蛾蝇抗菌肽attacinmf的基因克隆及其表达载体的构建

昆虫抗菌肽是是一类广泛存在于昆虫体内的小肽类物质，它是机体先天性免疫系统的重要组成部分，也是一种分子量小、热稳定性强、水溶性好、无免疫原性、强碱性、抗菌谱广的新型抗菌药物。到目前为止，蛾蝇来源的抗菌肽没有被报导确认过。在本实验室的前期工作中，我们对蛾蝇转录组进行分析时发现其具有attacin抗菌肽序列。在本研究中，我们拟以蛾蝇成虫提取的总RNA为原料，以attacin序列为模板设计上下游引物，通过PCR得到完整的双链cDNA并将其克隆到PMD19-T载体上，将连接产物导入大肠杆菌DE-3后进行抗生素筛选，对生长的菌落进行菌落PCR鉴定。实际工作中，我们成功构建了克隆载体，表达载体由于由于遇到困难暂时无法构建。本实验并未涉及蛾蝇attacin抗菌肽基因的诱导表达，但为进一步研究蛾蝇attacin抗菌肽的调控机制与功能提供了实验基础。
引言
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