昆仑雪菊中木犀草苷含量比较
目的:对不同产地昆仑雪菊及同一产地昆仑雪菊不同部位木犀草苷含量进行比较，从而对昆仑雪菊进行初步质量评价。方法: 采用HPLC 法, Agilent TC-C18(2 ) 色谱柱( 4. 6mm × 250 mm，5 μm ), 流动相乙腈- 0.1%磷酸溶液, 流速0.6 mL·min -1，检测波长348 nm。结果: 不同产地昆仑雪菊中木犀草苷的含量在5.68 mg·g-1 ~11.45 mg·g-1之间，以克里阳乡的含量最高；昆仑雪菊不同部位中舌状花部分木犀草苷含量显著高于管状花部分；舌状花外侧黄色部分高于内侧深褐色部分。结论木犀草苷含量高低可作为昆仑雪菊药材质量的评价标准之一，可为昆仑雪菊药材的质量评价以及进一步开发利用提供依据。
目录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1
引言1
1 材料与方法2
1.1 材料 2
1.2 方法 2
1.2.1 供试品溶液的制备2
1.2.2木犀草苷对照品及标准曲线制备2
2 木犀草苷含量测定2
2.1 色谱条件2
2.2 精密度试验2
2.3 稳定性试验2
2.4 重复性试验2
2.5 加样回收率试验2
2.6 样品含量测定3
3 结果与分析 3
3.1同一产地昆仑雪菊不同部位木犀草苷含量比较3
3.2不同产地昆仑雪菊木犀草苷含量比较3
3.3不同产地昆仑雪菊同一部位木犀草苷含量比较3
4 讨论3
致谢4
参考文献5
昆仑雪菊中木犀草苷含量比较
引言
昆仑雪菊为菊科金鸡菊属两色金鸡菊Coreopsis tinctoria Nutt. ,以其干燥头状花序为药用部分，主产于我国新疆。目前我国新疆部分地区作为茶用和保健菊进行大面积栽培。昆仑雪菊又名“血菊”，维吾尔语“古丽恰尔”，《本草汇言》称其可“破血疏肝，解疔散毒”。目前昆仑雪菊主要用于茶饮保健，其主要成分黄酮类化合物与咖啡酸衍生物作为自由基吸收剂都具有抗氧化作用［12 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: &351916072&
］，具有清热解毒和降脂降压之功效［35］。目前，《中国药典》(2010年版)[6]并未收载昆仑雪菊，木犀草苷是同科植物菊花质量评价标准之一，木犀草苷具有较强的杀菌消炎，解热镇痛的功效，在抗病毒和抗肿瘤方面表现出较好的作用[7]，本实验参考采用《中国药典》(2010年版)[6]中对菊花的评价标准，用HPLC 对不同产地昆仑雪菊及同一产地昆仑雪菊不同部位木犀草苷含量进行对比测定，对昆仑雪菊进行初步质量评价，为进一步建立昆仑雪菊质量评价体系提供参考。
1 材料与方法
1.1材料 昆仑雪菊于2012 年10 月上旬采自吐鲁番，昌吉，克里阳乡。原植物经大学郭巧生教授鉴定为菊科植物两色金鸡菊Coreopsis tinctoria Nutt.。
仪器为Agilent 1120 一体式高效液相色谱仪(美国) ，乙腈为色谱纯，磷酸为分析纯，纯净水为娃哈哈纯净水，木犀草苷对照品( 111720200501，纯度≥98%，中国药品生物制品检定所) 。
1.2 方法
1.2.1 供试品溶液的制备
取样品粉末(过1 号筛) 0. 100 0 g 精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入70% 甲醇25 mL，密塞，称重，超声处理(功率300 W，频率45 kHz) 45 min，放冷，再称重，用70% 甲醇补足失重，摇匀，滤过，取续滤液，即得供试溶液。
1.2.2木犀草苷对照品及标准曲线制备
精密称取木犀草苷对照品，用70%甲醇溶解制成每1 mL木犀草苷80 μg的溶液。
精密量取木犀草苷对照品溶液0，2，4，6，8，10，12 μL，依次进样分析，记录峰面积。以标准品含量(mg)为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制标准曲线，计算测定木犀草苷含量线性关系为y = 2E+11x – 353557（R2=0.9998），表明木犀草苷在线性范围0.000 2~0.004 8mg线性关系良好。
