黑麦草体内可培养内生细菌的种群数量对芘污染的响应
持久性有机污染物（POPs）作为一种环境有机污染物，已成为环境问题研究的热点。其中多环芳烃（PAHs）是一类广泛分布于环境中的持久性有机污染物，由于其特殊的性质已成为研究环境有机污染的典型污染物。本文以芘作为高分子PAHs代表污染物，以黑麦草作为供试植株，探讨在芘污染条件下，植物体内可培养内生细菌的种群数量变化及其对芘的降解效能。实验结果表明，黑麦草能够吸收培养液中的芘。在芘污染下，黑麦草内生细菌群落结构改变，其根中的优势种属由原本的Enterobacter sp.变为Serratia sp.，茎中的优势种属由Chryseobacterium sp.变为Bacillus sp.。说明黑麦草体内可培养内生细菌对污染物做出了响应，从而影响植物体内芘的代谢。
目录
摘要 1
关键词 1
Abstract 1
Key words 1
引言： 1
1 材料与方法 2
1.1 实验材料 2
1.1.1 化学试剂与供试植物 2
1.1.2培养基与营养液 2
1.2 实验方法 3
1.2.1 黑麦草水培试验 3
1.2.2 黑麦草生物量测定 3
1.2.3 植物样品中PAHs的提取和测定 3
1.2.4 植物体内可培养内生细菌的分离纯化 3
1.2.5 植物内生细菌的菌种鉴定 4
1.2.6 植物内生细菌对PAHs的降解效能测定 4
1.3 数据处理 4
2 结果与分析 4
2.1 植物样品中芘含量 4
2.2 植物体内可培养内生细菌的种群结构 5
2.2.1 黑麦草体内可培养内生细菌的多样性及菌种鉴定 5
2.2.2 不同PAHs污染植物体内可培养内生细菌的种群变化 6
2.2.3 植物体内可培养内生细菌优势种属数量与植物体内PAHs积累量的关系 7
3 结论 8
致谢 8
参考文献： 8
黑麦草体内可培养内生细菌的种群数量对芘污染的响应
引言
引言
*好棒文|www.hbsrm.com +Q: ^351916072^
随着社会的持续高速发展，环境问题已越来越引起科研工作者的广泛关注。有研究表明，我国环境污染已开始从局部蔓延到区域，从城市、城郊逐步延伸到乡村，从单一污染扩展到复合污染。我国环境污染现状呈现出点源与面源污染共存，工业污染源、生活污染源和农业污染源叠加排放，一次污染物与二次污染物复合/交互作用的态势。同时我国的主要河流、湖泊及近海海域受到污染，局部地区水环境污染严重；约有1/5耕地受到不同程度的污染；制约我国经济社会的可持续发展，影响着人群健康。有研究人员指出与重金属污染相比，环境有机物污染更广泛、更复杂[1]。近年来，针对环境有机污染的研究一直是科研的热点内容。
持久性有机污染物(POPs) ，是指具有持久性，生物蓄积性，难挥发性和长距离迁移性，能沉积到土壤河流等环境介质中，易于在人体和生物体内富集，对生态环境和人体健康造成不良影响的有机污染物[2]。由于POPs在环境中的持久性和生物富集性，其对生态系统和人类健康危害性已经成为世界各国关注的焦点之一[3]。
PAHs是一类广泛分布于环境中的持久性有机污染物，具有致畸、致癌、致突变的特点[4]。多环芳烃进入大气环境后，绝大部分通过沉降进入土壤，污染土壤环境，据估计，有90%以上的多环芳烃在土壤表面残留[5]。同时PAHs的稳定性和疏水性造成其能持久地留存于环境中,特别是高分子量的PAHs。PAHs具有脂溶性和累积性,很容易被动物的肠胃吸收,并能经食物链逐级放大而富集,迅速广泛地分散到体内不同组织[6]。芘作为一类典型的PAHs，常被作为监测PAHs污染的指示物和其它PAHs光化学降解、生物降解的模型分子。
