氯化胆碱对盐胁迫下小青菜生长和生理特性的影响(附件)
[目的] 研究在盐胁迫下外源氯化胆碱对小青菜生长及其生理特性的影响。 [方法] 以四月慢为材料，选取干净的种子，于育苗盆中播种，设置0、100、200和300 mmol/L不同浓度氯化胆碱溶液（Choline chloride）浸种；盆钵试验以每两天浇灌200 mmol/LNaCl溶液模拟盐盐胁迫环境，设置200 mg/L不同浓度氯化胆碱溶液喷施叶片，以期分析小青菜幼苗生长对盐胁迫的响应以及外源氯化胆碱的缓解效应。[结果] 盐胁迫显著降低小青菜种子的各发芽指标、芽长和根长，外源物质氯化胆碱对盐旱胁迫有一定的缓解效应。苗期盐胁迫均显著降低小青菜生长指标如株高、生物量，生理指标超氧化物歧化酶（SOD）、脯氨酸和丙二醛含量增高，MDA含量降低。喷施外源氯化胆碱对上述小青菜形态和生理指标有一定的缓解效应。[结论] 盐胁迫对小青菜幼苗生长有显著的不利影响；外源物质氯化胆碱可有效缓解盐胁迫造成的影响。关键词 小青菜，盐胁迫，氯化胆碱，生长、生理影响
目 录
1 引言 1
2 材料与方法 2
2.1 供试材料 2
2.2 试验设计 2
2.2.1 育苗 2
2.2.2 盆钵试验 2
2.3 测定内容与方法 3
2.3.1 小青菜发芽试验 3
2.3.2 小青菜盆钵试验 3
2.4 数据分析 4
3 结果与分析 4
3.1 施加外源物质CC前后结果对比 4
3.2 外源氯化胆碱对盐胁迫下小青菜生长的影响 5
3.3 外源氯化胆碱对盐胁迫下小青菜生理指标的影响 6
4 讨论 8
结 论 9
致 谢 11
参 考 文 献 13
1 引言
土壤盐渍化是目前世界上最严重的环境和生态问题之一。全球大约有8.31亿hm2的土壤受到盐渍化的威胁[1],面积相当于委内瑞拉国土面积的10倍,法国的20倍。而这样的数字正在以可怕的速度上升着。我国是盐渍土分布较为广泛的国家,据有关数据统计, 我国盐渍土总面积约3600万hm2,占全国可利用土地面积的4.88%[2]。其比重之 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: ^351916072*
大足以体现我国土壤盐渍化问题的严峻,大面积的盐土地对农业发展直接影响而成为十分严重的威胁。土壤中盐分的积累对植物生长有很大的危害,土壤中盐分会导致植物由离子失衡而引起离子毒害、营养亏缺和渗透胁迫[3]等。所以当前任务是研究盐胁迫下农作物的基础生理响应,在农业生产的理论和实践上都有尤其重要的意义。
小青菜：又名小白菜,十字花科芸薹属,在我国栽培种植十分广泛在人们日常饮食中最为常见的蔬菜之一。据测定,小白菜是蔬菜中含矿物质和维生素最丰富的菜[4]。现在对小青菜的研究主要在铅、镉等胁迫下的情况数量较多,而在盐胁迫方面的研究不是很涉猎,而土壤盐渍化成为全球难题的大环境下,了解小青菜对于盐胁迫下的生长生理特性的情况就尤为重要。从而能对产量上带来一些有利的分析。面对土壤盐渍化严重影响了小青菜的产量的大难题，前人的研究上也找到了一些办法来缓解盐胁迫带来的不利影响如合理施肥和合理轮作等。而本次实验选择的措施则是加入外源物来缓解盐胁迫带来的负面影响。
氯化胆碱作为一类新型的植物生长调节剂在农业发展中有着广泛的应用,其低毒，进入土壤无污染等特点更增加了其应用范围[5] ,有研究表明：氯化胆碱进入植物体内后会转化为甜菜碱和磷脂酰胆碱[6] ,氯化胆碱通过转化甜菜碱加以影响植物体内酶活性提高作物光合作用增加光合产物的输出达到增加产量的目的。王永俊等研究表明适宜的氯化胆碱浸种可以缓解盐胁迫对水稻种子的抑制,明显提高发芽率、发芽势和发芽指数[7]。有研究提出氯化胆碱能促进幼苗生长；改善马铃薯、玉米籽粒和苹果的品质,促进根系的生长,提高块根块茎的产量[8]。氯化胆碱在对植物生理影响有了许多研究,但是氯化胆碱在小青菜的生产领域研究基本呈现空白的情况。