2 木犀草苷含量测定
2.1 色谱条件[6] Agilent TCC18(2) 色谱柱( 4. 6mm × 250 mm，5 μm) ，以乙腈为流动相A，以0. 1%磷酸溶液为流动相B，0 ~ 11 min，10% ~ 18% A；11 ~ 30 min 18% ~ 20% A； 30 ~ 40 min，20%A； 40 ~ 60 min，20% ~ 35% A，进行梯度洗脱； 流速0.6 mLmin 1 ； 检测波长348 nm； 柱温30 ℃； 进样量5 μL。色谱图见图1。
图1 对照品及昆仑雪菊样品HPLC 图
对照品；B．供试品；
1．木犀草苷
2.2 精密度试验 精密吸取对照品溶液10 μL，连续进样5 次，测定木犀草苷的峰面积，结果木犀草苷的RSD（n=5）为0.18%。表明本法的精密度良好。
2.3 稳定性试验 取对照品溶液于室温放置0，2，4，8，16，24 h 后按2. 1 项中色谱法测定进样，记录色谱图。木犀草苷的RSD( n = 6)是0.7%，结果显示稳定性好。
2.4 重复性试验 取雪菊样品粉末按2. 1 项方法制成供试溶液5 份，按1.2.1 项中色谱法测定进样，记录峰面积，木犀草苷含量的RSD ( n = 5 ) 是0.32%，结果显示重复性好。
2.5 加样回收率试验 称取一定量的供试品，加入一定量木犀草苷标准品溶液，按1.2.1 项方法制成供试溶液6 份，按2. 1 项中色谱法测定进样，计算木犀草苷加样回收率，见表1。结果表明，木犀草苷6 次试验的加样回收率测定结果在99. 74% ~ 102. 49%之间, 平均回收率为101. 08%, RSD = 0. 96%( n = 6), 表明本法回收率好, 方法可行。
表1 木犀草苷回收率实验结果
编号
样品含量/μg
加入量/μg
测得量/μg
回收率/%
平均回收率/%
RSD/%
1
0.634
0.235
0.400
99.74
101.08
0.96
2
0.638
0.235
0.400
100.74
3
0.642
0.235
0.400
101.74
4
0.640
0.235
0.400
101.24
目录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1
引言1
1 材料与方法2
1.1 材料 2
1.2 方法 2
1.2.1 供试品溶液的制备2
1.2.2木犀草苷对照品及标准曲线制备2
2 木犀草苷含量测定2
2.1 色谱条件2
2.2 精密度试验2
2.3 稳定性试验2
2.4 重复性试验2
2.5 加样回收率试验2
2.6 样品含量测定3
3 结果与分析 3
3.1同一产地昆仑雪菊不同部位木犀草苷含量比较3
3.2不同产地昆仑雪菊木犀草苷含量比较3
3.3不同产地昆仑雪菊同一部位木犀草苷含量比较3
4 讨论3
致谢4
参考文献5
昆仑雪菊中木犀草苷含量比较
引言
昆仑雪菊为菊科金鸡菊属两色金鸡菊Coreopsis tinctoria Nutt. ,以其干燥头状花序为药用部分，主产于我国新疆。目前我国新疆部分地区作为茶用和保健菊进行大面积栽培。昆仑雪菊又名“血菊”，维吾尔语“古丽恰尔”，《本草汇言》称其可“破血疏肝，解疔散毒”。目前昆仑雪菊主要用于茶饮保健，其主要成分黄酮类化合物与咖啡酸衍生物作为自由基吸收剂都具有抗氧化作用［12 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: &351916072&
］，具有清热解毒和降脂降压之功效［35］。目前，《中国药典》(2010年版)[6]并未收载昆仑雪菊，木犀草苷是同科植物菊花质量评价标准之一，木犀草苷具有较强的杀菌消炎，解热镇痛的功效，在抗病毒和抗肿瘤方面表现出较好的作用[7]，本实验参考采用《中国药典》(2010年版)[6]中对菊花的评价标准，用HPLC 对不同产地昆仑雪菊及同一产地昆仑雪菊不同部位木犀草苷含量进行对比测定，对昆仑雪菊进行初步质量评价，为进一步建立昆仑雪菊质量评价体系提供参考。