植物内生细菌是指能够在健康植物组织内栖居但对植物不造成实质性危害并且能与植物建立和谐联合关系的微生物[7]。内生细菌可以在植物体内大量聚集，将某些有机物转变为无机物，为植物提供生长发育所需的矿质营养元素; 同时还能分泌植物激素、合成特异性酶等，促进植物的生长发育[8,9]。近几年来，有关于植物内生应用于植物修复受有机污染土壤，一直是科研的前沿领域[10,11]。
本实验以芘作为PAHs代表性污染物，以黑麦草作为供试植株，探讨PAHs在芘污染条件下，植物体内可培养内生细菌的种群数量变化及其对芘的降解效能。本课题意在探究植物内生细菌对PAHs污染的响应，并为今后的相关研究提供依据。
1 材料与方法
1.1 实验材料
1.1.1 化学试剂与供试植物
化学试剂：菲(Phenanthrene，购自德国Fluka公司，纯度≥98%)，分子量(Mw)为178.23 gmol–1，25℃纯水中溶解度(Sw)为1.18 mgL–1，正辛醇水分配系数(log Kow)为4.57。芘(Pyrene，购自德国Fluka公司，纯度＞98%)，分子量(Mw)为202.26 gmol–1，25℃纯水中溶解度(Sw)为0.12 mgL–1，正辛醇水分配系数(log Kow)为5.18[12]。甲醇为色谱醇，其它试剂为分析纯。
供试植物：多年生黑麦草(Lolium multiflorum Lam)。
1.1.2培养基与营养液
LB 培养基: 10.0 g 蛋白胨，5.0 g 酵母提取粉和10.0 g NaCl 溶解于超纯水中，用NaOH 调节 pH 值至7.0，定容至1 L。加入15.0 g 琼脂粉，于121 ℃灭菌20 min。
无机盐培养基(MSM)： MgSO47H2O 0.20 gL–1，K2HPO43H2O 1.91 gL–1，(NH4)2SO4 1.50 gL–1，KH2PO4 0.50 gL–1；微量元素溶液(2 mL)：MnCl24H2O 0.425 mgL–1，CoCl26H2O 0.1 mgL–1，Na2MoO42H2O 0.01 mgL–1，ZnCl2 0.05 mgL–1，CuSO45H2O 0.015 mgL–1，， Na2SeO42H2O 0.01 mgL–1NiCl26H2O 0.01 mgL–1，pH 7.0。
目录
摘要 1
关键词 1
Abstract 1
Key words 1
引言： 1
1 材料与方法 2
1.1 实验材料 2
1.1.1 化学试剂与供试植物 2
1.1.2培养基与营养液 2
1.2 实验方法 3
1.2.1 黑麦草水培试验 3
1.2.2 黑麦草生物量测定 3
1.2.3 植物样品中PAHs的提取和测定 3
1.2.4 植物体内可培养内生细菌的分离纯化 3
1.2.5 植物内生细菌的菌种鉴定 4
1.2.6 植物内生细菌对PAHs的降解效能测定 4
1.3 数据处理 4
2 结果与分析 4
2.1 植物样品中芘含量 4
2.2 植物体内可培养内生细菌的种群结构 5
2.2.1 黑麦草体内可培养内生细菌的多样性及菌种鉴定 5
2.2.2 不同PAHs污染植物体内可培养内生细菌的种群变化 6
2.2.3 植物体内可培养内生细菌优势种属数量与植物体内PAHs积累量的关系 7
3 结论 8
致谢 8
参考文献： 8
黑麦草体内可培养内生细菌的种群数量对芘污染的响应
引言
引言
*好棒文|www.hbsrm.com +Q: ^351916072^
随着社会的持续高速发展，环境问题已越来越引起科研工作者的广泛关注。有研究表明，我国环境污染已开始从局部蔓延到区域，从城市、城郊逐步延伸到乡村，从单一污染扩展到复合污染。我国环境污染现状呈现出点源与面源污染共存，工业污染源、生活污染源和农业污染源叠加排放，一次污染物与二次污染物复合/交互作用的态势。同时我国的主要河流、湖泊及近海海域受到污染，局部地区水环境污染严重；约有1/5耕地受到不同程度的污染；制约我国经济社会的可持续发展，影响着人群健康。有研究人员指出与重金属污染相比，环境有机物污染更广泛、更复杂[1]。近年来，针对环境有机污染的研究一直是科研的热点内容。
