不同种质菘蓝的药材质量差异研究
目录
摘要 1
关键词 1
1. 材料与方法 1
1.1材料 1
1.2仪器与试剂 1
1.3方法 2
1.3.1生物碱含量测定 2
1.3.2 氨基酸含量测定 2
2. 结果与分析 2
2.1不同产地板蓝根中生物碱含量分析 3
2.2不同产地大青叶中生物碱含量分析 5
2.3不同产地板蓝根中氨基酸含量分析 5
2.4不同产地大青叶中氨基酸含量分析 8
2.5菘蓝不同部位生物碱和氨基酸含量相关性分析 9
3.讨论 9
3.1不同产地板蓝根、大青叶中生物碱和氨基酸含量 9
3.2不同产地的主要环境因子分析 9
3.3生物碱和氨基酸的相关性分析 10
致谢 10
参考文献 10
Abstract 11
Key words 11
不同种质菘蓝的药材质量差异研究
学 生 贾 萍
[摘要]：目的：通过测定菘蓝生物碱，氨基酸含量来评价不同产地菘蓝的质量差异。方法：以生物碱，氨基酸作为指标，用比色法测定板蓝根和大青叶中生物碱和氨基酸的含量。结果：发现来自不同产地的菘蓝，其板蓝根和大青叶的生物碱、氨基酸含量均存在差异。大部分样品叶片所含的生物碱高于板蓝根，板蓝根氨基酸含量多数高于大青叶。结论：通过比较，山西芮城、河北石家庄、河北安国、内蒙古包头、安徽亳州、江苏灌南、山东菏泽、江西樟树这8个产地的菘蓝质量较优。
[关键词]：菘蓝；板蓝根；大青叶；氨基酸；生物碱
菘蓝（Isatis indigotica Fort）为十字花科植物，其干燥根入药，药材名板蓝根，是我国常用中药材之一；其叶片入药，药材名大青叶（《中华人民共和国药典》（2010年版）收录）。板蓝根味苦、性寒，具有清热解毒、凉血利咽的功效[1]；临床上 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: ^351916072*
多用于流行性感冒、流行性腮腺炎、慢性咽炎、风热感冒等[2]。药理研究表明，板蓝根具有多种抗菌[3]、抗病毒成分[46]、可增强机体免疫力，并能防止SARS的流行[7]，是板蓝根颗粒、复方板蓝根颗粒等多种中成药及板蓝根凉茶的主要原料。大青叶具有清热解毒、凉血消斑、利咽止痛之功效。用于温邪入营、高热神昏、发斑发疹、黄疸热痢、痄腮喉痹、丹毒痈肿。临床上则用作治疗各种病毒性流行感冒、流行性腮腺炎和病毒性肝炎等感染性疾病[7]。许多学者为探明板蓝根、大青叶的治病原理，对其化学成分进行了大量研究，发现其中含有六、七十多种化合物，且两者大部分化学成分相同[8，9]，其中主要有告依春、表告依春、氨基酸、多糖、靛蓝、靛红、靛苷等多种有效成分。
近年来，随着人民消费水平及保健意识的提高，市场上对板蓝根药材需求量日趋增大，各地开始广泛引种栽培。然而各地区由于地理环境及栽培管理的不同，导致药材在产量和质量上存在较大差异，药材质量难以保障。为此本研究从全国共收集了16份菘蓝种质材料，并进行了田间比较试验，对其有效成分进行研究。有研究表明板蓝根中总生物碱是其抗病毒有效物质[10]，目前板蓝根药效物质研究表明，氨基酸是其发挥抗病毒作用的物质基础之一。板蓝根中结合性氨基酸是抗病毒的有效成分[11]。因此本研究通过对样品中生物碱，氨基酸含量的测定来评定这16种菘蓝的品质优劣。
材料与方法
1.1材料 2013年，分别从我国山西芮城、安徽亳州、江苏灌南、山东菏泽、河南原阳、河南汝州、河北石家庄、河北安国、陕西商洛、宁夏隆德、内蒙古包头、甘肃天水、四川广元、江西樟树、云南弥渡、新疆乌鲁木齐等地采集菘蓝种质（共16份），经大学郭巧生教授鉴定为十字花科菘蓝（Isatis indigotica Fort）。2013年，在同一条件下定植于大学中药材研究所种质圃。2014年1月采收后粉碎过60目筛，充分混匀以备用。
1.2仪器与试剂
仪器：UV5200型紫外—可见分光光度计（上海元析仪器有限公司）；电热恒温水浴锅（北京长源实验设备厂）；KQ250B型超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）；Eppendrof 高速冷冻离心机（centrifuge 5810R）
试剂：靛玉红对照品（中国药品生物制品检定所，纯度>98%、批号110717200201）；亮氨酸（AR），氯仿（AR），茚三酮，正丙醇（AR），正丁醇（AR），乙二醇（AR），乙酸，乙酸钠，抗坏血酸，氨水，柠檬酸，柠檬酸钠，溴麝香草酚蓝，氢氧化钠。
1.3方法
1.3.1生物碱含量测定
标准曲线：配制20μg /mL靛玉红母液：称取0.002g靛玉红，用氯仿定容至100mL；母液0、2、4、8、10、15、20、40mL定容至50mL，即得浓度分别为0、0.8、1.6、3.2、4、6、8、16mg/mL的供试液；取上述供试液各6mL，对照加氯仿，依次加入缓冲液5mL，溴酚蓝1mL，振摇1min，静置1h后，分取氯仿层；取1mL氯仿层加9mL氯仿，于波长289nm处测定其吸光值。
以靛玉红对照品量（mg）为横坐标，吸光度为纵坐标，求得回归方程为y=0.0152x+0.0050，R2=0.9991
（x代表溶液体积；y代表溶液吸光值），对照品在0～16mg范围内呈良好的线性关系。
样品制备：称细粉0.15g ，加浓氨水0.5mL，氯仿8mL，冷浸3h，超提1h；6000转/min离心20min，取上清6mL于锥形瓶中，转入分液漏斗中，依次加入缓冲液5mL，溴酚蓝1mL，振摇1min，静置1h后，分取氯仿层1mL加氯仿9mL；于波长289nm处测定其吸光值，根据回归方程计算样品中生物碱含量。
1.3.2氨基酸含量测定
标准曲线：
表1 标准曲线制备
试剂
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