1 材料与方法
1.1材料 昆仑雪菊于2012 年10 月上旬采自吐鲁番，昌吉，克里阳乡。原植物经大学郭巧生教授鉴定为菊科植物两色金鸡菊Coreopsis tinctoria Nutt.。
仪器为Agilent 1120 一体式高效液相色谱仪(美国) ，乙腈为色谱纯，磷酸为分析纯，纯净水为娃哈哈纯净水，木犀草苷对照品( 111720200501，纯度≥98%，中国药品生物制品检定所) 。
1.2 方法
1.2.1 供试品溶液的制备
取样品粉末(过1 号筛) 0. 100 0 g 精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入70% 甲醇25 mL，密塞，称重，超声处理(功率300 W，频率45 kHz) 45 min，放冷，再称重，用70% 甲醇补足失重，摇匀，滤过，取续滤液，即得供试溶液。
1.2.2木犀草苷对照品及标准曲线制备
精密称取木犀草苷对照品，用70%甲醇溶解制成每1 mL木犀草苷80 μg的溶液。
精密量取木犀草苷对照品溶液0，2，4，6，8，10，12 μL，依次进样分析，记录峰面积。以标准品含量(mg)为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制标准曲线，计算测定木犀草苷含量线性关系为y = 2E+11x – 353557（R2=0.9998），表明木犀草苷在线性范围0.000 2~0.004 8mg线性关系良好。
2 木犀草苷含量测定
2.1 色谱条件[6] Agilent TCC18(2) 色谱柱( 4. 6mm × 250 mm，5 μm) ，以乙腈为流动相A，以0. 1%磷酸溶液为流动相B，0 ~ 11 min，10% ~ 18% A；11 ~ 30 min 18% ~ 20% A； 30 ~ 40 min，20%A； 40 ~ 60 min，20% ~ 35% A，进行梯度洗脱； 流速0.6 mLmin 1 ； 检测波长348 nm； 柱温30 ℃； 进样量5 μL。色谱图见图1。
图1 对照品及昆仑雪菊样品HPLC 图
对照品；B．供试品；
1．木犀草苷
2.2 精密度试验 精密吸取对照品溶液10 μL，连续进样5 次，测定木犀草苷的峰面积，结果木犀草苷的RSD（n=5）为0.18%。表明本法的精密度良好。
2.3 稳定性试验 取对照品溶液于室温放置0，2，4，8，16，24 h 后按2. 1 项中色谱法测定进样，记录色谱图。木犀草苷的RSD( n = 6)是0.7%，结果显示稳定性好。
2.4 重复性试验 取雪菊样品粉末按2. 1 项方法制成供试溶液5 份，按1.2.1 项中色谱法测定进样，记录峰面积，木犀草苷含量的RSD ( n = 5 ) 是0.32%，结果显示重复性好。
2.5 加样回收率试验 称取一定量的供试品，加入一定量木犀草苷标准品溶液，按1.2.1 项方法制成供试溶液6 份，按2. 1 项中色谱法测定进样，计算木犀草苷加样回收率，见表1。结果表明，木犀草苷6 次试验的加样回收率测定结果在99. 74% ~ 102. 49%之间, 平均回收率为101. 08%, RSD = 0. 96%( n = 6), 表明本法回收率好, 方法可行。
表1 木犀草苷回收率实验结果
编号
样品含量/μg
加入量/μg
测得量/μg
回收率/%
平均回收率/%
RSD/%
1
0.634
0.235
0.400
99.74
101.08
0.96
2
0.638
0.235
0.400
100.74
3
0.642
0.235
0.400
101.74
4
0.640
0.235
0.400
101.24
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