊3，5双葡萄糖苷为标样，测定得到的值相当于单位原料质量（鲜重）中花色苷的含量。
凝胶分离样品组分，测定花色苷各个单体的百分率。
测定花色苷清除率时，将花色苷溶液和分析纯的Vc分别配制成一定浓度的待测样品，根据需要测的抗氧化性配制相关待测溶液，在指定波长下测定其吸光度，每组样品重复3次，并以抗坏血酸作为对照。根据每种抗氧化性相关公式算出其清除率，绘制花色苷浓度与清除率的关系曲线。
1.2 测定方法
在适宜的条件下栽培紫色不结球白菜，长成后对其进行花色苷提取及分离纯化，进而测定花色苷组成成分。同时配比不同浓度花色苷，测定总还原力及其对O2清除率、OH清除率和DPPH清除率等。
生长指标：直尺、游标卡尺、天枰测量；
花色苷提取、初步纯化：甲醇提法提取纯化；
进一步分离纯化：凝胶层析法；
花色苷组成成分：高效液相色谱法鉴定其成分；
花色苷抗氧化性测定：(用普鲁士蓝法测定其总还原力[9]；(邻苯三酚自氧化法测定O2清除率[10]；(用水杨酸捕捉羟自由基的方法测定OH清除率[11]；④用DPPH法测定DPPH清除率[12]。
试验数据选用Microsoft Excel 2007软件进行绘图。
目录
摘要 1
关键词 1
Abstract 1
Key words 1
0引言 1
1 材料与方法 2
1.1 材料与处理 2
1.2 测定方法 2
2 结果与分析 3
2.1 紫色不结球白菜花色苷组分测定 3
2.2 紫色不结球白菜花色苷的抗氧化性 5
2.2.1 紫色不结球白菜花色苷总还原力 5
2.2.2 紫色不结球白菜花色苷 O2清除率 6
2.2.3 紫色不结球白菜花色苷OH清除率 6
2.2.4 紫色不结球白菜花色苷DPPH清除率 7
3 讨论 7
3.1 紫色不结球白菜花色苷的组成成分 7
3.2 紫色不结球白菜花色苷的抗氧化性 7
3.2.1 紫色不结球白菜花色苷总还原力 7
3.2.2 紫色不结球白菜花色苷 O2清除率 8
3.2.3 紫色不结球白菜花色苷OH清除率 8
3.2.4 紫色不结球白菜花色苷DPPH清除率 8
4 结论 8
致谢 8
参考文献 9
图 1 紫色不结球白菜花色苷HPLC图谱（各波峰所代表的物质见表1） 3
*好棒文|www.hbsrm.com +Q: *351916072*
图2 峰1的碎片离子（MS）图和碎片离子（MS/MS）图 3
图3紫色不结球白菜花色苷总还原力 5
图4紫色不结球白菜花色苷O2清除率 5
图5 紫色不结球白菜花色苷OH清除率 6
图6 紫色不结球白菜花色苷DPPH清除率 6
表1 紫色不结球白菜中主要的花色苷组分及含量 3
紫色不结球白菜花色苷成分及其抗氧化性分析
引言
引言
十字花科芸薹属不结球白菜(Brassica campestris ssp. chinensis Makino)，俗名为小白菜、青菜。人们生活质量的不断提高，对养生保健的注重水平也愈来愈明显，当前，在保健和抗衰老方面，彩色蔬菜如紫色蔬菜、黑色蔬菜等的功用逐步深入人心，被人们接受认同。据有关报道，蔬菜的颜色越深，其营养成分含量就越丰富[1]，因此人们越来越多地关注彩色蔬菜。近年来，紫色不结球白菜是非常受大众欢迎的特色蔬菜之一，紫色叶片，含量丰富的花色苷类物质，是获取天然花色苷的重要原材料之一。
