外施水杨酸对青叶绿萝抗旱性的影响(附件)
青叶绿萝是良好的室内观叶植物，但却常常面临着干旱的问题。本次研究拟通过控制变量法，在处于干旱胁迫下的青叶绿萝中加入不同浓度水杨酸，进而测定超氧化物气化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）、过氧化物酶（POD）、丙二醛（MDA）、电导率、叶绿素含量这六个指标，以衡量哪个浓度水杨酸处理下青叶绿萝抗旱性更好。研究发现，在中等浓度0.40mmol/L水杨酸浓度的条件下对于青叶绿萝模拟干旱条件下的六大指标有较大的影响，青叶绿萝整体的活性处于最旺盛的状态，过高或过低水杨酸浓度对于青叶绿萝模拟干旱条件下的六大指标就有抑制作用。表明0.40mmol/L水杨酸对于青叶绿萝的抗旱性有缓解效应。关键词 干旱胁迫，生理生化指标
目 录
1 引言 1
2 材料与方法 2
2.1 实验材料 2
2.2 实验方法 3
3 结果与分析 5
3.1 水杨酸对干旱条件下青叶绿萝POD活性的影响 5
3.2 水杨酸对干旱条件下青叶绿萝超氧化物歧化酶活性的影响 6
3.3 水杨酸对干旱条件下青叶绿萝过氧化氢酶活性的影响 7
3.4 水杨酸对干旱条件下青叶绿萝细胞质膜透性的影响 8
3.5 水杨酸对干旱条件下青叶绿萝叶绿素含量活性的影响 9
3.6 水杨酸对干旱条件下青叶绿萝丙二醛含量活性的影响 9
3.7 水杨酸对干旱条件下青叶绿萝活性的影响 10
结 论 12
致 谢 13
1 引言
水杨酸在植物界普遍存在，作为一种植物内源信号分子，对植物的许多生理过程如植物开花、产热、种子发芽、气孔关闭、膜通透性及离子的吸收等起调控作用，一些科学家认为应该将之作为一种新的植物激素来看待[1]。
水杨酸是植物体内的代谢产物，是重要的外源信号物质，已有很多研究表明，适宜浓度水杨酸溶液预处理对植物提高抗旱性有一定促进作用，并且能够提高植物在逆境胁迫下萌发的能力及植物的抗逆性[1]。
有关水杨酸（SA）与植物抗逆的研究始于20世纪70年代，研究发现，SA与植物抗病之间存在着莫大的关联。不仅如此，之后研究也证实SA对于植物抵 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: ^351916072*
抗非生物胁迫起到了重要的作用，特别是干旱胁迫[1]。
黄水文、葛淑芳等人研究发现，作为外源物质之一的SA参与植物逆境胁迫主要通过增加植物含水量、增强植物细胞膜稳定性等来提高植物对干旱耐受的能力[2]。
周欣等人研究发现，水杨酸对植物的抗旱诱导可能与水杨酸能够诱导某些植物气孔关闭有关[3]。
张会等人研究发现外源SA能减缓水分胁迫下菜豆幼苗叶片含水量和光和色素含量的下降，从而保持叶片的SOD、POD活性[4]。
夏方山等人通过进一步研究烟草玉米、黑麦草、高羊茅、苦荞及扁蓿豆等植物种子耐旱性发现，低浓度SA保持了种子及幼苗内较高的抗坏血酸过氧化物酶等抗氧化酶的活性，降低了ROS的生成，抑制了膜脂过氧化作用的产生，维持了细胞正常渗透压，减轻对膜结构和功能的破坏，降低细胞的膜透性，使外渗液电导率下降，从而提高种子萌发期的抗旱性[5]。但高浓度SA浸种抑制干旱条件下种子的萌发及幼苗生长，说明并不是SA浓度越高，对植物抗旱性就越好[5]。
有研究表明使用不同浓度的SA喷施玉米叶片后，可以增强玉米幼苗积累可溶性糖和脯氨酸，光合速率、气孔导度和蒸腾速率下降，叶片内的水分含量升高，抗旱性就增强[6]。
王海凤等人研究发现干旱抑制植物正常生长，用0.1mmol/L SA喷施毛豆幼苗叶片，提高了根系活力和叶绿素含量、降低了细胞膜透性及MDA含量，增强了毛豆幼苗对干旱环境的抵抗能力[7]。