本研究通过使用不同浓度的氯化钠对小青菜进行处理，通过不同的浓度的氯化钠浸提液研究对甘小青菜的生长的影响,测定其生长指标株高和生物量；叶绿素、脯氨酸、丙二醛、SOD生理指标,试图了解不同氯化钠含量下氯化胆碱对小青菜生长的影响。植物体内的抗氧化酶类和非酶抗氧化物质能够清除体内多余的活性氧自由基,维持自由基的代谢平衡,保护植物免受伤害[9]。为此,本研究以小青菜为试材,在盐分胁迫条件下,从生长、膜脂过氧化、抗氧化系统等方面探讨不同浓度氯化胆碱对小白菜抗盐性的影响及其生理机制,以期为合理施肥和提高植物抗逆性提供理论依据。
2 材料与方法
2.1 供试材料
供试小青菜：四月慢,本品种适应性广,春秋两季均可种植。种植株直立,束腰,叶面平滑,叶柄浅绿色,品质好。
使用药剂：氯化胆碱（以下简称CC）由国药集团化学试剂有限公司提供的分析纯试剂。
试验地点：生科学院植物生理实验室
2.2 试验设计
2.2.1 育苗
选取籽粒饱满、大小一致的干净小青菜种子,经0.5% 次氯酸钠消毒10min,蒸馏水冲洗3遍后,用滤纸吸干附着水后待用。
具体方法：将干燥后的小青菜种子播种于育苗盆中,用基质土壤培养。将育苗盆置于室外下,向盆中每天分别加入少量蒸馏水（CK）,观察其发芽情况。
2.2.2 盆钵试验
选取规模大小一致的塑料盆钵（规格：口直径11.5cm,底直径8.5cm,高10cm）将等量有机基质（淮安科丰有机质）装入盆钵中,浇等量的自来水,待育苗盆中的小青菜幼苗长至一叶一心后一周移载至塑料盆钵中。每盆移三株,等待苗长至三叶一心时取其中2株,在土壤中加入不同浓度的氯化钠溶液（0、100、200，300 mmol/L）,以及外源物质CC（0.2%）。8个处理,每个处理5盆。连续处理2周后进行生长生理指标的测量并拍照记录。
两因素完全随机试验，（1）模拟盐胁迫环境：设0、100、200，300 mmol/L NaCL溶液,蒸馏水为对照（CK）4个水平；（2）缓解物质—外源氯化胆碱,设0、200 mgL1氯化胆碱溶液共2个水平。试验共8个处理,每个处理5盆,共40盆。
具体方法：小青菜三叶一心时开始处理,平均每2天各盆分别浇80ml盐胁迫溶液和蒸馏水（对照）,共浇3次,在此基础上,平均每两天分别叶面均匀喷施不同浓度的CC溶液,共喷施6次,18天后取样进行各项指标的测定。
2.2.3 盆钵处理
试验处理见下表。
编号
NaCl（mmol/L）
目 录
1 引言 1
2 材料与方法 2
2.1 供试材料 2
2.2 试验设计 2
2.2.1 育苗 2
2.2.2 盆钵试验 2
2.3 测定内容与方法 3
2.3.1 小青菜发芽试验 3
2.3.2 小青菜盆钵试验 3
2.4 数据分析 4
3 结果与分析 4
3.1 施加外源物质CC前后结果对比 4
3.2 外源氯化胆碱对盐胁迫下小青菜生长的影响 5
3.3 外源氯化胆碱对盐胁迫下小青菜生理指标的影响 6
4 讨论 8
结 论 9
致 谢 11
参 考 文 献 13
1 引言
土壤盐渍化是目前世界上最严重的环境和生态问题之一。全球大约有8.31亿hm2的土壤受到盐渍化的威胁[1],面积相当于委内瑞拉国土面积的10倍,法国的20倍。而这样的数字正在以可怕的速度上升着。我国是盐渍土分布较为广泛的国家,据有关数据统计, 我国盐渍土总面积约3600万hm2,占全国可利用土地面积的4.88%[2]。其比重之 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: ^351916072*
大足以体现我国土壤盐渍化问题的严峻,大面积的盐土地对农业发展直接影响而成为十分严重的威胁。土壤中盐分的积累对植物生长有很大的危害,土壤中盐分会导致植物由离子失衡而引起离子毒害、营养亏缺和渗透胁迫[3]等。所以当前任务是研究盐胁迫下农作物的基础生理响应,在农业生产的理论和实践上都有尤其重要的意义。
