蝴蝶兰无菌苗液体培养快速生长条件研究
摘要：以生长整齐一致、长势良好的蝴蝶兰无菌苗为材料，对其液体培养条件进行研究。结果表明，不同细胞分裂素浓度、不同接种量、不同有机添加物浓度及容器大小对蝴蝶兰液体培养快速生长有着不同效应。，在 6-BA培养条件下，生长30d后统计,蝴蝶兰幼苗在6-BA浓度为0.5 mg/L时生长势最好；当接种量为每瓶3株棵时，最有利于蝴蝶兰的快速生长；在蝴蝶兰无菌苗液体培养时，考虑到生产成本，选择椰汁浓度为150ml/L为宜；在培养容器体积为100ml—500ml范围内，培养容器体积为500ml时蝴蝶兰幼苗生长势最好。研究结果表明,采用液体培养的方法可以促进蝴蝶兰无菌苗的快速生长。
目录
摘要 3
关键词 3
Abstract 3
Key words 3
1 材料与方法 4
1．1 材料 4
1．2 试验方法 4
1．2．1 不同细胞分裂素浓度对蝴蝶兰液体生长的影响 4
1．2．2 不同有机添加物浓度对蝴蝶兰无菌苗生长的影响 4
1．2．3 不同接种量对蝴蝶兰液体培养的影响 4
1．2．4 培养容器大小对蝴蝶兰无菌苗生长的影响 4
1．3 数据处理 5
2 结果与分析 5
2．1 不同6BA浓度对蝴蝶兰液体生长的影响 5
2．2 不同有机添加物浓度对蝴蝶兰无菌苗生长的影响 6
2．3 不同接种量对蝴蝶兰液体培养的影响 6
2．4 培养容器大小对蝴蝶兰无菌苗生长的影响 7
3 讨论 8
致谢 9
参考文献 9
附录A缩略词（Abbreviations） 9
表1 不同6BA浓度对蝴蝶兰液体生长的影响 5
表2 不同有机添加物浓度对蝴蝶兰无菌苗生长的影响 6
表3 不同接种量对蝴蝶兰液体培养的影响 7
表4 培养容器大小对蝴蝶兰无菌苗生长的影响 8
图1 不同浓度6BA.对蝴蝶兰液体生长的影响 6
图2不同有机添加物浓度对蝴蝶兰无菌苗生长的影响 6
图3不同接种量对
*好棒文|www.hbsrm.com +Q: ^351916072*
蝴蝶兰液体培养的影响 7
图4培养容器大小对无菌苗生长的影响 8
蝴蝶兰无菌苗液体培养快速生长条件研究
引言
蝴蝶兰(Phalaenopsis spp.)又称蝶兰, 属热带或亚热带的气生兰, 原产于中国台湾、菲律宾、印尼、泰国、马来西亚等地。其株型美观, 花形奇特, 色彩艳丽, 花期长久, 在热带兰中有“兰花皇后”之美誉, 具有极高的观赏和经济价值, 在国内外花卉市场上极受欢迎。但由于蝴蝶兰是单茎性气生兰, 极少发育侧枝, 很难采用常规分株法进行无性繁殖, 而且其种子不含胚乳, 在自然条件下萌发率极低,难以利用种子播种方式进行有性繁殖[1], 不能满足规模化生产的要求[2]。近年来，国内外有关专家针对蝴蝶兰组培快繁做了大量研究工作，在培养基和外植体选择方面已做得比较成功[2,3,4]。通过组织培养技术可以在短期内获得大量蝴蝶兰幼小植株, 且具有增殖率高、生长速度快、不受季节限制、可周年生产及容易去除病毒等优点, 适应市场的大量需求, 也是工厂化育苗的重要途径[5]，且蝴蝶兰植物的营养生长期较其他花卉要长许多, 从播种到开花需要2 年之久，这无疑极大的限制了蝴蝶兰产业的发展, 也无形中增加了投资的成本。因此利用蝴蝶兰快速繁殖技术对培育蝴蝶兰优质种苗，缩短蝴蝶兰生长周期具有重要意义。
材料与方法
1．1 材料
选择生长旺盛, 整齐一致, 无病虫害的蝴蝶兰健壮植株, 切除已经褐化的部分，并且将蝴蝶兰根系切掉，切取单个增殖侧芽作为研究液体生长条件的试验材料。
1．2 试验方法
1．2．1 不同细胞分裂素浓度对蝴蝶兰液体生长的影响
选取生长旺盛,整齐一致的蝴蝶兰无菌苗，切除已经褐化部分后分别转接至含不同浓度的细胞分裂素的液体培养基。液体培养基以1/2MS为基本培养基，加入不同浓度的细胞分裂素：0 mg/L、0.25mg/L、0.5mg/L、1.0mg/L。培养基中其他成分为：蔗糖30g/L，椰汁100ml/L。其中pH5.6，培养条件为光照强度2000lx，光周期12h/8h，温度25±2℃，采用100ml的三角瓶为液体培养容器，每瓶添加培养基50ml，每个处理3瓶，每瓶接种6株蝴蝶兰无菌苗，置于转速为100r/min摇床上无菌培养。无菌培养30d后统计植株的叶长、叶宽、鲜重。