植物呈现各种色彩离不开花色苷的作用，不仅如此，花色苷还可以为人体健康提供许多有利条件。花色苷是一种抗氧化剂且其抗氧化效能强大。它能使血管弹性提高，血液循环得以改善，过敏和炎症得到有效抑制等，同时，还可以使自由基在人体内得以有效清除，以免人体受到损害，起到保护的效果[2]。因此，目前开发研究热点之一是花色苷新资源地挖掘、花色苷的资源库地更新充实。
研究有关果蔬花色苷的报道较多[34]，如紫甘蓝、蓝莓等，而对于研究紫色不结球白菜花色苷的报道很少，李长新等曾研究了紫色不结球白菜“紫罗兰”的花色苷组分，鉴定得到矢车菊素丙二酰葡萄糖苷[5]为其花色苷的主要组成成分，但紫色不结球白菜品种不同，其花色苷组分也具有一定差异。大批研究表明：花色苷抗氧化作用强，对清除体内自由基，降低氧化酶活性有很明显的成效，对于高血脂大鼠、低密度脂蛋白，能够降低甘油脂水平，胆固醇含量，此外，有利于高甘油脂脂蛋白的分解代谢的改善，抑制胆固醇吸收，保护胃粘膜。同时，还具有抗肿瘤、抗过敏、抗突变功能[6]。花色苷吸收紫外光的功用成效好，在人体内起着紫外屏障的作用，有利于细胞分化等生物学过程的正常进行，同时能够有效预防冠心病和心肌缺血、治疗循环紊乱和心绞痛延缓癌细胞的生长。国内外在钻研紫色不结球白菜中的花色苷方面相较于浆果中的花色苷较少，国外以前有对于纯化紫色不结球白菜花色苷的报导。
植物的种类对花色苷种类有极其大的影响,此外品种不同，花色苷的种类、数量还深受其之间的影响。本试验的材料‘紫冠1号’，是一种紫色不结球白菜，杂交一代种，其叶片平展，正面呈紫色且有光泽，背面绿色，花色苷含量丰富。本试验采取高效液相色谱法与质谱法联用来分析紫色不结球白菜各个组分，推测花色苷结构，旨在为紫色不结球白菜的育种与品质改良提供方法与技术支持，以期可以为丰富花青素资源库，探索花色苷新资源提供有关数据。最后研究紫色不结球白菜的抗氧化能力，进一步为紫色不结球白菜色素的开发利用提供有关理论支撑。
1 材料与方法
1.1 材料与处理
紫色不结球白菜种植于大学校区塑料大棚内。待其成熟摘叶洗净剪碎用乙醇法萃取其花色苷得到花色苷的粗提液，凝胶层析法进一步分离纯化得到紫色不结球白菜花色苷溶液[7]。
采用高效液相色谱法[8]鉴定花色苷组成成分，以1mg矢车菊3，5双葡萄糖苷为标样，测定得到的值相当于单位原料质量（鲜重）中花色苷的含量。
凝胶分离样品组分，测定花色苷各个单体的百分率。
测定花色苷清除率时，将花色苷溶液和分析纯的Vc分别配制成一定浓度的待测样品，根据需要测的抗氧化性配制相关待测溶液，在指定波长下测定其吸光度，每组样品重复3次，并以抗坏血酸作为对照。根据每种抗氧化性相关公式算出其清除率，绘制花色苷浓度与清除率的关系曲线。
1.2 测定方法
在适宜的条件下栽培紫色不结球白菜，长成后对其进行花色苷提取及分离纯化，进而测定花色苷组成成分。同时配比不同浓度花色苷，测定总还原力及其对O2清除率、OH清除率和DPPH清除率等。
生长指标：直尺、游标卡尺、天枰测量；
花色苷提取、初步纯化：甲醇提法提取纯化；
进一步分离纯化：凝胶层析法；
花色苷组成成分：高效液相色谱法鉴定其成分；
花色苷抗氧化性测定：(用普鲁士蓝法测定其总还原力[9]；(邻苯三酚自氧化法测定O2清除率[10]；(用水杨酸捕捉羟自由基的方法测定OH清除率[11]；④用DPPH法测定DPPH清除率[12]。
试验数据选用Microsoft Excel 2007软件进行绘图。
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