一个水稻感盐突变体的生理分析和遗传图谱的构建
：世界土壤盐渍化的环境问题日益严峻，而这所造成的水稻减产随之成为了一个更加棘手的问题。诱导产生耐盐的突变体材料以及耐盐基因的克隆对于水稻的育种和改良具有重要的意义。本实验以日本晴EMS诱导所得的突变体rss5 (rice salt sensitive 5)为研究材料，对盐胁迫下该突变体的表型以及地上部与地下部Na+、K+含量等生理指标进行了分析。结果发现低Na+/K+比值的植物耐盐性较强。进一步，从实验室已有的SSR标记中筛选出突变体rss5和窄叶青8号之间存在多态性的标记120对，并以此构建了rss5/窄叶青8号F2分离群体第1、2和3染色体的遗传图谱。
目录
摘要................................................................1
关键词..............................................................1
Abstract ...........................................................1
Key words ..........................................................1
引言 ...............................................................1
1 材料与方法 .......................................................2
1.1 材料.............................................................2
1.2 耐盐性鉴定.......................................................2
1.2.1 材料的培养.....................................................2
1.2.2 盐胁迫处理....................
*好棒文|www.hbsrm.com +Q: @351916072@
.................................2
1.2.3 生理指标的测定.................................................3
1.3 SSR分子标记.....................................................3
1.3.1 植物总DNA的提取（CTAB法）..................................3
1.3.2 SSR标记检测...................................................3
1.3.2.1 PCR反应......................................................3
1.3.2.2 PCR产物检测..................................................4
1.4 遗传图谱的构建...................................................4
2 结果与分析.........................................................5
2.1 感盐突变体rss5与野生型日本晴苗期耐盐性表型比较..................5
2.2 盐胁迫对野生型和rss5地上部以及地下部Na+、K+、Na+/K+的影响.......5
2.3 盐胁迫对于日本晴野生型和突变体rss5叶片中Na+含量的影响...........8
2.4 突变体rss5和窄叶青8号F2群体遗传图谱的构建......................8
3 讨论...............................................................9
3.1 rss5苗期耐盐性的生理基础...........................................9
3.2 遗传图谱的构建..................................................10
致谢................................................................10
参考文献............................................................10
一个水稻感盐突变体的生理分析和遗传图谱的构建
生物技术：陶源
引言
盐碱地是各种不同类型盐土和碱土以及不同程度盐化和碱化的土壤的总称。其主要特征是含有较大比例的盐碱成分，具有不良的物化效应，对于多数的植物和作物具有一定程度的抑制作用。土壤盐渍化是一个全球性的问题，世界五大洲及其大多数岛屿的滨海地区和干旱、半干旱地带均有分布。据联合国教科文组织(UNESCO)和粮农组织(FAO)的不完全统计，全世界盐渍土壤的面积为9.54亿公顷，约占世界陆地面积的7.6%。在 我国，盐渍土的分布又较为广泛，约占地为1亿公顷 [1]。土壤盐渍化造成的作物的减产可以从两方面改善。第一，改善盐渍化的土地；第二，改善作物。而第二种方法通过提高作物的抗性这方面改善作物是提高产量的最有效最直接的做法。因此，需要从作物基因的角度来对认识作物的耐盐机制，从而利用分子手段提高作物抵抗盐胁迫的能力，为粮食增产提供一个有效可行的方法。
水稻是世界上最主要的粮食作物之一，可它却又属于不耐盐的甜土植物[2],因此生产和推广常常会受到盐害的严重制约[3]。然而，国内外许多专家均已证实水稻品种间耐盐性存在很大的差异[46]。所以，为了使得水稻在盐碱地区能够大面积的种植以及大幅度的提高产量，专家们进行了耐盐水稻种质资源的筛选以及耐盐品种的研究和种植。以期筛选到优质的耐盐品种进行杂交，从而得到耐盐的新品种（品系）。或者通过分子手段对于相关基因进行改造和克隆，并且与育种手段相结合，以此来得到新的品种。
水稻的耐盐碱性是指水稻在盐碱环境下忍耐或抵抗盐碱胁迫的能力[7]，除在突变体或转基因植株中发现有单个主基因控制的耐盐性以外，大多数水稻耐盐性受多个基因控制,遗传基础比较复杂。水稻是对盐碱中度敏感的作物，通过EMS诱变筛选获得突变体，之后研究者再对突变体进行基因定位的研究。
虽然迄今为止对于水稻耐盐的QTL已经展开了很多的研究，但是被克隆的相关基因却并不多。Lin等人[8]成功克隆得到了盐胁迫下控制水稻地上部分K+含量的数量性状基因SKCI，这成为我国水稻重要功能基因研究所取得的重大突出成果之一。Huang等[9]克隆了DST（drought and salt tolerance）基因，该基因调节控制H2O2动态平衡的相关基因的表达，从而调节气孔关闭，以减少干旱胁迫之下水分的流失以及盐胁迫下Na+进入植株体内，最终使得作物的耐旱性和耐盐性均得到提高。
目录
摘要................................................................1
关键词..............................................................1
Abstract ...........................................................1
Key words ..........................................................1
引言 ...............................................................1
1 材料与方法 .......................................................2
1.1 材料.............................................................2
1.2 耐盐性鉴定.......................................................2
1.2.1 材料的培养.....................................................2
1.2.2 盐胁迫处理....................
