砷抗性细菌的筛选及其植物促生特性的研究
：砷是一种对动植物以及人类危害极大的重金属污染物，利用生物方法对砷污染土壤进行修复备受关注。从矿区采集土壤样品，经过分离筛选从中得到232株具有砷抗性的细菌，对这些细菌进行IAA、铁载体的快速测定，获得19株高产IAA的菌株，26株高产铁载体的菌株，8株既高产IAA又高产铁载体的菌株。从中选取13株生长能力较强的菌株进行产IAA和铁载体的定量测定，发现菌株26产IAA浓度为0.174mg/L，产铁载体能力为+++。对菌株26进行16S rRNA基因序列分析，鉴定为β-变形菌纲(β-proteobacteria)。本研究丰富了砷抗性细菌菌种库，并能够为以后的相关研究提供一些理论与实验基础。
目录
摘要2
关键词2
Abstract2
Key words3文献综述3
引言
1材料与方法7
1.1材料 7
1.1.1 供试土壤7
1.1.2 培养基7
1.1.3 试剂7
1.2方法 7
1.2.1砷抗性细菌分离纯化与保藏 7
1.2.2菌株吲哚乙酸（IAA）产量测定7
1.2.3菌株产铁载体能力的测定8
1.2.4 高产菌株总DNA的提取8
1.2.5 菌株16S rRNA基因的扩增8
1.2.6 DNA转化过程 8
1.2.7产物验证 9
1.2.8 菌株16S rRNA基因序列分析9
1.2.9菌株系统发育关系9
2 结果与分析9
2.1 菌株分离筛选保藏的结果9
2.2十三株砷抗性细菌的IAA与铁载体的测定9
2.2.1 IAA与铁载体的快速鉴定 9
2.2.2 IAA产量浓度及产铁载体能力大小测定 10
2.3 菌株16S
*好棒文|www.hbsrm.com +Q: ￥351916072￥
rRNA基因电泳结果 11
2.4菌株系统发育关系 11
3讨论 12
致谢12
参考文献13
附录A 培养基配制14
附录B DNA测序序列结果14
附录C IAA与铁载体定性测定结果 16
附录D 快速鉴定IAA、铁载体结果 16
砷抗性细菌的筛选及其植物促生特性的研究
Screening arsenic resistant bacteria and the plant growth promoting characteristics of these bacteria
Student majoring in Bioscience
Wang Chun
Tutor Sheng Xiafang
Abstract：Arsenic is a kind of metal pollutants which is extremely harmful to plants, animals, and humans. Using biological methods to clean the soil contaminated with arsenic receives much concern. We obtained 19 IAA efficiently produced strains, 26 siderophores efficiently produced strains and 8 both of these characteristics efficiently produced strains, after collecting soil sample from arsenic mine, isolating 232 arsenic resistance strains and rapid detection of these stains plant growth promoting characteristics. Selecting 13 strains that can grow very fast to quantitatively analyse IAA and siderophores, and strain 26 can product 0.174mg/L of IAA and siderophores +++. By analysis the 16S rRNA gene sequences, we found out that strain 26 is βproteobacteria. The subject riches the strain library of the arsenic resistant and provides the foundation of experiment and theory for the later researches.
Key words: Arsenic Resistant bacteria IAA Siderophores
文献综述
1 微生物与重金属关系
1.1 微生物对重金属的影响
1.1.1 微生物对重金属的生物吸附及富集
微生物可通过带电荷的细胞表面吸附重金属离子，或通过摄取必要的营养元素主动吸收重金属离子，将重金属离子富集在细胞表面或内部 ( Beveridge，1978 ) 。Charley 和 Bull ( 1979 ) 曾用假单胞菌和金色葡萄球菌的混合物进行实验，发现干细胞可固定Ag 300 mg g1。Beveridge 和 Murray 等 ( 1978 ) 研究发现从芽孢杆菌 ( Bacillus subtilis ) 上分离下来的细胞壁可以从溶液中螯合大量的 Mg2+、Fe3+、Cu2+、Na+ 和 K+，中量的 Mn2+、Zn2+、Ca2+、Au3+ 和 Ni2+ 以及少量的 Hg2+、Sr2+、Pb2+ 和 Ag+，而 Li+、Ba2+、Co2+、Al3+ 则不被吸收, 当将细胞壁放入含氯化金的水溶液中时, 可在细胞壁上通过聚核作用形成微小晶体。
微生物将重金属吸附于自身细胞表面的方式有很多种，微生物的细胞壁富含羧基阴离子和磷酸阴离子，很容易与带正电荷的金属离子结合 ( Beveridge et al.，1995 ) 。另外微生物的细胞壁成分也使得细菌带很强的负电荷，例如革兰氏阴性细菌细胞壁中的脂多糖、革兰氏阳性细菌的磷壁酸已经真菌细胞壁中的纤维素、几丁质、葡聚糖和蛋白质等。Walker 等 ( 1989 ) 报道,在含有 5.0 mmol L1 Cu2+，Hg2+，Ni2+，Pb2+，Zn2+，Cr2+ 的硝酸盐溶液中，各种粘土矿物和细菌细胞组成吸附上述重金属离子的能力依次为细胞壁> 细胞外膜> 蒙脱石> 高岭石。粘土矿物和细菌细胞的复合体吸附这些重金属离子的能力依下列顺序降低：细胞壁 蒙脱石> 细胞壁 高岭石> 细胞外膜 蒙脱石> 细胞外膜 高岭石。这说明微生物细胞及其组分对重金属离子的吸附能力较无机组分的强，而且，重金属离子通常通过桥接两个阴离子固定在细胞壁或细胞多糖的交联网状结构上，结合紧密。
