铅污染土壤修复植物的产后处理

铅污染土壤修复植物的产后处理[20200614171408]
摘要:铝毒是酸性土壤中限制作物产量的主要因素,植物在长期适应酸性土壤过程中发展出了多种应对铝胁迫的解毒机制。荞麦是一个铝超积累及高耐铝的作物,但它吸收铝的分子机制还不清楚。水稻Nramp家族中的Nrat1被证明能够将铝转运到细胞内,然后定位在液泡膜上的液泡ABC 转运蛋白OsALS1会将铝运进液泡,实现铝的区室化,从而有效抵抗铝毒危害。研究旨在验证Nrat1在荞麦中的同源基因是否参与铝的吸收,这对解析荞麦吸收、积累铝机制具有重要意义。实验室对荞麦的转录组进行了深度测序,通过序列的比对分析,获得几个OsNrat1的同源基因,选择其中三个同源性较高的基因FtNRL1、FtNRL2和FtNRL3,然后进一步利用RT-PCR技术测定基因的相对表达,利用酵母异源系统研究基因的铝转运活性。结果表明,铝胁迫处理对FtNRL1、 FtNRL3的相对表达影响不明显,FtNRL2相对表达则显著下调,且剂量浓度实验显示随着铝离子浓度的增加抑制作用愈加强烈。不同金属离子处理实验表明FtNRL2相对表达受铝、镧三价离子抑制,不受铜、镉二价离子的影响。载体构建已经完成,下一步将研究FtNRL2在酵母中铝转运活性。
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关键字:铝毒;OsNrat1;荞麦;同源基因;功能研究
目录
摘要3
关键词3
Abstract3
Key words3
1引言4
2材料与方法5
2.1材料 5
2.2荞麦水培 6
2.3基因全长扩增6
2.4根部铝剂量浓度实验6
2.5不同金属溶液处理实验7
2.6载体构建与鉴定7
2.7测序8
2.8酵母转质粒8
2.9铝转运活性实验8
3结果与分析9
3.1基因同源性及相关表达分析9
3.2 Al剂量浓度实验9
3.3不同金属溶液处理实验10
3.4铝转运活性实验10
4讨论10
致谢11
参考文献11
铝转运基因OsNRAT1在荞麦中同源基因的克隆及功能解析
国家生命科学与技术人才培养基地 李宇聪

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