生物菌肥辅助植物修复铜污染土壤的研究
铜污染土壤问题日渐严重，利用生物菌肥提供土壤细菌，通过其与植物共存并辅助植物来吸收、降解、挥发和富集环境中重金属污染物，以达到修复重金属污染土壤的目的。本课题使用了PGPR和AMF菌肥，施用于野外Cu污染农田，经过2年的大田小区试验，测定菌肥对植物生长、重金属元素吸收和积累、对土壤重金属含量以及对土壤理化性质的影响。结果显示土壤铜浓度及有效态铜含量没有明显变化，植物铜含量有所降低，草坪草地上部生物量有所上升，说明施加菌肥后，促进了植物生长，减少了Cu向地上部的转运，但对土壤铜效果不明显，因此利用菌肥修复重金属土壤是一个长期过程。
目录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1
引言（或绪论）1
1材料与方法2
1.1材料与仪器 2
1.1.1材料 2
1.1.1.1供试材料2
1.1.1.2实验测定材料 2
1.1.2仪器2
1.2方法 2
1.2.1土壤铜含量测定2
1.2.2土壤各级形态铜含量的测定2
1.2.3土壤理化性质的测定3
1.2.3.1土壤中有机质的提取方法3
1.2.3.2土壤中总氮的提取方法3
1.2.3.3土壤中总磷和总钾的提取方法3
1.2.3.4土壤中微生物计数3
1.2.4植物干鲜重的测定4
1.2.5植物铜含量测定4
1.2.6植物体氮磷钾的测定4
1.2.6.1植物中总氮的提取方法4
1.2.6.2植物中总磷的提取方法4
1.2.6.3植物中总钾的提取方法4
2结果与分析4
2.1土壤4
2.1.1土壤铜含量及各形态铜含量分析4
2.1.2土壤氮、磷、钾及有机质含量分析5
2.1.3土壤中微生物数量分析7
2.2植物9
2.2.1植物生物量9
2.2.2植物铜含量9
2.2.3植物氮、磷、钾含量10
3讨论11
*好棒文|www.hbsrm.com +Q: &351916072&
致谢12
参考文献12 生物菌肥辅助植物修复铜污染土壤的研究
引言
引言
我国在近三十年的不断发展中，重工业生产、农业技术等都得到了巨大的进步和极大的提高。随之而来的环境污染问题却日益严重,特别是重金属污染。重金属污染物在土壤中具有隐蔽性、滞留时间长、移动性差、不能被微生物所降解等特点[1]。使土壤肥力退化，降低农作物产量与品质，甚至通过食物链危及人类的健康与生命安全。修复被重金属污染的土壤、恢复土壤生产力、保障人类及生物健康安全、实现社会经济可持续发展，已引起人们的广泛关注[2]。
微生物菌肥是指一类含有活体微生物的特定肥料，其中的生物菌种是从大自然中分离纯化而来，包括放线菌、酵母菌、丝状杆菌等[3]。分离出来的微生物经过工业发酵，以草碳、褐煤等作为载体加工成高含菌量的生物制剂[4]。微生物菌肥通过特定菌株的自身代谢可以促进作物生长，提高植物的生物量，如根际细菌（PGPR），土壤细菌甚至可以促进重金属溶解，提高重金属的生物有效性[5]。在重金属污染土壤中，在重金属的胁迫下，微生物种群结构和新陈代谢发生改变，并对重金属进行富集、沉淀、氧化还原，从而达到修复重金属污染土壤的目的[6]。
早在上世纪90年代，人们长期以来都认为植物是用于吸收大气中的CO2或工业废气[7]，之后出现了植物修复这一名词，就是利用植物去修复土壤中的有机污染物和无机污染物[8]。植物修复的过程包括吸收和清除污染物以及固定或分解污染物，降低土壤中重金属浓度，修复重金属土壤[9]。
为了提高植物修复重金属土壤的能力，在植物修复的基础上，施加生物菌肥，形成微生物植物联合修复体，能够强化植物修复作用。生物菌肥能够增加植物根部重金属浓度，促进固定或转化；促进植物吸收营养，增强抗逆性[10]。利用土壤微生物植物的共存关系，充分发挥植物修复和生物菌肥各自的优势，弥补不足，提高植物修复效率，最终达到修复重金属污染土壤的目的[11]。
本课题使用了PGPR、AMF两种菌肥，施用于野外Cu污染农田，经过2年的大田小区试验，测定了菌肥对植物生长、重金属元素吸收和积累、对土壤重金属含量的影响以及对土壤理化性质的影响。实验主要内容是测定土壤中铜含量、有效态铜含量以及氮磷钾含量和有机质百分比，植物的生物量、铜含量以及氮磷钾含量。