小青菜：又名小白菜,十字花科芸薹属,在我国栽培种植十分广泛在人们日常饮食中最为常见的蔬菜之一。据测定,小白菜是蔬菜中含矿物质和维生素最丰富的菜[4]。现在对小青菜的研究主要在铅、镉等胁迫下的情况数量较多,而在盐胁迫方面的研究不是很涉猎,而土壤盐渍化成为全球难题的大环境下,了解小青菜对于盐胁迫下的生长生理特性的情况就尤为重要。从而能对产量上带来一些有利的分析。面对土壤盐渍化严重影响了小青菜的产量的大难题，前人的研究上也找到了一些办法来缓解盐胁迫带来的不利影响如合理施肥和合理轮作等。而本次实验选择的措施则是加入外源物来缓解盐胁迫带来的负面影响。
氯化胆碱作为一类新型的植物生长调节剂在农业发展中有着广泛的应用,其低毒，进入土壤无污染等特点更增加了其应用范围[5] ,有研究表明：氯化胆碱进入植物体内后会转化为甜菜碱和磷脂酰胆碱[6] ,氯化胆碱通过转化甜菜碱加以影响植物体内酶活性提高作物光合作用增加光合产物的输出达到增加产量的目的。王永俊等研究表明适宜的氯化胆碱浸种可以缓解盐胁迫对水稻种子的抑制,明显提高发芽率、发芽势和发芽指数[7]。有研究提出氯化胆碱能促进幼苗生长；改善马铃薯、玉米籽粒和苹果的品质,促进根系的生长,提高块根块茎的产量[8]。氯化胆碱在对植物生理影响有了许多研究,但是氯化胆碱在小青菜的生产领域研究基本呈现空白的情况。本研究通过使用不同浓度的氯化钠对小青菜进行处理，通过不同的浓度的氯化钠浸提液研究对甘小青菜的生长的影响,测定其生长指标株高和生物量；叶绿素、脯氨酸、丙二醛、SOD生理指标,试图了解不同氯化钠含量下氯化胆碱对小青菜生长的影响。植物体内的抗氧化酶类和非酶抗氧化物质能够清除体内多余的活性氧自由基,维持自由基的代谢平衡,保护植物免受伤害[9]。为此,本研究以小青菜为试材,在盐分胁迫条件下,从生长、膜脂过氧化、抗氧化系统等方面探讨不同浓度氯化胆碱对小白菜抗盐性的影响及其生理机制,以期为合理施肥和提高植物抗逆性提供理论依据。
2 材料与方法
2.1 供试材料
供试小青菜：四月慢,本品种适应性广,春秋两季均可种植。种植株直立,束腰,叶面平滑,叶柄浅绿色,品质好。
使用药剂：氯化胆碱（以下简称CC）由国药集团化学试剂有限公司提供的分析纯试剂。
试验地点：生科学院植物生理实验室
2.2 试验设计
2.2.1 育苗
选取籽粒饱满、大小一致的干净小青菜种子,经0.5% 次氯酸钠消毒10min,蒸馏水冲洗3遍后,用滤纸吸干附着水后待用。
具体方法：将干燥后的小青菜种子播种于育苗盆中,用基质土壤培养。将育苗盆置于室外下,向盆中每天分别加入少量蒸馏水（CK）,观察其发芽情况。
2.2.2 盆钵试验
选取规模大小一致的塑料盆钵（规格：口直径11.5cm,底直径8.5cm,高10cm）将等量有机基质（淮安科丰有机质）装入盆钵中,浇等量的自来水,待育苗盆中的小青菜幼苗长至一叶一心后一周移载至塑料盆钵中。每盆移三株,等待苗长至三叶一心时取其中2株,在土壤中加入不同浓度的氯化钠溶液（0、100、200，300 mmol/L）,以及外源物质CC（0.2%）。8个处理,每个处理5盆。连续处理2周后进行生长生理指标的测量并拍照记录。
两因素完全随机试验，（1）模拟盐胁迫环境：设0、100、200，300 mmol/L NaCL溶液,蒸馏水为对照（CK）4个水平；（2）缓解物质—外源氯化胆碱,设0、200 mgL1氯化胆碱溶液共2个水平。试验共8个处理,每个处理5盆,共40盆。
具体方法：小青菜三叶一心时开始处理,平均每2天各盆分别浇80ml盐胁迫溶液和蒸馏水（对照）,共浇3次,在此基础上,平均每两天分别叶面均匀喷施不同浓度的CC溶液,共喷施6次,18天后取样进行各项指标的测定。
2.2.3 盆钵处理
试验处理见下表。
编号
NaCl（mmol/L）
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