持久性有机污染物(POPs) ，是指具有持久性，生物蓄积性，难挥发性和长距离迁移性，能沉积到土壤河流等环境介质中，易于在人体和生物体内富集，对生态环境和人体健康造成不良影响的有机污染物[2]。由于POPs在环境中的持久性和生物富集性，其对生态系统和人类健康危害性已经成为世界各国关注的焦点之一[3]。
PAHs是一类广泛分布于环境中的持久性有机污染物，具有致畸、致癌、致突变的特点[4]。多环芳烃进入大气环境后，绝大部分通过沉降进入土壤，污染土壤环境，据估计，有90%以上的多环芳烃在土壤表面残留[5]。同时PAHs的稳定性和疏水性造成其能持久地留存于环境中,特别是高分子量的PAHs。PAHs具有脂溶性和累积性,很容易被动物的肠胃吸收,并能经食物链逐级放大而富集,迅速广泛地分散到体内不同组织[6]。芘作为一类典型的PAHs，常被作为监测PAHs污染的指示物和其它PAHs光化学降解、生物降解的模型分子。
植物内生细菌是指能够在健康植物组织内栖居但对植物不造成实质性危害并且能与植物建立和谐联合关系的微生物[7]。内生细菌可以在植物体内大量聚集，将某些有机物转变为无机物，为植物提供生长发育所需的矿质营养元素; 同时还能分泌植物激素、合成特异性酶等，促进植物的生长发育[8,9]。近几年来，有关于植物内生应用于植物修复受有机污染土壤，一直是科研的前沿领域[10,11]。
本实验以芘作为PAHs代表性污染物，以黑麦草作为供试植株，探讨PAHs在芘污染条件下，植物体内可培养内生细菌的种群数量变化及其对芘的降解效能。本课题意在探究植物内生细菌对PAHs污染的响应，并为今后的相关研究提供依据。
1 材料与方法
1.1 实验材料
1.1.1 化学试剂与供试植物
化学试剂：菲(Phenanthrene，购自德国Fluka公司，纯度≥98%)，分子量(Mw)为178.23 gmol–1，25℃纯水中溶解度(Sw)为1.18 mgL–1，正辛醇水分配系数(log Kow)为4.57。芘(Pyrene，购自德国Fluka公司，纯度＞98%)，分子量(Mw)为202.26 gmol–1，25℃纯水中溶解度(Sw)为0.12 mgL–1，正辛醇水分配系数(log Kow)为5.18[12]。甲醇为色谱醇，其它试剂为分析纯。
供试植物：多年生黑麦草(Lolium multiflorum Lam)。
1.1.2培养基与营养液
LB 培养基: 10.0 g 蛋白胨，5.0 g 酵母提取粉和10.0 g NaCl 溶解于超纯水中，用NaOH 调节 pH 值至7.0，定容至1 L。加入15.0 g 琼脂粉，于121 ℃灭菌20 min。
无机盐培养基(MSM)： MgSO47H2O 0.20 gL–1，K2HPO43H2O 1.91 gL–1，(NH4)2SO4 1.50 gL–1，KH2PO4 0.50 gL–1；微量元素溶液(2 mL)：MnCl24H2O 0.425 mgL–1，CoCl26H2O 0.1 mgL–1，Na2MoO42H2O 0.01 mgL–1，ZnCl2 0.05 mgL–1，CuSO45H2O 0.015 mgL–1，， Na2SeO42H2O 0.01 mgL–1NiCl26H2O 0.01 mgL–1，pH 7.0。
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