曹翠玲，刘林丽，田强兵等人在对干旱条件下叶面喷施适宜浓度的SA，能够提高 玉米幼苗的抗旱性的研究中发现。干旱条件下，叶面喷施适宜浓度的SA，虽然叶片光合速率没有多大的提高，但是气孔导度却明显下降，蒸腾速率也有明显的下降，特别是喷施0.2g/L SA，蒸腾速率最小，玉米幼苗持水量提高，同时测定的膜透性比未喷施SA的小，渗透调节物质可溶性糖含量较高，脯氨酸水平与充足灌水的相同，这些良性的生理代谢的进行，最终导致玉米在收获后有较高的干物质积累。所以适宜浓度的SA能够在一定程度上提高玉米幼苗的抗旱性。我们认为，SA提高玉米抗旱性的可能生理机制是降低了气孔导度，降低了叶片的蒸腾速率，提高了叶片内的水分含量，使玉米幼苗的生物量最大[8]。
目前将SA应用于提高植物的抗旱性方面的研究已有许多报道[9]，但是对于青叶绿萝的影响鲜有报道。青叶绿萝在温室栽培过程中由于管理不当，如室内空气流通不畅，室内空气干燥，长期放在通风口处风大等等，时常面临缺水干旱的威胁，例如施肥过多导致根系受损吸水困难，浇水不当例如大水漫灌导致根系腐烂而死，温度突变导致冻拔、冻裂等等都会导致青叶绿萝因吸水困难而死亡。能找到外源信号物质提高青叶绿萝抗旱性具有重要意义。前人研究表明水杨酸对许多植物有抗旱作用，对青叶绿萝有同样的效果。
2 材料与方法
2.1 实验材料
实验器材：容量瓶；研钵；漏斗；天平；滤纸；打孔器；滴管；剪刀；移液管；电导仪；天平；温箱；真空干燥器；抽气机；恒温水浴锅；注射器；分光光度计等等。
酶液配置：取植株相同部位的功能叶叶片取样时避开粗大叶脉，分别称取0.2g左右的叶片，加入1.6ml遇冷磷酸缓冲液（50mmol/L，pH7.0），冰浴研磨哦，匀浆以12000rpm四摄氏度条件下离心20分钟，取上清液用于酶活性测定。
硫代巴比妥酸配置：5% TCA 和0.67% TBA。80%丙酮：用95%乙醇。
愈创木酚混合液：取50mL磷酸缓冲液 (PBS，0.2M，pH6.0)，加入0.019mL愈创木酚后加热搅拌，直至愈创木酚溶解，冷却后加入0.028mL 30% H2O2 ，混合均匀，保存于冰箱中备用。
氮蓝四唑混合液：取烧杯加入54mL Met，2mLEDTA，2mL NBT，2mL核黄素混合均匀，保存于冰箱中备用。
紫外吸收法混合液：取烧杯加入100mL 0.15mol/L磷酸缓冲液(pH7.0)，0.1546mL H2O2。
2.2 实验方法
本研究以青叶绿萝为实验材料，研究干旱胁迫下水杨酸对青叶绿萝的保护功能的作用，通过植物生长指标；超氧化物歧化酶（SOD）；过氧化氢酶（CAT）；过氧化物酶（POD）；电导率；丙二醛（MOD）；电导率，以及叶绿素含量，来探讨水杨酸在干旱胁迫过程中对绿萝的保护功能。
目 录
1 引言 1
2 材料与方法 2
2.1 实验材料 2
2.2 实验方法 3
3 结果与分析 5
3.1 水杨酸对干旱条件下青叶绿萝POD活性的影响 5
3.2 水杨酸对干旱条件下青叶绿萝超氧化物歧化酶活性的影响 6
3.3 水杨酸对干旱条件下青叶绿萝过氧化氢酶活性的影响 7
3.4 水杨酸对干旱条件下青叶绿萝细胞质膜透性的影响 8
3.5 水杨酸对干旱条件下青叶绿萝叶绿素含量活性的影响 9
3.6 水杨酸对干旱条件下青叶绿萝丙二醛含量活性的影响 9
3.7 水杨酸对干旱条件下青叶绿萝活性的影响 10
结 论 12
致 谢 13
1 引言
水杨酸在植物界普遍存在，作为一种植物内源信号分子，对植物的许多生理过程如植物开花、产热、种子发芽、气孔关闭、膜通透性及离子的吸收等起调控作用，一些科学家认为应该将之作为一种新的植物激素来看待[1]。
水杨酸是植物体内的代谢产物，是重要的外源信号物质，已有很多研究表明，适宜浓度水杨酸溶液预处理对植物提高抗旱性有一定促进作用，并且能够提高植物在逆境胁迫下萌发的能力及植物的抗逆性[1]。
有关水杨酸（SA）与植物抗逆的研究始于20世纪70年代，研究发现，SA与植物抗病之间存在着莫大的关联。不仅如此，之后研究也证实SA对于植物抵 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: ^351916072*
抗非生物胁迫起到了重要的作用，特别是干旱胁迫[1]。
黄水文、葛淑芳等人研究发现，作为外源物质之一的SA参与植物逆境胁迫主要通过增加植物含水量、增强植物细胞膜稳定性等来提高植物对干旱耐受的能力[2]。
