海藻糖相关酶基因的克隆与重组表达
:海藻糖是由两个葡萄糖分子在吡喃环的a,a-1,1糖苷键缩合而成的非还原性双糖,结构稳定,化学惰性,无毒性,在食品工业、医药保健行业、化妆品行业、农业科学中具有重要的应用意义。本研究采用基因工程技术,以本实验室所筛选到的细菌Aquabacterium. sp A7Y为出发菌株,扩增出海藻糖相关酶的基因序列,并在大肠杆菌中进行异源表达,成功构建海藻糖相关酶合成基因。而后,经过超声波细胞破碎仪破碎,得到海藻糖合成酶(trehalose synthase)的粗酶液,通过薄层层析定性测量海藻糖的酶活。
源于streptomycessp.cc5碱性蛋白酶基因的克隆及其在枯草芽孢杆菌中的表达
:目前碱性蛋白酶广泛应用于洗涤剂、制革、丝绸等工业上,具有不可替代的作用。该酶来源于细菌、放线菌和真菌,其中研究最广泛且最深入的是芽孢杆菌的丝氨酸蛋白酶。本文从链霉菌CC5中克隆出碱性丝氨酸蛋白酶编码基因,并将其与pMD19-T Vector酶连,经测序正确后,通过酶切和酶连与枯草芽孢杆菌质粒pMA09进行重组表达载体的构建,并将其转化到枯草芽孢杆菌WB800中,挑取阳性转化子进行PCR验证,最终获得了整合有碱性丝氨酸蛋白酶基因的重组枯草芽孢杆菌。
激发子psxeg1蛋白原核表达的摸索
:大豆疫霉(Phytophthora sojae)引起的大豆疫霉根腐病是威胁全世界大豆生产毁灭性的病害之一,每年给全世界的大豆生产带来巨大经济损失。植物先天免疫系统由两种主要的免疫反应组成,包括植物识别病原相关模式分子(pathogen/microbe-associated molecular patterns, PAMPs/MAMPs)引起的PTI(PAMP Triggered Immunity)和识别效应分子引起的ETI(Effector Triggered Immunity)。植物病原菌的病原相关模
灵芝菌丝体氧化胁迫的缓解机制研究
:本实验通过在培养基中添加乙酸使灵芝菌丝体处于氧化胁迫环境中,并通过还原剂富氢水(HRW)预处理灵芝菌丝体,缓解其氧化胁迫程度。通过检测其生长速度、丙二醛(MDA)含量、ROS、超氧化物歧化酶(SOD)与过氧化氢酶(CAT)酶活,观察菌落及菌丝球生长形态,确定富氢水对于灵芝菌丝体氧化胁迫的缓解作用。探究富氢水对灵芝菌丝体氧化胁迫的缓解机制的影响,为探究灵芝菌丝体氧化还原代谢与相关基因表达及作用的关系做了铺垫。关键字:ROS;富氢水;灵芝;氧化胁迫Study on the mechanism of alle
烟草秸秆降解菌yc2的分离鉴定及酶学特性研究
:烟草秸秆中纤维素比例较高,而纤维素可以利用生物作用转化为能源物质。本研究试图筛选出能降解烟秸秆的高效菌株,运用微生物降解解决资源的浪费问题,促进烟-稻轮作区的环境保护与生态农业持续发展。由于细菌中Bacillus subtilis、B.brevis等芽孢杆菌作为秸秆降解菌具有生长速率快、可产生降解纤维素的胞外酶等优点,近年来也被广泛研究。本研究从皖南地区烟-稻轮作田土壤里筛选了一株烟草秸秆降解菌YC-2,通过对其进行形态观察、生理生化特征鉴定以及16S rDNA测序比对及进化分析,确定YC-2为枯草芽孢
热胁迫下灵芝ros信号转导研究
:研究表明ROS既是有氧呼吸过程中产生的有毒性的副产物,也是一种信号分子。本实验以灵芝为实验材料对其进行不同时长的热击处理,研究其热表型及灵芝三萜产量变化,实验结果显示热击处理能够抑制灵芝生长,但也具有促进灵芝三萜的积累的显著作用,并且这种影响与热击后灵芝细胞内ROS的累积间存在相关性。这一研究也为进一步研究ROS在灵芝细胞内如何发挥信号转导功能打下了基础。
