四种观赏石斛与铁皮石斛中多糖含量的对比研究(附件)
本人签名 日期 摘 要石斛为我国传统的名贵药材，具有滋阴清热、生津益胃、润肺止咳、益精补肾等功效。其中，属铁皮石斛的功效最佳。但是，目前的铁皮石斛由于种种原因，资源比较短缺。所以，本试验利用苯酚-硫酸法，对铁皮石斛和四种观赏石斛中的多糖含量进行测定，并且将测定结果进行比较和分析，为石斛药用资源的进一步扩大提供理论依据。经过试验，结果为铁皮石斛中的多糖含量为8.93%，晶帽石斛多糖含量为2.82%，飞燕石斛多糖含量为2.60%，索菲亚石斛多糖含量为1.15%，笑妍石斛多糖含量为0.86%。虽然四种观赏石斛中的多糖含量都不及铁皮石斛中的多糖含量，但目前的铁皮石斛资源紧缺，我们可以考虑将观赏石斛作为原料，提取其中的多糖，虽然量较少，但至少可以缓解铁皮石斛市场的压力，并进一步扩大石斛的药用资源。
Key words: Tin dendrobium stem; Ornamental stones welcome; Polysaccharides; Phenol sulfuric acid method 目 录
1 绪论 1
1.1 石斛简介 1
1.2 石斛中的有效成分 2
1.2.1 多糖 2
1.2.2 生物碱类 2
1.2.3 氨基酸类 2
1.2.4 微量元素 2
1.2.5 菲类化合物 3
1.3 铁皮石斛多糖的药理作用 3
1.3.1 增强机体免疫作用 3
1.3.2 抗氧化作用 3
1.3.3 降血糖作用 4
1.3.4 降血压作用 4
1.3.5 抗肿瘤作用 4
1.3.6 促进消化作用 4
1.3.7 抗疲劳作用 5
1.3.8 促进唾液分泌作用 5
1.3.9抗肝损伤作用 5
1.4铁皮石斛国内外研究现状 6
2 实验部分 7
2.1 研究目的 7
2.2 研究意义 7
2.3 实验材料 7
2.3.1试验原料 7
2.4 试剂与设备 7 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: *351916072*
2.4.1 试验试剂 7
2.4.2试验仪器与设备 7
2.5 内容与方法 8
2.5.1溶液的制备 8
2.5.2对照品溶液的制备 8
2.5.3标准曲线的制备 8
2.5.4供试品溶液的制备 9
2.5.5含量测定 9
2.6方法学考察 9
2.6.1 精密度试验 9
2.6.2重复性试验 9
2.6.3 稳定性试验 10
2.6.4换算因子试验 10
2.6.5加样回收率试验 10
3 结论与讨论 11
参考文献 12
致 谢 15
1 绪论
1.1 石斛简介
石斛为我国传统的、较常使用的名贵中药材，是兰科（Orchidaceae）石斛属（Dendrobium）多种植物的干燥茎统称，在我国已经有两千多年的药用历史了。早在《神农本草经》 、《本草纲目》等著作中就已经有了记载，并将其列为“药中上品” [1]。目前，在我国的石斛属植物中，已经有将近40种石斛作为了药用。石斛可分为紫皮、环草、霍山等数十种，而其中以铁皮石斛最佳。
铁皮石斛(Dendrobium officinale Kimura et Migo),是兰科(Orchidaceae)石斛属(Dendrobium)多年生附生草本植物[2],也是珍稀名贵的濒危中药材。唐代开元年间的《道藏》中把：“石斛、天山雪莲、三两重的人参、一百二十年的首乌、花甲的茯苓、苁蓉、深山灵芝、海底珍珠和冬虫夏草”并称为中华九大仙草。在唐代医学经典《道藏》中，铁皮石斛被列为“中华九大仙草之首”。自唐宋以来，铁皮石斛一直都被列为皇室之贡品。其主要分布于西南、江南各省[3]。野生的铁皮石斛一般生于海拔达1600米的山地半阴湿的岩石上，喜欢温暖湿润气候和半阴半阳的环境，但却不耐寒。因其生长周期较慢，极其难以存活，所以野生铁皮石斛已濒临灭绝。上世纪八十年代，铁皮石斛已被我国列为重点保护的珍稀濒危药用植物。同时它也是《中华人民共和国药典》2015版中收载的5种石斛属植物之一。铁皮石斛因其表面为铁绿色而得名，并且自古以来就有“植物熊猫”、“药中黄金”、“救命仙草”等的美誉。