1 材料与方法
1．1 材料与仪器
1.1.1材料
1.1.1.1供试材料
供试植物：狗牙根（Cynodondactylon (Linn.)Pers.）、
供试菌肥：细菌菌肥2号（液体）；AMF粉剂（固体）。
1.1.1.2实验测定材料
土样：27个（过100目）
植物样：27个
CaCl2（1mol/L）、浓硝酸、NaAc?Hac（1mol/L）、氯化羟胺（0.04mol/L）、HNO3溶液（0.02mol/L）、30%过氧化氢、醋酸铵溶液（3.2mol/L）、HNO3HClO4（V：V=4：1）、5%硝酸溶液、98%浓硫酸、重铬酸钾溶液、0.5% C标准液、EDTA溶液、苯甲酸磷酸缓冲液、NaOH溶液（1mol/L）、钠氏试剂、安替福明溶液、HNO3HClO4（V：V=87：13）、酒石酸钠溶液(100g/L)、KOH溶液(100 g/L)、奈氏试剂、二硝基酚指示剂、NaOH溶液(4 mol/L)、0.5%酒石酸锑钾溶液、钼锑抗试剂
1.1.2仪器
消煮炉（Labtech，DigBlock ED54）
火焰原子吸收分光光度计（AAS）
土壤养分测定仪
分光光度计
1．2 方法
实验小区位于句容市宝华镇铜山村，土壤重金属污染物为Cu。
1.2.1土壤铜含量测定
烘干的土壤样品用玛瑙研钵研磨，过100目筛，称取土样 0.25 g置于消煮管中，用HNO3HClO4（V：V=4：1）混合液消煮，火焰原子吸收分光光度计（AAS）测定Cu含量。
1.2.2土壤各级形态铜含量的测定
Cu（Ⅰ）: 1.000g过100目的土样，加1MCaCl2溶液8ml，振荡1h， 5000r/min离心10min，取4ml上清液，加入1滴浓硝酸；
Cu（Ⅱ）:向上述沉淀物加水，振荡，离心10min后弃上清，加入1mol/L的NaAcHAc溶液8ml，振荡5h， 5000r/min离心10min，取4ml上清液，加入1滴浓硝酸；
Cu（Ⅲ）:向上述沉淀物加水，振荡，离心10min后弃上清，加入0.04mol/L氯化羟胺溶液20ml，85℃水浴2h，每隔30min振荡1min，水浴后振荡4h，加水，5000r/min离心10min，取4ml上清液，加入1滴浓硝酸；
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摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1
引言（或绪论）1
1材料与方法2
1.1材料与仪器 2
1.1.1材料 2
1.1.1.1供试材料2
1.1.1.2实验测定材料 2
1.1.2仪器2
1.2方法 2
1.2.1土壤铜含量测定2
1.2.2土壤各级形态铜含量的测定2
1.2.3土壤理化性质的测定3
1.2.3.1土壤中有机质的提取方法3
1.2.3.2土壤中总氮的提取方法3
1.2.3.3土壤中总磷和总钾的提取方法3
1.2.3.4土壤中微生物计数3
1.2.4植物干鲜重的测定4
1.2.5植物铜含量测定4
1.2.6植物体氮磷钾的测定4
1.2.6.1植物中总氮的提取方法4
1.2.6.2植物中总磷的提取方法4
1.2.6.3植物中总钾的提取方法4
2结果与分析4
2.1土壤4
2.1.1土壤铜含量及各形态铜含量分析4
2.1.2土壤氮、磷、钾及有机质含量分析5
2.1.3土壤中微生物数量分析7
2.2植物9
2.2.1植物生物量9
2.2.2植物铜含量9
2.2.3植物氮、磷、钾含量10
3讨论11
*好棒文|www.hbsrm.com +Q: &351916072&
致谢12
参考文献12 生物菌肥辅助植物修复铜污染土壤的研究
引言
引言
我国在近三十年的不断发展中，重工业生产、农业技术等都得到了巨大的进步和极大的提高。随之而来的环境污染问题却日益严重,特别是重金属污染。重金属污染物在土壤中具有隐蔽性、滞留时间长、移动性差、不能被微生物所降解等特点[1]。使土壤肥力退化，降低农作物产量与品质，甚至通过食物链危及人类的健康与生命安全。修复被重金属污染的土壤、恢复土壤生产力、保障人类及生物健康安全、实现社会经济可持续发展，已引起人们的广泛关注[2]。