1．2．2 不同有机添加物浓度对蝴蝶兰无菌苗生长的影响
选取生长旺盛, 生长整齐一致的蝴蝶兰无菌苗，切除已经褐化部分后分别转接至含不同浓度的椰汁的液体培养基。液体培养基以1/2MS为基本培养基，添加不同浓度的椰汁：50ml/L、100ml/L、150ml/L、200ml/L培养基中其他成分为：蔗糖30g/L、0.5mg/L6BA，其中pH5.6，培养条件为光照强度2000lx，光周期12h/8h，温度25±2℃，采用100ml的三角瓶为液体培养容器，每瓶添加培养基50ml，每个处理3瓶，每瓶接种6株蝴蝶兰无菌苗，置于转速为100r/min摇床上无菌培养。无菌培养30d后统计植株的叶长、叶宽、鲜重。
1．2．3 不同接种量对蝴蝶兰液体培养的影响
选取生长旺盛, 生长整齐一致的蝴蝶兰无菌苗，切除已经褐化部分后分别转接至以1/2MS为基本培养基，培养基中其他成分为：蔗糖30g/L，椰汁100ml/L，6BA0.5ml/l。其中pH5.6，培养条件为光照强度2000lx，光周期12h/8h，温度25±2℃，采用100ml的三角瓶为液体培养容器，每瓶添加培养基50ml，设定每瓶接种量1、2、3、4株，每个处理接种6瓶，置于转速为100r/min摇床上无菌培养。无菌培养30d后统计植株的叶长、叶宽、鲜重。
1．2．4 培养容器大小对蝴蝶兰无菌苗生长的影响
选取生长旺盛, 生长整齐一致的蝴蝶兰无菌苗，切除已经褐化的部分后分别转接至以1/2MS为基本培养基，培养基中其他成分为：蔗糖30g/L，椰汁100ml/L，6BA0.5ml/l。其中pH5.6，培养条件为光照强度2000lx，光周期12h/8h，温度25±2℃，分别选用不同大小的培养容器，即100ml，150ml，250ml，500ml的三角瓶，分别接种3株蝴蝶兰组培苗，，每个处理3次重复，置于转速为100r/min摇床上无菌培养。无菌培养30d后统计植株的叶长、叶宽、鲜重。
1．3 数据处理
采用EXCEL进行数据计算整理，SPASS20.0进行方差分析，LSD进行多重比较（P<0.05）。
目录
摘要 3
关键词 3
Abstract 3
Key words 3
1 材料与方法 4
1．1 材料 4
1．2 试验方法 4
1．2．1 不同细胞分裂素浓度对蝴蝶兰液体生长的影响 4
1．2．2 不同有机添加物浓度对蝴蝶兰无菌苗生长的影响 4
1．2．3 不同接种量对蝴蝶兰液体培养的影响 4
1．2．4 培养容器大小对蝴蝶兰无菌苗生长的影响 4
1．3 数据处理 5
2 结果与分析 5
2．1 不同6BA浓度对蝴蝶兰液体生长的影响 5
2．2 不同有机添加物浓度对蝴蝶兰无菌苗生长的影响 6
2．3 不同接种量对蝴蝶兰液体培养的影响 6
2．4 培养容器大小对蝴蝶兰无菌苗生长的影响 7
3 讨论 8
致谢 9
参考文献 9
附录A缩略词（Abbreviations） 9
表1 不同6BA浓度对蝴蝶兰液体生长的影响 5
表2 不同有机添加物浓度对蝴蝶兰无菌苗生长的影响 6
表3 不同接种量对蝴蝶兰液体培养的影响 7
表4 培养容器大小对蝴蝶兰无菌苗生长的影响 8
图1 不同浓度6BA.对蝴蝶兰液体生长的影响 6
图2不同有机添加物浓度对蝴蝶兰无菌苗生长的影响 6
图3不同接种量对
*好棒文|www.hbsrm.com +Q: ^351916072*
蝴蝶兰液体培养的影响 7
图4培养容器大小对无菌苗生长的影响 8
蝴蝶兰无菌苗液体培养快速生长条件研究
引言
