拟南芥重金属转运蛋白的克隆
摘要:背景:土壤中的重金属不仅对植物有害,也可通过食物链危害人类和动物的健康。植物对土壤的吸收和解毒是一个精密的调控过程,具有非常复杂的分子生物学机制。重金属转运蛋白在整个调控过程中发挥关键作用,参与了吸收、螯合、区室化和代谢利用等关键步骤。 目的:克隆拟南芥重金属转运蛋白。 方法:本实验以拟南芥为实验材料,提取全长cDNA,并以该cDNA作为模板,采用RT-PCR技术等基因工程及分子生物学手段克隆基因。 结果:成功克隆拟南芥根瘤素MtN21/类EamA转运蛋白家族、类EamA转运蛋白家族、镁转运蛋白6、
拟南芥ABi4基因过表达载体的构建
摘要:ABI4(Abscisic Acid Insensitive 4)是一种ABA(脱落酸)非敏感型的转录因子,诱导一系列ABA相关反应基因的表达,ABi4对植物种子的萌发以及侧根的发育、抗激素、抗胁迫等都有着重要的影响,包括种子的成熟、植物体激素的应答、新陈代谢、胁迫应答等。因此,研究和探索ABi4作用机制,并进行转基因的研究,对于农业的发展于建设具有十分重要的意义。本实验以野生型拟南芥为材料,提取、扩增ABi4基因,构建拟南芥ABi4的过表达载体,为后续的转基因实验做准备。
抗虫抗除草剂转基因水稻T1C19杂草化潜力的研究
摘要:芽孢杆菌是革兰氏阳性菌,细胞壁不含内毒素,可以分泌大量胞外蛋白,是重要的工业酶制剂生产菌株。能形成芽孢插入重复突变和置换等位基因是细菌定向诱变最常用的两种方法。但是这两种方法都会受到多种因素限制,从而影响后期对于突变株表型的观测。使用温敏质粒或自杀基因进行负筛选,可以很好避免这些限制。本研究利用的一个点突变形式的pheS编码高度保守的苯丙氨酰-tRNA合酶的α亚基的pheS*基因,通过PCR扩增加入枯草芽孢杆菌强启动子PgrosE-69,将它与pDG1730连接构建重组质粒,运用化学转化法导Baci
抗虫抗除草剂转基因水稻T1C19杂草化潜力的研究
摘要:为评估复合性状转基因水稻T1C-19大规模推广后演化为杂草的生态风险,在农田环境下,比较了抗虫抗除草剂水稻T1C-19、其受体水稻明恢63(MH63)、南京地区常规稻(CG)丰两优香一号的生存竞争能力、繁育能力、对除草剂的耐受性、自生苗情况以及种子生存能力,以此评价转转基因水稻T1C-19的杂草化风险。结果显示无论是适宜季节还是非适宜季节T1C-19与MH63的生存竞争能力、繁育能力无显著性差异,且都显著性地低于常规水稻。T1C-19与MH63对常规除草剂苄·二氯的耐受性一致,但与常规水稻相比,对该
快速冷却对猪肉品质的影响作用研究
摘 要:将12头杂交猪胴体随机分为两组(每组六头),分别采用常规冷却(0~4℃)24h,快速冷却(-20℃)1.5h后转入0~4℃冷库冷却22.5h。肉质测定结果表明:快速冷却加快了背最长肌温度的下降,显著减缓了冷却初期的糖酵解速率,减缓了ATP与ADP的消耗,减慢了糖原的无氧酵解过程,减缓了乳酸的生成,使得早期胴体pH下降速率变慢,但对糖酵解反应的终点并没有显著的影响。因此认为快速冷却对猪肉持水力提高有一定作用,但是作用有限。
小鼠骨髓间充质干细胞的分离与鉴定
摘要:间充质干细胞(Mesenchymal stem cell, MSC)是一种广泛分布于动物和人的骨髓、脂肪、肝脏等组织中的成体干细胞,其不仅具有自我增殖和多向分化潜能,更具有其他干细胞所不具备的免疫调节功能,近年来,其在免疫生物学治疗中的应用逐渐得到关注。目前MSC的研究建立在对其的有效分离及体外扩增上,常使用小鼠作为实验模型对其骨髓间充质干细胞进行有效的分离以及体外培养,用于体外研究。鉴此,本课题旨在通过全骨髓贴壁法分离出小鼠中的骨髓间充质干细胞,体外培养后对其表面分子标记及分化潜能进行鉴定,同时检