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1.2.3 生理指标的测定.................................................3
1.3 SSR分子标记.....................................................3
1.3.1 植物总DNA的提取（CTAB法）..................................3
1.3.2 SSR标记检测...................................................3
1.3.2.1 PCR反应......................................................3
1.3.2.2 PCR产物检测..................................................4
1.4 遗传图谱的构建...................................................4
2 结果与分析.........................................................5
2.1 感盐突变体rss5与野生型日本晴苗期耐盐性表型比较..................5
2.2 盐胁迫对野生型和rss5地上部以及地下部Na+、K+、Na+/K+的影响.......5
2.3 盐胁迫对于日本晴野生型和突变体rss5叶片中Na+含量的影响...........8
2.4 突变体rss5和窄叶青8号F2群体遗传图谱的构建......................8
3 讨论...............................................................9
3.1 rss5苗期耐盐性的生理基础...........................................9
3.2 遗传图谱的构建..................................................10
致谢................................................................10
参考文献............................................................10
一个水稻感盐突变体的生理分析和遗传图谱的构建
生物技术：陶源
引言
盐碱地是各种不同类型盐土和碱土以及不同程度盐化和碱化的土壤的总称。其主要特征是含有较大比例的盐碱成分，具有不良的物化效应，对于多数的植物和作物具有一定程度的抑制作用。土壤盐渍化是一个全球性的问题，世界五大洲及其大多数岛屿的滨海地区和干旱、半干旱地带均有分布。据联合国教科文组织(UNESCO)和粮农组织(FAO)的不完全统计，全世界盐渍土壤的面积为9.54亿公顷，约占世界陆地面积的7.6%。在 我国，盐渍土的分布又较为广泛，约占地为1亿公顷 [1]。土壤盐渍化造成的作物的减产可以从两方面改善。第一，改善盐渍化的土地；第二，改善作物。而第二种方法通过提高作物的抗性这方面改善作物是提高产量的最有效最直接的做法。因此，需要从作物基因的角度来对认识作物的耐盐机制，从而利用分子手段提高作物抵抗盐胁迫的能力，为粮食增产提供一个有效可行的方法。
水稻是世界上最主要的粮食作物之一，可它却又属于不耐盐的甜土植物[2],因此生产和推广常常会受到盐害的严重制约[3]。然而，国内外许多专家均已证实水稻品种间耐盐性存在很大的差异[46]。所以，为了使得水稻在盐碱地区能够大面积的种植以及大幅度的提高产量，专家们进行了耐盐水稻种质资源的筛选以及耐盐品种的研究和种植。以期筛选到优质的耐盐品种进行杂交，从而得到耐盐的新品种（品系）。或者通过分子手段对于相关基因进行改造和克隆，并且与育种手段相结合，以此来得到新的品种。
水稻的耐盐碱性是指水稻在盐碱环境下忍耐或抵抗盐碱胁迫的能力[7]，除在突变体或转基因植株中发现有单个主基因控制的耐盐性以外，大多数水稻耐盐性受多个基因控制,遗传基础比较复杂。水稻是对盐碱中度敏感的作物，通过EMS诱变筛选获得突变体，之后研究者再对突变体进行基因定位的研究。
虽然迄今为止对于水稻耐盐的QTL已经展开了很多的研究，但是被克隆的相关基因却并不多。Lin等人[8]成功克隆得到了盐胁迫下控制水稻地上部分K+含量的数量性状基因SKCI，这成为我国水稻重要功能基因研究所取得的重大突出成果之一。Huang等[9]克隆了DST（drought and salt tolerance）基因，该基因调节控制H2O2动态平衡的相关基因的表达，从而调节气孔关闭，以减少干旱胁迫之下水分的流失以及盐胁迫下Na+进入植株体内，最终使得作物的耐旱性和耐盐性均得到提高。
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