玉米木质部转运mirna在重金属胁迫下的表达分析
:镉(Cd2+)作为几种危害极大的的重金属之一,影响了植物个体发育中的诸多生理生化进程,严重威胁着全球的粮食生产。而越来越多的研究表明,MicroRNA(miRNA)作为一种非编码RNA(ncRNA)参与了植物体中的各种生物和非生物胁迫反应过程,其中就包括重金属毒害的应答。本文就Cd2+处理下玉米木质部转运miRNA的表达情况加以探究。我们采用经典的Trizol试剂法对玉米木质部汁液进行RNA提取,发现在木质部运输液中的确存在着miRNA,而高通量测序和荧光定量结果也均表明,在用Cd2+溶液处理后,部分木
玉米耐镉基因的筛选
:镉是一种重金属元素,过量的镉对植物的生长发育有毒害作用。玉米是我国一种重要的粮食作物,但是目前日益严重的镉污染正威胁着玉米的生长,因此对玉米耐镉性的研究成为了一个重要的课题。本课题将研究玉米耐镉基因的筛选,运用基因工程技术将玉米文库质粒转化到Δycf酵母菌株中,确定pDEST22空载的耐镉限度及具有耐镉基因的单菌落,进行菌落PCR扩增检测并送去测序,将结果进行基因Blast比对,得到具有耐镉性的基因。通过实验确定了空载耐镉浓度为50μM。通过菌落PCR跑胶检测和测序发现,得到8种可能具有耐镉性的基因,如
现生鲸目物种的系统发育分析及分歧时间估计
:鲸类的起源是哺乳动物中最典型的陆生向水生转换的演化案例。鲸目单系发生的观点已得到广泛的认可,但该目内不同科间的关系仍存争议。为探讨现存鲸类的系统进化,本研究选择3个线粒体蛋白编码基因和12个核蛋白编码基因构建出超矩阵数据集,并基于分区策略进行最大似然和贝叶斯分析,试图解析鲸目内部的科、属、种间的关系。研究结果表明齿鲸和须鲸均构成单系,抹香鲸总科是齿鲸亚目的基群,露脊鲸科是须鲸亚目的基群,形态学上的淡水豚总科为并系群。此外,本研究基于多个化石矫正点,运用贝叶斯宽松分子钟方法对现存鲸类的分歧时间进行了估算。
生物法制备乙醇研究及其现状调研
:本课题调查了广东、广西推广新能源地区生物乙醇的使用状况及生产厂家的生产方式。依据文献及调查情况选取三个对生物乙醇发酵影响较大的因素进行正交实验,确定分步糖化发酵方式和同步糖化的最优反应参数。尝试利用灵芝液态发酵制备的漆酶与纤维素酶协同酶解小麦秸秆发酵制备燃料乙醇的研究。结果表明同步糖化和分步糖化的最优反应条件均为:秸秆颗粒度40目、反应固液比为1:25、纤维素酶的添加量为3300 U/g秸秆。漆酶对小麦秸秆的预处理使小麦秸秆的糖化率提高了12.3%。漆酶与纤维素酶在同步糖化反应过程中的协同酶解使乙醇产量
用酵母双杂交探讨hops专一性亚基与细胞自噬蛋白的互作(附件)
:自噬是将胞内大分子物质通过自噬体运送到溶酶体中降解成小分子进行重新利用的途径。HOPS复合体专一性亚基缺失影响自噬体与溶酶体及内体与溶酶体的融合。HOPS复合体由六个亚基Vps11、Vps16、Vps18、Vps33、Vps39、Vps41构成,其中前四个亚基也是CORVET复合体的组成成分,只有Vps39和Vps41是HOPS复合体的专一性亚基。酵母双杂交是一种分析蛋白与蛋白相互作用非常有效的方法。为了探讨HOPS复合体参与细胞自噬的机制,本论文通过酵母双杂交来检测Vps39和Vps41与一些调控自噬