周欣等人研究发现，水杨酸对植物的抗旱诱导可能与水杨酸能够诱导某些植物气孔关闭有关[3]。
张会等人研究发现外源SA能减缓水分胁迫下菜豆幼苗叶片含水量和光和色素含量的下降，从而保持叶片的SOD、POD活性[4]。
夏方山等人通过进一步研究烟草玉米、黑麦草、高羊茅、苦荞及扁蓿豆等植物种子耐旱性发现，低浓度SA保持了种子及幼苗内较高的抗坏血酸过氧化物酶等抗氧化酶的活性，降低了ROS的生成，抑制了膜脂过氧化作用的产生，维持了细胞正常渗透压，减轻对膜结构和功能的破坏，降低细胞的膜透性，使外渗液电导率下降，从而提高种子萌发期的抗旱性[5]。但高浓度SA浸种抑制干旱条件下种子的萌发及幼苗生长，说明并不是SA浓度越高，对植物抗旱性就越好[5]。
有研究表明使用不同浓度的SA喷施玉米叶片后，可以增强玉米幼苗积累可溶性糖和脯氨酸，光合速率、气孔导度和蒸腾速率下降，叶片内的水分含量升高，抗旱性就增强[6]。
王海凤等人研究发现干旱抑制植物正常生长，用0.1mmol/L SA喷施毛豆幼苗叶片，提高了根系活力和叶绿素含量、降低了细胞膜透性及MDA含量，增强了毛豆幼苗对干旱环境的抵抗能力[7]。
曹翠玲，刘林丽，田强兵等人在对干旱条件下叶面喷施适宜浓度的SA，能够提高 玉米幼苗的抗旱性的研究中发现。干旱条件下，叶面喷施适宜浓度的SA，虽然叶片光合速率没有多大的提高，但是气孔导度却明显下降，蒸腾速率也有明显的下降，特别是喷施0.2g/L SA，蒸腾速率最小，玉米幼苗持水量提高，同时测定的膜透性比未喷施SA的小，渗透调节物质可溶性糖含量较高，脯氨酸水平与充足灌水的相同，这些良性的生理代谢的进行，最终导致玉米在收获后有较高的干物质积累。所以适宜浓度的SA能够在一定程度上提高玉米幼苗的抗旱性。我们认为，SA提高玉米抗旱性的可能生理机制是降低了气孔导度，降低了叶片的蒸腾速率，提高了叶片内的水分含量，使玉米幼苗的生物量最大[8]。
目前将SA应用于提高植物的抗旱性方面的研究已有许多报道[9]，但是对于青叶绿萝的影响鲜有报道。青叶绿萝在温室栽培过程中由于管理不当，如室内空气流通不畅，室内空气干燥，长期放在通风口处风大等等，时常面临缺水干旱的威胁，例如施肥过多导致根系受损吸水困难，浇水不当例如大水漫灌导致根系腐烂而死，温度突变导致冻拔、冻裂等等都会导致青叶绿萝因吸水困难而死亡。能找到外源信号物质提高青叶绿萝抗旱性具有重要意义。前人研究表明水杨酸对许多植物有抗旱作用，对青叶绿萝有同样的效果。
2 材料与方法
2.1 实验材料
实验器材：容量瓶；研钵；漏斗；天平；滤纸；打孔器；滴管；剪刀；移液管；电导仪；天平；温箱；真空干燥器；抽气机；恒温水浴锅；注射器；分光光度计等等。
酶液配置：取植株相同部位的功能叶叶片取样时避开粗大叶脉，分别称取0.2g左右的叶片，加入1.6ml遇冷磷酸缓冲液（50mmol/L，pH7.0），冰浴研磨哦，匀浆以12000rpm四摄氏度条件下离心20分钟，取上清液用于酶活性测定。
硫代巴比妥酸配置：5% TCA 和0.67% TBA。80%丙酮：用95%乙醇。
愈创木酚混合液：取50mL磷酸缓冲液 (PBS，0.2M，pH6.0)，加入0.019mL愈创木酚后加热搅拌，直至愈创木酚溶解，冷却后加入0.028mL 30% H2O2 ，混合均匀，保存于冰箱中备用。
氮蓝四唑混合液：取烧杯加入54mL Met，2mLEDTA，2mL NBT，2mL核黄素混合均匀，保存于冰箱中备用。
紫外吸收法混合液：取烧杯加入100mL 0.15mol/L磷酸缓冲液(pH7.0)，0.1546mL H2O2。
2.2 实验方法
本研究以青叶绿萝为实验材料，研究干旱胁迫下水杨酸对青叶绿萝的保护功能的作用，通过植物生长指标；超氧化物歧化酶（SOD）；过氧化氢酶（CAT）；过氧化物酶（POD）；电导率；丙二醛（MOD）；电导率，以及叶绿素含量，来探讨水杨酸在干旱胁迫过程中对绿萝的保护功能。
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