小鼠肝脏早期发育的基因调控
摘要:叶面肥,作为一种根外肥料合理的弥补了作物根部追肥的不足与缺陷,同时是一种直接、高效的辅助措施,其应用已成为现代农业生产中一项重要的施肥技术。废弃羽毛价廉物美,是一种很好的蛋白质及氨基酸资源,同时氨基酸对于植物的生长有着重要的意义。本研究测定了废弃羽毛酸解液的一些指标:总氨基酸含量、游离氨基酸含量,全氮全磷全钾含量以及钙、镁、铁、锌等元素的含量,并通过盆栽实验验证该酸解液的促生效果并找到在农业生产中的最佳稀释倍数。经过分析比较,最终认为该酸解液原液稀释8000倍喷施效果最好。本课题的研究不仅有利于废弃
小鼠肝脏早期发育的基因调控
摘要: 肝脏作为一个重要的内脏器官,在体内发挥着多种功能,例如:代谢功能、解毒作用以及胆汁分泌等等。肝脏发育是一个非常复杂的过程,受到许多信号的精确调控。对肝脏发育过程中不同时期基因的表达情况进行研究有利于解析肝脏发育过程的相关机制,并且指导体外高效诱导多能性干细胞向成熟肝细胞的分化。本课题利用荧光激活细胞分拣术(fluorescence-activated cell sorting, FACS)从小鼠胚胎中分离出前肠内胚层细胞以及新生成肝细胞,并通过RNA-seq对这两个时期的细胞进行了转录组分析。此项
小麦幼苗吸收铬的机理研究
摘要:运用水培法,研究了41个青菜品种对铬(Cr6+)耐受性、吸收以及累积的特性。结果表明,在100μMCr6+处理下,不同青菜品种的耐性及吸收、积累铬能力具有显著差异。铬(Cr6+)对青菜地上部分的抑制率为10.3%~48.3%,对根系的抑制率为12.0%~58.4%,铬(Cr6+)对根系部分的抑制更为的显著。青菜根系的Cr的含量为403 mg·Kg-1~970.6 mg·Kg-1,而地上部分的Cr含量为19.9 mg·Kg-1~72.6 mg·Kg-1,根系Cr含量显著高于地上部。每盆根系Cr积累量为
小麦幼苗吸收铬的机理研究
摘要:小麦作为我国最大的粮食作物之一,研究其铬吸收的机理对于粮食安全,以及土壤污染治理等具有重要意义。通过浓度吸收动力学,代谢抑制剂2,4-二硝基苯酚(DNP),低温处理,离子通道抑制剂处理,必需元素竞争性吸收以及四种有机酸柠檬酸、苹果酸、草酸、甘氨酸不同比例的添加来研究小麦铬吸收的方式,吸收通道以及有机酸对其吸收的影响。结果表明,主动吸收是铬吸收的重要方式。铬吸收与Ca、K、Mg、Cu、Mn、P、Fe离子通道都有关系,其中K、Mg、Mn、P抑制其吸收,Ca、Cu、Fe促进铬吸收;草酸只有在1:1添加时,
对和厚朴酚敏感性不同的几种酵母菌株在细胞自噬方面的差异
摘要:以玉米农大108为材料,在NaCl浓度为200mmol/L的盐胁迫下,设置富氢水浓度分别为0 % 、25%、50%、75%、100% 5个处理,利用快速叶绿素荧光诱导动力学曲线分析技术( JIP-test) ,研究了H2对NaCl 胁迫下光合作用的影响. 实验结果表明: 盐胁迫条件下,单位面积捕获的光能( TRo /CSo) 、电子传递的量子产额( ETo /CSo) 、单位面积的反应中心数量( RC /CSo) 、PSⅡ最大光化学效率( Fv /Fm) 和光化学性能指数( PIABS) 明显降低