目前我们普遍认为铁皮石斛是石斛类中药材中的极品，既可作保健品用，又可作药用，并且还是一种高档的汤料，其保健功效和药用价值被认为高于其他石斛。其干品被称为铁皮枫斗，是我国传统的名贵中药，也是石斛中的极品。铁皮石斛的药用部分是新鲜或干燥茎,有延缓衰老、益胃生津、养胃生津、清热明目、滋阴润肺、补五脏虚劳等功效，并用于口干烦，渴阴伤津亏,食少干呕,目暗不明病后虚热等[4]。在临床上铁皮石斛多用于治疗消化系统疾病、慢性咽炎、血栓完备塞性疾病、癌症、眼科疾病以及关节炎的治疗或辅助治疗，近年用于消除癌症放疗、化疗后的副作用和恢复体能的效果较为明显[5]。
1.2 石斛中的有效成分
1.2.1 多糖
随着人们对铁皮石斛中多糖的研究的深入，已发现铁皮石斛内含的水溶性多糖是一类免疫增强剂，具有较强的抗肿瘤生物活性，可促进淋巴细胞产生淋巴因子，增强机体体液免疫功能、细胞免疫功能，增强机体自身免疫[6]。多糖成分能清除自由基，具有抗氧化活性，可以调节机体免疫力，防治亚健康，减少疾病的产生，延缓衰老，杨虹[7]等运用糖组成分析、甲基化分析及NMR等方法确定多糖的结构，并测得其主要含有葡萄糖、木糖、及少量阿拉伯糖和甘露糖。
1.2.2 生物碱类
生物碱类成分是石斛属植物中最早分离并进行结构确认的化合物，其研究开始于20世纪30年代。陈晓梅[8]等对铁皮石斛和金钗石斛的化学成分进行比较，两者有10个生物碱类的相同成分，铁皮石斛中生物碱类成分数量和含量均低于金钗石斛，但就所含的相同化学成分而言，铁皮石斛的质量好于金钗石斛。生物碱的药理作用主要对心血管、胃肠道作用及退热止痛等。
1.2.3 氨基酸类
铁皮石斛中除了以上成分以外，还含有17种氨基酸及Mg、Ca、Fe、Mn、Zn等多种矿物质。
氨基酸通过肽键连接可以成为肽与蛋白质，这些都是生命体组织细胞的基本组成成分；矿物质在人体生理功能的调节和多种疾病的防治中也占有重要地位，是人体必不可少的营养成分。黄民权[9]等通过实验分析了铁皮石斛的氨基酸组分，结果分发现铁皮石斛含有除色氨酸（测定前已破坏，无法检出）以外的全部人体“必须氨基酸”，其主要氨基酸有天冬氨酸、谷氨酸、甘氨酸、缬氨酸和亮氨酸，这5种氨基酸占总氨基酸的53.0%。其中，谷氨酸、天冬氨酸的甘氨酸的含量占总含量的35.81%。
1.2.4 微量元素
虽说人体每日对微量元素的需求量很少，但对人体来说却是必不可少的。有研究表明，铁皮石斛中含有丰富的人体必需金属元素，这些微量元素对于人体机理活性的提高具有良好的调节作用。丁笑宇等[10]应用原子吸收分光光度计测定铁皮枫斗的微量元素，结果显示铁皮枫斗含有人体所必需的微量元素锌、铜、镁、 钾、钙、铁、锰，含量极为丰富，高于其他中草药，与其药理作用密切相关。
Key words: Tin dendrobium stem; Ornamental stones welcome; Polysaccharides; Phenol sulfuric acid method 目 录
1 绪论 1
1.1 石斛简介 1
1.2 石斛中的有效成分 2
1.2.1 多糖 2
1.2.2 生物碱类 2
1.2.3 氨基酸类 2
1.2.4 微量元素 2
1.2.5 菲类化合物 3
1.3 铁皮石斛多糖的药理作用 3
1.3.1 增强机体免疫作用 3
1.3.2 抗氧化作用 3
1.3.3 降血糖作用 4
1.3.4 降血压作用 4
1.3.5 抗肿瘤作用 4
1.3.6 促进消化作用 4
1.3.7 抗疲劳作用 5
1.3.8 促进唾液分泌作用 5
1.3.9抗肝损伤作用 5
1.4铁皮石斛国内外研究现状 6
2 实验部分 7
2.1 研究目的 7
2.2 研究意义 7
2.3 实验材料 7
2.3.1试验原料 7
2.4 试剂与设备 7 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: *351916072*
2.4.1 试验试剂 7
2.4.2试验仪器与设备 7
2.5 内容与方法 8
2.5.1溶液的制备 8
2.5.2对照品溶液的制备 8
2.5.3标准曲线的制备 8
2.5.4供试品溶液的制备 9
2.5.5含量测定 9
2.6方法学考察 9
2.6.1 精密度试验 9
2.6.2重复性试验 9
2.6.3 稳定性试验 10
2.6.4换算因子试验 10
2.6.5加样回收率试验 10
3 结论与讨论 11
参考文献 12
致 谢 15
1 绪论
1.1 石斛简介