蝴蝶兰(Phalaenopsis spp.)又称蝶兰, 属热带或亚热带的气生兰, 原产于中国台湾、菲律宾、印尼、泰国、马来西亚等地。其株型美观, 花形奇特, 色彩艳丽, 花期长久, 在热带兰中有“兰花皇后”之美誉, 具有极高的观赏和经济价值, 在国内外花卉市场上极受欢迎。但由于蝴蝶兰是单茎性气生兰, 极少发育侧枝, 很难采用常规分株法进行无性繁殖, 而且其种子不含胚乳, 在自然条件下萌发率极低,难以利用种子播种方式进行有性繁殖[1], 不能满足规模化生产的要求[2]。近年来，国内外有关专家针对蝴蝶兰组培快繁做了大量研究工作，在培养基和外植体选择方面已做得比较成功[2,3,4]。通过组织培养技术可以在短期内获得大量蝴蝶兰幼小植株, 且具有增殖率高、生长速度快、不受季节限制、可周年生产及容易去除病毒等优点, 适应市场的大量需求, 也是工厂化育苗的重要途径[5]，且蝴蝶兰植物的营养生长期较其他花卉要长许多, 从播种到开花需要2 年之久，这无疑极大的限制了蝴蝶兰产业的发展, 也无形中增加了投资的成本。因此利用蝴蝶兰快速繁殖技术对培育蝴蝶兰优质种苗，缩短蝴蝶兰生长周期具有重要意义。
材料与方法
1．1 材料
选择生长旺盛, 整齐一致, 无病虫害的蝴蝶兰健壮植株, 切除已经褐化的部分，并且将蝴蝶兰根系切掉，切取单个增殖侧芽作为研究液体生长条件的试验材料。
1．2 试验方法
1．2．1 不同细胞分裂素浓度对蝴蝶兰液体生长的影响
选取生长旺盛,整齐一致的蝴蝶兰无菌苗，切除已经褐化部分后分别转接至含不同浓度的细胞分裂素的液体培养基。液体培养基以1/2MS为基本培养基，加入不同浓度的细胞分裂素：0 mg/L、0.25mg/L、0.5mg/L、1.0mg/L。培养基中其他成分为：蔗糖30g/L，椰汁100ml/L。其中pH5.6，培养条件为光照强度2000lx，光周期12h/8h，温度25±2℃，采用100ml的三角瓶为液体培养容器，每瓶添加培养基50ml，每个处理3瓶，每瓶接种6株蝴蝶兰无菌苗，置于转速为100r/min摇床上无菌培养。无菌培养30d后统计植株的叶长、叶宽、鲜重。
1．2．2 不同有机添加物浓度对蝴蝶兰无菌苗生长的影响
选取生长旺盛, 生长整齐一致的蝴蝶兰无菌苗，切除已经褐化部分后分别转接至含不同浓度的椰汁的液体培养基。液体培养基以1/2MS为基本培养基，添加不同浓度的椰汁：50ml/L、100ml/L、150ml/L、200ml/L培养基中其他成分为：蔗糖30g/L、0.5mg/L6BA，其中pH5.6，培养条件为光照强度2000lx，光周期12h/8h，温度25±2℃，采用100ml的三角瓶为液体培养容器，每瓶添加培养基50ml，每个处理3瓶，每瓶接种6株蝴蝶兰无菌苗，置于转速为100r/min摇床上无菌培养。无菌培养30d后统计植株的叶长、叶宽、鲜重。
1．2．3 不同接种量对蝴蝶兰液体培养的影响
选取生长旺盛, 生长整齐一致的蝴蝶兰无菌苗，切除已经褐化部分后分别转接至以1/2MS为基本培养基，培养基中其他成分为：蔗糖30g/L，椰汁100ml/L，6BA0.5ml/l。其中pH5.6，培养条件为光照强度2000lx，光周期12h/8h，温度25±2℃，采用100ml的三角瓶为液体培养容器，每瓶添加培养基50ml，设定每瓶接种量1、2、3、4株，每个处理接种6瓶，置于转速为100r/min摇床上无菌培养。无菌培养30d后统计植株的叶长、叶宽、鲜重。
1．2．4 培养容器大小对蝴蝶兰无菌苗生长的影响
选取生长旺盛, 生长整齐一致的蝴蝶兰无菌苗，切除已经褐化的部分后分别转接至以1/2MS为基本培养基，培养基中其他成分为：蔗糖30g/L，椰汁100ml/L，6BA0.5ml/l。其中pH5.6，培养条件为光照强度2000lx，光周期12h/8h，温度25±2℃，分别选用不同大小的培养容器，即100ml，150ml，250ml，500ml的三角瓶，分别接种3株蝴蝶兰组培苗，，每个处理3次重复，置于转速为100r/min摇床上无菌培养。无菌培养30d后统计植株的叶长、叶宽、鲜重。
1．3 数据处理
采用EXCEL进行数据计算整理，SPASS20.0进行方差分析，LSD进行多重比较（P<0.05）。
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