覆盆子与山莓和蓬蘽果实的比较研究

目录
摘要 1
关键词 1
1 材料与方法 1
1.1 材料 1
1.2 仪器 1
1.3 方法 1
1.3.1 形态特征描述 1
1.3.2 显微观察比较 1
1.3.3 薄层层析比较 1
1.3.4 成分分析比较 2
2 结果与分析 2
2.1 覆盆子、山莓和蓬蘽果实性状描述 2
2.2 覆盆子、山莓和蓬蘽果实粉末显微观察 3
2.3 覆盆子、山莓和蓬蘽果实薄层层析比较 3
2.4 覆盆子、山莓和蓬蘽果实成分分析比较 4
2.4.1 黄酮提取测定 4
2.4.2 总糖提取测定 5
2.4.3 总有机酸提取测定 5
3 讨论 6
致谢 6
参考文献： 6
Abstract 7
Keyword 7
覆盆子与山莓和蓬蘽果实的比较研究
学 生 莫日江
[摘要] 目的：为鉴别覆盆子与混淆品山莓和蓬蘽提供实验依据。方法：对三者的外观性状、显微特征、薄层层析及成分等方面进行鉴别比较。结果：蓬蘽表面光亮果实相对较大，山莓柔毛较多果实较小，覆盆子柔毛也较多果实居中；覆盆子的粉末特征中草酸钙簇晶最大且棱角钝，山莓和蓬蘽中的草酸钙簇晶相对较小且棱角锐尖。在薄层层析比较中覆盆子在Rf值为0.8处有一个特征斑点可与山莓和蓬蘽区别。成分比较中覆盆子总黄酮含量最高，为0.95%，而山莓、蓬蘽总黄酮含量接近，分别为0.49%、0.47%。但覆盆子的总糖含量和总有机酸含量最少，分别为1.025%、2.038%，山莓含量最高，分别为2.308%、3.152%。结论：覆盆子与山莓和蓬蘽果实的形态及成分都存在差异。
[关键词] 混淆品；比较；覆盆子；差别
掌叶覆盆子(Rubus chingii Hu)又称华东覆盆子、大号角公、牛奶母、树莓，蔷薇科悬钩子属浆果植物。近成熟干燥果实为常用中药，其性温，味甘酸，入肝肾经，具补肝肾、缩小便、助阳固精，明目之功效，用于治疗 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: @351916072@ 
阳痿、肾虚遗精、虚劳、遗尿等病症[1]。其化学成分多含萜类、黄酮、生物碱和酚酸类等[2]。成熟果实是新型高营养的野生果品，富含氨基酸、维生素C、维生素E、维生素PP、超氧化物歧化酶、矿质元素和挥发性成分等，是具有抗诱变、抗衰老、免疫增强[3]、保健、美容之功效的“新型第三代水果”[4]。目前，覆盆子的研究集中于分类、植物化学、生物学特性等方面。国外研究主要对覆盆子花青素、葡萄苷酶、多酚氧化酶等活性物质进行研究[57]。对覆盆子易混淆品间的比较甚少。而市场上的掌叶覆盆子药材易被同科属的易混淆品山莓（Rubus corchorifolius L.f.）、蓬蘽（Rubus tephrodes Hance）掺混或充当。《中国药典》2010年版对覆盆子仅进行了粉末鉴别。覆盆子果实的商品来源单一，虽然山莓和蓬蘽果实的形态与覆盆子很相似，但没有覆盆子的功效，为了明辨混用，确保用药的安全性、有效性，促进覆盆子的市场健康发展，本文对它们形状特征、显微特征、薄层层析及成分等进行综合比较研究。
1 材料与方法
1.1 材料
覆盆子采自常州溧阳，山莓、蓬蘽均采自南京紫金山。芦丁对照品由中国药品生物制品检定所提供。其它试剂均为分析纯。
1.2 仪器
电子显微镜；KH5200B型超声清洗器(昆山禾创超声仪器有限公司)；HHS型水浴锅（巩义市予华仪器有限责任公司）；DHG9140A型电热恒温鼓风干燥箱（上海三发科学仪器有限公司）；TDZ5多管架自动平衡离心机（长沙湘仪离心仪器有限公司)；旋转蒸发器RE52A(上海亚荣生化仪器厂)；电子天平；ZF1三用紫外分析仪（郑州南北仪器设备有限公司）；UV1200型紫外可见分光光度器（上海美谱达仪器有限公司）。
1.3 方法
1.3.1 形态特征描述 随机取覆盆子、山莓和蓬蘽正常果实各5个，进行外观及果实上的小核果的性状进行描述，量取各果实直径大小及高。
1.3.2 显微观察比较 分别取覆盆子、山莓和蓬蘽的粉末少许，放在各载玻片中央，①滴甘油1滴，30s后观察；②滴加水合氯醛12滴，在酒精灯上加热透化，然后观察。
1.3.3 薄层层析比较 取覆盆子、山莓和蓬蘽的粉末各1g，分别加50mL石油醚，索氏提取2.5h脱脂，残渣挥干石油醚，加50mL甲醇回流提取3h，滤过，滤液浓缩至2mL，作为供试品溶液。照薄层层析法试验，吸取上述两种溶液各5μL，分别点于同一硅胶G板上以醋酸乙酯﹕甲醇﹕水(5﹕1﹕1)[8]，展开，取出，晾干，喷0.5%AlCl3，甲醇溶液，置紫外灯(365nm)下检视，比较三者的异同。
1.3.4 成分分析比较 黄酮提取测定[9]：准确称取芦丁标准品0.024g，用30mL95%乙醇溶解，并完全转入100mL容量瓶中，用95%乙醇稀释定容，摇匀。分别吸取0.0，0.1，0.2，0.3，0.4，0.5mL置于6只10mL容量瓶中，各用95% 乙醇补充至4mL，加入0.5mL的NaNO2(1﹕20)，摇匀，放置7min后加入0.5mL的Al(NO3)3(1﹕10)，摇匀，放置8min后再加入4mL物质的量浓度为1molL1的NaOH，混匀，最后用95%乙醇稀释至刻度，10min后用波长510nm测定吸光度，不加芦丁溶液作为空白对照，用最小二乘法作线性回归，得芦丁浓度Y与吸光度A关系曲线的回归方程式。
准确称取各样品粉末5g，用脱脂滤纸包好，并置入索氏提取器中，加入纯甲醇80mL，然后放入水浴锅中，回流提取2h，放冷，将提取液转入100mL容量瓶中，再用纯甲醇少量多次洗涤烧瓶，洗涤液过滤并合并倒入容量瓶中，最后用纯甲醇溶剂稀释至100mL，摇匀。精密吸取各样液3份，取样量0.2mL，按照标准曲线制备方法显色，在波长510nm测吸光值。
总糖提取测定[10]：精密称取经105℃干燥至恒重的无水葡萄糖10mg，于100mL量瓶中，加蒸馏水溶解并稀释至刻度，浓度相当于0.1mgmL1。准确量取标准液0.0，0.2，0.4，0.6，0.8，1.0mL，分别置于干燥具塞试管中，加蒸馏水补至1mL，分别加入5%苯酚溶液1.5mL，摇匀，快速加入浓硫酸7.5mL，摇匀，置水浴中加热15min，取出冷至室温，于490nm波长处测定吸收度，以不加葡萄糖标液做空白对照，绘制标准曲线，建立线性回归方程。

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