微生物菌肥是指一类含有活体微生物的特定肥料，其中的生物菌种是从大自然中分离纯化而来，包括放线菌、酵母菌、丝状杆菌等[3]。分离出来的微生物经过工业发酵，以草碳、褐煤等作为载体加工成高含菌量的生物制剂[4]。微生物菌肥通过特定菌株的自身代谢可以促进作物生长，提高植物的生物量，如根际细菌（PGPR），土壤细菌甚至可以促进重金属溶解，提高重金属的生物有效性[5]。在重金属污染土壤中，在重金属的胁迫下，微生物种群结构和新陈代谢发生改变，并对重金属进行富集、沉淀、氧化还原，从而达到修复重金属污染土壤的目的[6]。
早在上世纪90年代，人们长期以来都认为植物是用于吸收大气中的CO2或工业废气[7]，之后出现了植物修复这一名词，就是利用植物去修复土壤中的有机污染物和无机污染物[8]。植物修复的过程包括吸收和清除污染物以及固定或分解污染物，降低土壤中重金属浓度，修复重金属土壤[9]。
为了提高植物修复重金属土壤的能力，在植物修复的基础上，施加生物菌肥，形成微生物植物联合修复体，能够强化植物修复作用。生物菌肥能够增加植物根部重金属浓度，促进固定或转化；促进植物吸收营养，增强抗逆性[10]。利用土壤微生物植物的共存关系，充分发挥植物修复和生物菌肥各自的优势，弥补不足，提高植物修复效率，最终达到修复重金属污染土壤的目的[11]。
本课题使用了PGPR、AMF两种菌肥，施用于野外Cu污染农田，经过2年的大田小区试验，测定了菌肥对植物生长、重金属元素吸收和积累、对土壤重金属含量的影响以及对土壤理化性质的影响。实验主要内容是测定土壤中铜含量、有效态铜含量以及氮磷钾含量和有机质百分比，植物的生物量、铜含量以及氮磷钾含量。
1 材料与方法
1．1 材料与仪器
1.1.1材料
1.1.1.1供试材料
供试植物：狗牙根（Cynodondactylon (Linn.)Pers.）、
供试菌肥：细菌菌肥2号（液体）；AMF粉剂（固体）。
1.1.1.2实验测定材料
土样：27个（过100目）
植物样：27个
CaCl2（1mol/L）、浓硝酸、NaAc?Hac（1mol/L）、氯化羟胺（0.04mol/L）、HNO3溶液（0.02mol/L）、30%过氧化氢、醋酸铵溶液（3.2mol/L）、HNO3HClO4（V：V=4：1）、5%硝酸溶液、98%浓硫酸、重铬酸钾溶液、0.5% C标准液、EDTA溶液、苯甲酸磷酸缓冲液、NaOH溶液（1mol/L）、钠氏试剂、安替福明溶液、HNO3HClO4（V：V=87：13）、酒石酸钠溶液(100g/L)、KOH溶液(100 g/L)、奈氏试剂、二硝基酚指示剂、NaOH溶液(4 mol/L)、0.5%酒石酸锑钾溶液、钼锑抗试剂
1.1.2仪器
消煮炉（Labtech，DigBlock ED54）
火焰原子吸收分光光度计（AAS）
土壤养分测定仪
分光光度计
1．2 方法
实验小区位于句容市宝华镇铜山村，土壤重金属污染物为Cu。
1.2.1土壤铜含量测定
烘干的土壤样品用玛瑙研钵研磨，过100目筛，称取土样 0.25 g置于消煮管中，用HNO3HClO4（V：V=4：1）混合液消煮，火焰原子吸收分光光度计（AAS）测定Cu含量。
1.2.2土壤各级形态铜含量的测定
Cu（Ⅰ）: 1.000g过100目的土样，加1MCaCl2溶液8ml，振荡1h， 5000r/min离心10min，取4ml上清液，加入1滴浓硝酸；
Cu（Ⅱ）:向上述沉淀物加水，振荡，离心10min后弃上清，加入1mol/L的NaAcHAc溶液8ml，振荡5h， 5000r/min离心10min，取4ml上清液，加入1滴浓硝酸；
Cu（Ⅲ）:向上述沉淀物加水，振荡，离心10min后弃上清，加入0.04mol/L氯化羟胺溶液20ml，85℃水浴2h，每隔30min振荡1min，水浴后振荡4h，加水，5000r/min离心10min，取4ml上清液，加入1滴浓硝酸；
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