石斛为我国传统的、较常使用的名贵中药材，是兰科（Orchidaceae）石斛属（Dendrobium）多种植物的干燥茎统称，在我国已经有两千多年的药用历史了。早在《神农本草经》 、《本草纲目》等著作中就已经有了记载，并将其列为“药中上品” [1]。目前，在我国的石斛属植物中，已经有将近40种石斛作为了药用。石斛可分为紫皮、环草、霍山等数十种，而其中以铁皮石斛最佳。
铁皮石斛(Dendrobium officinale Kimura et Migo),是兰科(Orchidaceae)石斛属(Dendrobium)多年生附生草本植物[2],也是珍稀名贵的濒危中药材。唐代开元年间的《道藏》中把：“石斛、天山雪莲、三两重的人参、一百二十年的首乌、花甲的茯苓、苁蓉、深山灵芝、海底珍珠和冬虫夏草”并称为中华九大仙草。在唐代医学经典《道藏》中，铁皮石斛被列为“中华九大仙草之首”。自唐宋以来，铁皮石斛一直都被列为皇室之贡品。其主要分布于西南、江南各省[3]。野生的铁皮石斛一般生于海拔达1600米的山地半阴湿的岩石上，喜欢温暖湿润气候和半阴半阳的环境，但却不耐寒。因其生长周期较慢，极其难以存活，所以野生铁皮石斛已濒临灭绝。上世纪八十年代，铁皮石斛已被我国列为重点保护的珍稀濒危药用植物。同时它也是《中华人民共和国药典》2015版中收载的5种石斛属植物之一。铁皮石斛因其表面为铁绿色而得名，并且自古以来就有“植物熊猫”、“药中黄金”、“救命仙草”等的美誉。
目前我们普遍认为铁皮石斛是石斛类中药材中的极品，既可作保健品用，又可作药用，并且还是一种高档的汤料，其保健功效和药用价值被认为高于其他石斛。其干品被称为铁皮枫斗，是我国传统的名贵中药，也是石斛中的极品。铁皮石斛的药用部分是新鲜或干燥茎,有延缓衰老、益胃生津、养胃生津、清热明目、滋阴润肺、补五脏虚劳等功效，并用于口干烦，渴阴伤津亏,食少干呕,目暗不明病后虚热等[4]。在临床上铁皮石斛多用于治疗消化系统疾病、慢性咽炎、血栓完备塞性疾病、癌症、眼科疾病以及关节炎的治疗或辅助治疗，近年用于消除癌症放疗、化疗后的副作用和恢复体能的效果较为明显[5]。
1.2 石斛中的有效成分
1.2.1 多糖
随着人们对铁皮石斛中多糖的研究的深入，已发现铁皮石斛内含的水溶性多糖是一类免疫增强剂，具有较强的抗肿瘤生物活性，可促进淋巴细胞产生淋巴因子，增强机体体液免疫功能、细胞免疫功能，增强机体自身免疫[6]。多糖成分能清除自由基，具有抗氧化活性，可以调节机体免疫力，防治亚健康，减少疾病的产生，延缓衰老，杨虹[7]等运用糖组成分析、甲基化分析及NMR等方法确定多糖的结构，并测得其主要含有葡萄糖、木糖、及少量阿拉伯糖和甘露糖。
1.2.2 生物碱类
生物碱类成分是石斛属植物中最早分离并进行结构确认的化合物，其研究开始于20世纪30年代。陈晓梅[8]等对铁皮石斛和金钗石斛的化学成分进行比较，两者有10个生物碱类的相同成分，铁皮石斛中生物碱类成分数量和含量均低于金钗石斛，但就所含的相同化学成分而言，铁皮石斛的质量好于金钗石斛。生物碱的药理作用主要对心血管、胃肠道作用及退热止痛等。
1.2.3 氨基酸类
铁皮石斛中除了以上成分以外，还含有17种氨基酸及Mg、Ca、Fe、Mn、Zn等多种矿物质。
氨基酸通过肽键连接可以成为肽与蛋白质，这些都是生命体组织细胞的基本组成成分；矿物质在人体生理功能的调节和多种疾病的防治中也占有重要地位，是人体必不可少的营养成分。黄民权[9]等通过实验分析了铁皮石斛的氨基酸组分，结果分发现铁皮石斛含有除色氨酸（测定前已破坏，无法检出）以外的全部人体“必须氨基酸”，其主要氨基酸有天冬氨酸、谷氨酸、甘氨酸、缬氨酸和亮氨酸，这5种氨基酸占总氨基酸的53.0%。其中，谷氨酸、天冬氨酸的甘氨酸的含量占总含量的35.81%。
1.2.4 微量元素
虽说人体每日对微量元素的需求量很少，但对人体来说却是必不可少的。有研究表明，铁皮石斛中含有丰富的人体必需金属元素，这些微量元素对于人体机理活性的提高具有良好的调节作用。丁笑宇等[10]应用原子吸收分光光度计测定铁皮枫斗的微量元素，结果显示铁皮枫斗含有人体所必需的微量元素锌、铜、镁、 钾、钙、铁、锰，含量极为丰富，高于其他中草药，与其药理作用密切相关。
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