目录
摘要2
关键词2
Abstract2
Key words3文献综述3
引言
1材料与方法7
1.1材料 7
1.1.1 供试土壤7
1.1.2 培养基7
1.1.3 试剂7
1.2方法 7
1.2.1砷抗性细菌分离纯化与保藏 7
1.2.2菌株吲哚乙酸（IAA）产量测定7
1.2.3菌株产铁载体能力的测定8
1.2.4 高产菌株总DNA的提取8
1.2.5 菌株16S rRNA基因的扩增8
1.2.6 DNA转化过程 8
1.2.7产物验证 9
1.2.8 菌株16S rRNA基因序列分析9
1.2.9菌株系统发育关系9
2 结果与分析9
2.1 菌株分离筛选保藏的结果9
2.2十三株砷抗性细菌的IAA与铁载体的测定9
2.2.1 IAA与铁载体的快速鉴定 9
2.2.2 IAA产量浓度及产铁载体能力大小测定 10
2.3 菌株16S
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rRNA基因电泳结果 11
2.4菌株系统发育关系 11
3讨论 12
致谢12
参考文献13
附录A 培养基配制14
附录B DNA测序序列结果14
附录C IAA与铁载体定性测定结果 16
附录D 快速鉴定IAA、铁载体结果 16
砷抗性细菌的筛选及其植物促生特性的研究
Screening arsenic resistant bacteria and the plant growth promoting characteristics of these bacteria
Student majoring in Bioscience
Wang Chun
Tutor Sheng Xiafang
Abstract：Arsenic is a kind of metal pollutants which is extremely harmful to plants, animals, and humans. Using biological methods to clean the soil contaminated with arsenic receives much concern. We obtained 19 IAA efficiently produced strains, 26 siderophores efficiently produced strains and 8 both of these characteristics efficiently produced strains, after collecting soil sample from arsenic mine, isolating 232 arsenic resistance strains and rapid detection of these stains plant growth promoting characteristics. Selecting 13 strains that can grow very fast to quantitatively analyse IAA and siderophores, and strain 26 can product 0.174mg/L of IAA and siderophores +++. By analysis the 16S rRNA gene sequences, we found out that strain 26 is βproteobacteria. The subject riches the strain library of the arsenic resistant and provides the foundation of experiment and theory for the later researches.
Key words: Arsenic Resistant bacteria IAA Siderophores
文献综述
1 微生物与重金属关系
1.1 微生物对重金属的影响
1.1.1 微生物对重金属的生物吸附及富集
微生物可通过带电荷的细胞表面吸附重金属离子，或通过摄取必要的营养元素主动吸收重金属离子，将重金属离子富集在细胞表面或内部 ( Beveridge，1978 ) 。Charley 和 Bull ( 1979 ) 曾用假单胞菌和金色葡萄球菌的混合物进行实验，发现干细胞可固定Ag 300 mg g1。Beveridge 和 Murray 等 ( 1978 ) 研究发现从芽孢杆菌 ( Bacillus subtilis ) 上分离下来的细胞壁可以从溶液中螯合大量的 Mg2+、Fe3+、Cu2+、Na+ 和 K+，中量的 Mn2+、Zn2+、Ca2+、Au3+ 和 Ni2+ 以及少量的 Hg2+、Sr2+、Pb2+ 和 Ag+，而 Li+、Ba2+、Co2+、Al3+ 则不被吸收, 当将细胞壁放入含氯化金的水溶液中时, 可在细胞壁上通过聚核作用形成微小晶体。
微生物将重金属吸附于自身细胞表面的方式有很多种，微生物的细胞壁富含羧基阴离子和磷酸阴离子，很容易与带正电荷的金属离子结合 ( Beveridge et al.，1995 ) 。另外微生物的细胞壁成分也使得细菌带很强的负电荷，例如革兰氏阴性细菌细胞壁中的脂多糖、革兰氏阳性细菌的磷壁酸已经真菌细胞壁中的纤维素、几丁质、葡聚糖和蛋白质等。Walker 等 ( 1989 ) 报道,在含有 5.0 mmol L1 Cu2+，Hg2+，Ni2+，Pb2+，Zn2+，Cr2+ 的硝酸盐溶液中，各种粘土矿物和细菌细胞组成吸附上述重金属离子的能力依次为细胞壁> 细胞外膜> 蒙脱石> 高岭石。粘土矿物和细菌细胞的复合体吸附这些重金属离子的能力依下列顺序降低：细胞壁 蒙脱石> 细胞壁 高岭石> 细胞外膜 蒙脱石> 细胞外膜 高岭石。这说明微生物细胞及其组分对重金属离子的吸附能力较无机组分的强，而且，重金属离子通常通过桥接两个阴离子固定在细胞壁或细胞多糖的交联网状结构上，结合紧密。
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